إجراءات الرعاية الأساسية

نظرا لأن الفئران والجرذان تمثل أكثر من تسعين بالمائة من المستخدمة في البحوث الطبية الحيوية ، فإن العناية المناسبة بهذه الكائنات الحية أمر بالغ الأهمية لنتائج التجارب. تبدأ إجراءات الرعاية هذه في البداية بتفريغ من حاويات الشحن ، إلى تغيير الأقفاص ، إلى الحفاظ على ظروف السكن المناسبة ، وتوفير نظام غذائي مناسب ، وضمان البيئة المناسبة. على الرغم من وجود إجراءات عامة تنطبق على غالبية الفئران والجرذان في المختبر ، إلا أن بعض ، مثل تلك التي تعاني من نقص المناعة ، تتطلب مزيدا من الاهتمام من أجل الحفاظ عليها لأغراض تجريبية.

سيصف هذا الفيديو المعايير وإجراءات الرعاية الأساسية لكل من ذات الكفاءة المناعية والمناعة. وأخيرا ، سنوضح بعض الأمثلة على التجارب التي توضح كيف يستخدم العلماء هذه المعرفة لأغراض بحثية مختلفة.

يشكل استقبال من المؤسسات الأخرى خطرا على الموجودة بالفعل داخل المنشأة ، حيث يمكن أن تتلامس صناديق النقل مع العوامل المسببة للأمراض. لذلك ، يجب استخدام الإجراء المناسب عند تفريغ حاويات الشحن.

قبل التعامل مع أي ، من المهم ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة ، أو معدات الوقاية الشخصية. الحد الأدنى من معدات الوقاية الشخصية التي يجب ارتداؤها هو معطف المختبر والقفازات ونظارات السلامة وقناع من النوع الجراحي الذي يقلل من التعرض للغبار والمواد المسببة للحساسية. الخطوة التالية هي تحديد الأقفاص المناسبة للحيوانات الواردة. بعد ذلك ، قم بتزويد القفص بمواد الفراش والتعشيش المناسبة. وخذ الأقفاص المعدة إلى غرفة الاستقبال التي يتم التحكم في درجة حرارتها ، بحيث تكون جاهزة للنقل قبل وصول.

عند وصول الشحنة ، ضع صناديق النقل في مكان آمن في غرفة الاستلام. افحص الحاوية بحثا عن أي ضرر وقم بتطهير الأسطح الخارجية لتدمير أي مسببات الأمراض الضارة. تأكد من ملامسة المطهر للعلبة لمدة 15-30 دقيقة على الأقل ، وفقا لتوصيات الشركة المصنعة. ثم ضع الحاوية في محطة نقل أو ATS. توفر هذه المحطة هواء جسيمات عالي الكفاءة ، أو HEPA ، تدفق هواء أحادي الاتجاه مفلتر داخل غطاء المحرك. يحمي HEPA المستخدم من مسببات الحساسية ويحمي من هواء الغرفة المحيطة ، مما يقلل من فرصة التلوث. بعد ذلك ، افتح حاوية الشحن وقم بتقييم الصحة العامة للقوارض. قم بتدوين أي يبدو أنه مصاب أو مريض. بعد ذلك ، ضعها في القفص المجمع بالفعل بأحجام المجموعة المناسبة ، وقم بتغطية القفص بغطاء القضيب السلكي وقم بتأمين الحاجز لإنشاء منطقتين. حدد الطعام المناسب وضعه في جانب واحد واترك الجانب الثاني مفتوحا للسماح بدوران هواء أفضل. أخيرا ، إذا لم يتم وضع على رف به سقي تلقائي ، فأضف زجاجة ماء لضمان إمدادات المياه الكافية. تذكر أنه يجب تطهير المنشطات الأمفيتامينية في نهاية كل جلسة ، ويجب إيقاف تشغيل المنفاخ عند التطهير.

لتغيير القفص ، ضع القفصين - قفص جديد مع مادة الفراش المناسبة والقفص المستخدم مع - في ATS. يمكن للمرء أن ينقل من القفص قديم إلى القفص جديد باليد أو باستخدام ملقط مبطن. تمت مناقشة هاتين الطريقتين في مقطع فيديو آخر لهذه المجموعة. تذكر أنه يمكن فتح قفص واحد فقط من في كل مرة. بالنسبة لذكور الفئران أو الإناث التي لديها قمامة ، فقد ثبت أن نقل منطقة تعشيش الفئران إلى القفص النظيف يساعد في الانتقال. بمجرد وضع الجزء العلوي من القفص على القفص الجديد ، انقل الطعام من أعلى القفص القديم إلى الجزء العلوي الجديد وأضف المزيد من الطعام إذا لزم الأمر. بعد ذلك ، ضع الجزء العلوي من الحاجز ، وأعد القفص إلى الرف. من الممارسات الجيدة تغيير القفازات بين الأقفاص أو بين المجموعات.

يختلف إجراء تفريغ التي تعاني من نقص المناعة قليلا ، حيث يجب أن تكون الأشياء معقمة. يوصى بتشغيل المنفاخ الموجود داخل غطاء المحرك قبل 24 ساعة على الأقل من الاستخدام. كما هو الحال بالنسبة للحيوانات المتوافقة مع المناعة ، عند وصول الشحنة ، قم برش الحاوية بمحلول مطهر في غرفة الاستقبال واتركها غير مفتوحة لمدة 15-30 دقيقة. في ATS المخصص للفئران التي تعاني من نقص المناعة ، رش غطاء التدفق الرقائقي بنسبة 70٪ من الإيثانول قبل 30 دقيقة من التلاعب بالحيوانات. من المثالي أن يشارك شخصان في نشاط التفريغ هذا - سيكون أحدهما هو الفني المعقم الذي يرتدي ثوبا معقما بالبخار وزوجا مزدوجا من القفازات المعقمة للتعامل مع باستخدام تقنيات معقمة والآخر سيكون الفني غير المعقم الذي يرتدي ثوبا نظيفا للعزل وزوجا من القفازات للتعامل مع العناصر الملوثة. يجب أن يرتدي كلاهما قناعا وغطاء للشعر ونظارات أمان.

قبل فتح حاوية الشحن داخل غطاء المحرك ، ضع جميع الإمدادات والأقفاص فيها ورش الجزء الخارجي منها بالكحول. وعند وصول الشحنة ، ضع صندوق المستلم في غطاء المحرك ورشه بنسبة 70٪ من الإيثانول أيضا. هناك خياران للقفص المعقم ، إما قفص قياسي تم لفه وتعقيمه بالبخار ، أو الوحدات التي تستخدم لمرة واحدة والتي تم تعقيمها باستخدام التشعيع من قبل البائع.

ابدأ عملية التفريغ بفتح الطعام المعقم ، متبوعا بفتح صندوق النقل. في هذه المرحلة ، يجب على المعالج التخلص من الزوج الأول من القفازات المعقمة. بعد ذلك ، يقوم الشخص غير المعقم بفك غلاف القفص المعقم وتمريره بشكل معقم إلى معالج الذي يزيل بعد ذلك غطاء المحرك وغطاء القضيب السلكي ، ويضعهما رأسا على عقب في غطاء المحرك. بعد ذلك ، يتم ملء أنبوب الشرب الموجود على القفص بالماء في المحطة الموجودة في غطاء المحرك. أخيرا ، يضع معالج في القفص ، ويؤمنه بغطاء القضيب السلكي ، ويضيف الطعام ويضع غطاء المحرك في مكانه. لاحظ أن منفاخ غطاء المحرك يجب أن يظل قيد التشغيل في جميع الأوقات للحفاظ على البيئة المعقمة. في النهاية ، يقوم الشخص غير المعقم بإزالة القفص المأهول بالسكان من غطاء المحرك ووضعه على رف مناسب. لتجنب التلوث المتبادل المحتمل بين المجموعات ، يجب على معالج تغيير القفازات بعد كل حاوية شحن.

لتغيير الأقفاص للحيوانات التي تعاني من نقص المناعة ، فإن إعداد غطاء المحرك والأقفاص ومعدات الوقاية الشخصية هو نفسه لتفريغ هذه. وتقنية النقل هي نفسها ذات الكفاءة المناعية ، ولكن في ظل ظروف معقمة.

الآن دعونا نناقش ظروف السكن المناسبة للحيوانات ، وهو جانب مهم آخر لتوفير الرعاية الأساسية. يتم وضع الفئران والجرذان بشكل أساسي في قفص من نوع صندوق الأحذية مع قاع صلب يحتوي على مواد الفراش. يوفر قفص الفأر النموذجي 75 بوصة مربعة من مساحة الأرضية ، وهي كافية لحد أقصى 5 فئران بالغة. من ناحية أخرى ، تبلغ مساحة قفص الفئران 142 بوصة مربعة وهو مناسب لفئران بالغتين. عادة ما تكون الأقفاص الثابتة مغطاة بغطاء قضيب سلكي وتضاف مادة المرشح فوق الجزء العلوي من القفص كغطاء محرك السيارة. تحتوي الأقفاص ذات التهوية الفردية ، أو IVCs ، أيضا على غطاء قضيب سلكي وغطاء محرك ، ولكن يتم وضعها على رف يوفر تدفق الهواء إلى القفص. هذا يلغي الحاجة إلى تغيير القفص في كثير من الأحيان مثل الأقفاص الثابتة ، والتي قد تكون مفيدة للحيوانات التي تعاني من نقص المناعة.

تحتوي جميع أنظمة الأقفاص على إمدادات الغذاء والماء. توجد إما مغذيات موضوعة داخل قفص أو يتم استخدام جزء من غطاء شريط السلك لتخزين الطعام. يجب وضع الطعام بحيث لا تتسخ من قبل. عادة ما يتم توفير المياه عن طريق زجاجة ماء موضوعة في الجزء العلوي من القفص ، أو عبر صمام شرب سقي أوتوماتيكي وهو مكون مدمج في قفص. بالنسبة لخيار صمام الشرب ، عندما يتم تعشيق القفص على رف ، يتم نقل الماء إلى الأنبوب لنظام الري الأوتوماتيكي المصمم لتلبية احتياجات في جميع أنحاء منشأة.

ينص دليل لرعاية واستخدام المختبر على أنه يجب تعقيم جميع أدوات الأقفاص كل أسبوعين على الأقل. قد تحتاج بعض الأقفاص والملحقات إلى التغيير في كثير من الأحيان كما هو محدد بمستوى الرائحة والأمونيا في العلبة.

الآن دعنا نتحدث عن إمدادات الغذاء والماء المناسبة للحيوانات ذات المناعة ونقص المناعة. هناك العديد من الأعلاف المتاحة تجاريا مع تركيبات مختلفة من البروتين والكربوهيدرات والدهون. من الناحية المثالية ، يجب أن تتكون الأعلاف من 15-19٪ بروتين و 44٪ كربوهيدرات و 4-9٪ دهون. بالنسبة للحيوانات التي تعاني من نقص المناعة ، تأكد من تعقيم العلف.

يمكن استخدام ماء الصنبور ، أو التناضح العكسي الذي هو ماء التناضح العكسي ، للحيوانات ذات الكفاءة المناعية ، ولكن بالنسبة للحيوانات التي تعاني من نقص المناعة ، يمكن أن يكون الماء مصدرا للتلوث ، وبالتالي يحتاج إلى التعقيم. يتم الحفاظ على العقم في الماء عن طريق إضافة قطرتين من حمض الهيدروكلوريك المولار 12 إلى 8 لترات من ماء التناضح العكسي ، مما يؤدي إلى تحمض الماء إلى درجة حموضة 2.5-3 ويحد من نمو البكتيريا. ثم صب الماء في زجاجات فردية وقم بتغطيتها بورق الألمنيوم. ضع أغطية الزجاجات مع أنابيب الشرب بشكل منفصل في كيس الأوتوكلاف ، وضع كل شيء في الأوتوكلاف للتعقيم بالبخار.

الآن دعونا نناقش الظروف البيئية القياسية الضرورية لرعاية.

على مستوى القفص ، يكون السكن الاجتماعي إلزاميا ما لم يكن مبررا علميا أو إذا كان غير متوافق مع جميع الأخرى. يسمح إثراء البيئة بالأكواخ الورقية ومواد التعشيش للحيوانات بإظهار سلوكيات خاصة بالأنواع مثل بناء العش والحفر ، مما يقلل بدوره من مستوى التوتر ويزيد من الرفاهية العامة للحيوانات. توفر مواد التعشيش أيضا منطقة نوم مشبعة بالفيرومونات المهدئة التي تساعد في إسكان العديد من ذكور الفئران في نفس القفص. كما ذكرنا سابقا ، فإن نقل منطقة التعشيش إلى القفص النظيف عند تغيير القفص يساعد على منع العدوان ، خاصة عند الذكور ، حيث يتم إدخال في بيئة جديدة. بالنسبة للحيوانات العارية الرياضية ، يجب على المرء أن يفكر في توفير فراش إضافي ومواد تعشيش من نوع الورق الممزق في أقفاصها للمساعدة في التنظيم الحراري.

على مستوى الغرفة ، يجب أن تكون درجة حرارة الفئران والجرذان بين 68 و 79 درجة فهرنهايت. يجب أن يكون مستوى رطوبة الغرفة 30-70٪ ، حيث يمكن أن تؤدي المستويات المنخفضة إلى حالة تعرف باسم ringtail. معلمة الغرفة الثالثة هي الإضاءة. وهذا يشمل شدة الضوء والدورات. عادة ، يتم ضبط غرفة على دورة إضاءة لمدة 12 ساعة / 12 ساعة مظلمة. يجب أن تختلف شدة الإضاءة وفقا للنشاط في الغرفة. عندما يعمل الفنيون ، يمكن استخدام مستويات إضاءة أعلى. ومع ذلك ، يجب خفضه إلى حوالي 325 لوكس بمجرد الانتهاء من جميع الأنشطة. أخيرا ، يجب أيضا التحكم في تدفق الهواء داخل الغرفة بعناية. يجب أن يحدث ما لا يقل عن 10-15 تغييرا للهواء النقي بنسبة 100٪ كل ساعة. هذا يقلل من الميكروبات والروائح في غرفة.

أخيرا ، دعنا نرى كيف يستخدم الباحثون هذه المعرفة حول إسكان المختبر والنظام الغذائي وتفضيلات البيئة في تجاربهم.

كما تمت مناقشته سابقا ، تظهر المختبر عموما سلوكا في بناء العش ، مما يقلل من التوتر ، وقد استخدم الباحثون هذا كمؤشر على رفاهية. في هذه التجربة بالذات ، طور العلماء نظاما غير متحيز لتسجيل العش الذي تم بناؤه ثم استخدموه لدراسة تأثير درجة الحرارة المحيطة على سلوك بناء العش. كما ترون ، تسببت الزيادة في درجة الحرارة في انخفاض كبير في النتيجة ، مما يسلط الضوء على دور درجة الحرارة المحيطة في رعاية.

بالنظر إلى أن الفئران والجرذان تحب الكربوهيدرات ، فقد استخدم الباحثون علفا بأشكال مختلفة لاختبار الوظيفة الحركية للحيوانات. يتضمن ذلك تحليل البراعة أثناء أنواع مختلفة من مهام التعامل مع الطعام ، وفحص سلوك الوصول بعد التدخلات الجراحية أو الدوائية.

أخيرا ، من المعروف أن الفئران والجرذان ليلية ولا تفضل المناطق المضاءة. يستخدم العلماء هذه المعرفة لبناء بيئة لدراسة القلق في هذه الأنواع. على سبيل المثال ، أدخلت الأبحاث هنا إلى حقل مفتوح بسيط ودرست الوقت الذي تقضيه الفئران البرية والضربة القاضية في المناطق الداخلية والخارجية ، لتحليل تأثير ضربة قاضية للجين على السلوك الشبيه بالقلق.

لقد شاهدت للتو مقدمة JoVE لإجراءات الرعاية الأساسية للفئران والجرذان. يجب أن يكون لديك الآن فهم أفضل للتدابير التي يجب على المرء اتخاذها للتأكد من أن البيئة والتعامل مع هذه لا تسبب أي ضرر لصحة ويجب أن تعرف أيضا كيف يمكن للباحثين تعديل هذه المعايير لتحقيق أهداف علمية مختلفة. كما هو الحال دائما ، شكرا على المشاهدة!