Why is necropsy necessary when alternative research methods are available?

Necropsy is essential when new approach methodologies like organ-on-chip systems, organoids, and in silico models cannot capture whole-body effects such as metastasis, long-term toxicity, or causes of unexpected death. These alternatives lack the complexity to replicate systemic interactions, making necropsy critical for comprehensive postmortem analysis and understanding disease progression in living organisms.

What is the purpose of using 10% neutral buffered formalin in tissue preservation?

Neutral buffered formalin is the standard fixative used to preserve collected tissues for histological examination. It prevents tissue decay, autolysis, and putrefaction while stopping ongoing biochemical reactions and increasing mechanical strength and stability. Proper fixation is critical because tissue samples must be approximately 0.5-1 cm thick to allow sufficient penetration of the fixative solution.

How does the euthanasia method impact tissue quality in necropsy procedures?

The euthanasia method significantly affects sample quality. Carbon dioxide is commonly used because it causes animals to lose consciousness before pain perception, minimizing distress. However, CO2 euthanasia can cause fluid accumulation in lungs and trachea, appearing as frothy clear fluid, and may result in pulmonary hemorrhages visible as dark red splotches on lung surfaces, affecting histological interpretation.

What is blunt dissection and why is it important during necropsy?

Blunt dissection is a technique where scissors are used to spread tissues rather than cut them, with closed tips pushed into tissue and then opened to split along natural planes. This method requires patience and a delicate touch because it separates structures without cutting, preventing damage to adjacent organs and blood vessels that could compromise sample integrity and obscure pathological findings.

What organs should be examined in the abdominal cavity during necropsy?

Key abdominal organs include the spleen, stomach, small intestines (duodenum, jejunum, ileum), large intestine, cecum, pancreas, kidneys, and liver. Each organ requires careful observation for abnormalities in size, color, texture, or contents. The mesentery anchoring intestines should be examined for enlarged lymph nodes and masses. Changes in these organs may indicate inflammation, obstruction, infection, or other pathology affecting study results.

How are reproductive organs harvested differently in male and female rodents?

In females, the Y-shaped uterus with extending horns and ovaries located below kidneys are removed by cutting arterial attachments and the fallopian tube. In males, the seminal vesicles, prostate gland, and testes are harvested by grasping abdominal fat pads to expose testes, then cutting scrotal attachments and the vas deferens. Both require careful examination for changes in size, symmetry, color, or texture indicating disease.

What special technique is required when removing and preserving lungs during necropsy?

After lung excision, a loose ligature is placed around the trachea. A needle attached to a syringe containing fixative is threaded into the trachea lumen, the ligature is tightened, and fixative is slowly injected until lungs are gently inflated without overdistension. This crucial step prevents alveolar collapse and allows accurate histological assessment of lung tissue structure and pathology.

التشريح التشخيصي وحصاد الأنسجة

0 مشاهدات21:15 د

< p class = "jove_title" >1. الفحص الخارجي

يجب إجراء فحص خارجي إجمالي للجسم ، والذي يتضمن الفحص البصري للجسم بحثا عن الآفات والكتل ، كخطوة أولية في التشريح. يجب فحص معطف الشعر بحثا عن مناطق تساقط الشعر. يتم تقييم الأسنان والأظافر للنمو المفرط أو التآكل. يجب ملاحظة أي تلطيخ للفراء في الفم ، والفتحات ، والعينين ، والشرج ، والفتحات التناسلية. يجب إجراء اختبارات الشريط وكشط الجلد وفحوصات الجلد للكشف عن الطفيليات الخارجية (انظر الإجراءات أدناه).

اختبار الشريط
1. تشمل المعدات المطلوبة لاختبار الشريط قفازات وشريط من شريط السيلوفان الشفاف وشريحة مجهر زجاجي ومقص.
2. يتم ارتداء القفازات دائما عند التعامل مع الشريط ، حيث سترفع المادة اللاصقة الزيوت وخلايا الجلد من الأصابع ، مما يحجب النتائج أو يسبب الارتباك عند تقييم الشريحة.
3. قم بقص قطعة من الشريط أضيق قليلا من عرض شريحة المجهر وأقصر من طولها.
4. اضغط بعناية على الجانب اللاصق من الشريط إلى فتحة الشرج والمنطقة المحيطة بها ، ثم قم بإزالته بسرعة.
5. باستخدام الطرف المقابل للشريط ، اضغط عليه بين لوحي الكتف وقم بإزالته بسرعة.
6. ضع الشريط على شريحة المجهر.
7. اختبار الشريط جاهز للفحص المجهري. يمكن رؤية بيض الطفيليات بتكبير 4 أضعاف ولكن يجب فحصه بعد ذلك بتكبير 10 أضعاف لتحديد الأنواع بشكل صحيح.
8. المهم تجنب لمس الجانب اللاصق من الشريط. سيرفع الشريط الحطام من الأيدي التي ترتدي القفازات ويجعل قراءة الشريحة صعبة.
كشط الجلد
1. يتم إجراء اختبار كشط الجلد على أي مناطق من الثعلبة أو الآفات الجلدية أو الاستئصال.
2. المعدات المطلوبة لكشط الجلد هي شريحة مجهر زجاجي نظيف وزيت معدني وملعقة معدنية أو شفرة مشرط.
3. ضع بضع قطرات من الزيت المعدني على شريحة المجهر.
4. اضغط على الجلد في ثنية عند حافة الآفة أو منطقة الاهتمام.
5. ضع كمية صغيرة من الزيت المعدني على الجلد.
6. ضع حافة الملعقة أو شفرة المشرط على الجلد ، واكشط عكس اتجاه نمو الشعر.
7. استمر في الكشط حتى تظهر كمية صغيرة من الاحمرار على الجلد.
8. ضع الشعر والأنسجة المكشطة من سطح الجلد في الزيت على شريحة المجهر. إذا لزم الأمر ، انشر المادة بحيث يتم توزيعها بالتساوي في الزيت.
9. الشريحة جاهزة الآن للفحص تحت المجهر. إذا رغبت في ذلك ، يمكن تطبيق غطاء على قطرة الزيت على الشريحة. افحص الشريحة بتكبير 4X و 10X.
فحص الجلد
1. فحص الجلد هو آخر فحص خارجي يتم إجراؤه ؛ ومع ذلك ، يتم إجراؤه بالفعل بعد اكتمال الفحص الداخلي.
2. يتم وضع في طبق بتري زجاجي أو بلاستيكي بعد جمع جميع عينات الأعضاء الداخلية.
3. يوضع الطبق في الثلاجة لمدة 15 دقيقة.
4. بعد 15 دقيقة ، يوضع الطبق تحت مجهر تشريح ويتم فحص الجلد بحثا عن الطفيليات الخارجية. تنتقل معظم عث الفراء إلى نهايات الشعر ويمكن ملاحظتها بسهولة.

فئة

2. الفحص الإجمالي الداخلي لتجويف البطن

استئصال الجلد
1. يتم إجراء قطع صغير أمام الحوض عند الإناث وفوق القلفة عند الذكور.
2. يمتد قطع الجلد إلى الذقن.
3. يستخدم التشريح الحاد لتخفيف الجلد من اللفافة والعضلات.
4. يتم إجراء الجروح المستعرضة أمام الأطراف الخلفية والخلفية للأطراف الأمامية. يجب الحرص على عدم قطع الأوعية الدموية في المنطقة الإبطية.
5. استخدم تشريحا حادا لكشف منطقة عنق الرحم والصدر. يجب توخي الحذر الشديد لتجنب تمزق الأوعية الوداجية والسباتية في الرقبة.
الغدد الثديية
1. في الإناث ، افحص الأنسجة الثديية للبحث عن الكتل أو تغير اللون أو التشوهات.
2. زيادة حجم أنسجة الثدي المرضعات أو الحوامل ، وقد يكون الحليب موجودا.
3. تم العثور على الأنسجة الثديية من أعلى القص عند الاحتقان إلى الفتحة التناسلية على السطح البطني ، وتمتد بشكل جانبي إلى كلا الجانبين تقريبا تلامس السطح الظهري عند الوركين والكتفين.
4. يتطلب استئصال الغدد الثديية الإمساك بحافة الغدة باستخدام ملقط الإبهام واستخدام تشريح حاد لفك المرفقات بالجلد. بمجرد فصل الغدة عن الجلد ، يمكن استخدام مقص القزحية لقطع أي مرفقات متبقية قبل وضع الغدة في محلول تثبيتي.
الغدد تحت الجلد
1. يتم إقران الغدد الجرثومية وتقع في الجزء الأمامي من القلفة في ذكر الفئران. تبدو كبيرة ولونها رمادي إلى مصفر مع مظهر رغوي.
2. يتم إقران الغدد اللعابية تحت الفك السفلي ، وتقع في الفك السفلي ، وتمتد على طول الرقبة إلى عظم القص. لديهم غطاء صلب وملتصقون بإحكام بالعضلات.
3. تتطلب إزالة هذه الغدد تشريحا حادا وعناية إضافية عند العمل في منطقة عنق الرحم لمنع تمزق الأوعية الدموية. التشريح الحاد هو تقنية في التشريح التشريحي حيث يتم فصل الأنسجة وتعريض الهياكل الأساسية دون قطع.
4. بالنسبة للتشريح الحاد ، يتم استخدام المقص لنشر الأنسجة بعيدا عن بعضها البعض ، بدلا من تقطيعها. يتم دفع الأطراف المغلقة في الأنسجة ثم فتحها لتقسيم الأنسجة على طول المستويات الطبيعية. تتطلب هذه العملية الصبر واللمسة الرقيقة ، حيث يمكن أن يؤدي تمدد الأنسجة إلى تلف الأعضاء والأوعية الدموية المجاورة.
5. رفع الغدد ، بمجرد تحريرها من العضلات الأساسية ، ويتم قطع أي مرفقات متبقية.
6. تتطلب الغدد قطعا واحدا على الأقل للسماح باختراق المثبت.
7. يتم تقييم الدهون تحت الجلد من حيث الكمية والترسيب. قد يحتوي السمين على كمية كبيرة من الدهون مع شعور الجلد بسماكة. ستقل مرونة الجلد للحيوانات المصابة بالجفاف ، وستشعر بأنها أرق.
عضل
1. راقب عضلات البطن والوربية والمكشوفة للرقبة والأطراف. لاحظ أي سماكة أو كتل أو تغير غير طبيعي في اللون.
2. إذا كانت هناك حاجة إلى العضلات للتحليل ، فحدد العينة وقطعها قبل أخذ أي أعضاء في البطن لتقليل تلوث الدم.
فتح تجويف الجسم
1. يتم إجراء قطع عرضي صغير في أكثر نقاط الذيلية في عضلة البطن المكشوفة.
2. رفع العضلات بعيدا عن الأعضاء ، وقطع على طول الخط ألبا إلى الخنجري.
3. قطع عضلات البطن من خط الوسط بشكل جانبي ، فوق الأطراف الخلفية مباشرة على كلا الجانبين.
4. قطع عضلة البطن على طول منحنى الأضلاع على كلا الجانبين.
دهون البطن
1. تقييم كمية وتراكم الدهون في الجسم. سيكون للحيوان السليم وسادات دهنية في البطن وبعض الدهون على طول السطح الظهري في تجويف البطن. لن يحتوي الرقيق للغاية ، أو الصغير جدا ، على كميات كبيرة من الدهون المحيطة بالكلى.
2. راقب لون دهون الجسم ولاحظ أي تشوهات.

< p class = "jove_title" >3. أعضاء البطن

كبد
1. عادة ، يجب أن يكون لون الكبد أحمر داكن. يجب أن تكون الهوامش ناعمة وذات حافة واضحة. سيكون للكبد غير الطبيعي حافة سميكة ويمكن أن يكون له شقوق أو حواف صدفي.
2. يجب توخي الحذر عند التعامل مع الكبد ، لأنه نسيج قابل للتفتيت. أي اضطراب في سلامة العضو سيؤدي إلى تسرب الدم إلى تجويف الجسم وحجب الأعضاء.
3. يعكس الكبد برفق بعيدا عن الحجاب الحاجز ، وقم بعمل قطع في الأوعية الدموية الأمامية للكبد.
4. عكس الكبد مرة أخرى نحو الحجاب الحاجز وامسك العقدة الليفية التي تربط جميع فصوص الكبد مركزيا. رفع الكبد مع قطع جميع الملحقات بالأمعاء والمعدة.
5. قم بإزالة الكبد في قطعة واحدة وامسح الدم الزائد من سطح العضو. يمكن وضعها في حمام ملحي ، أو شطفها بمحلول ملحي معقم ، قبل تقطيعها إلى أقسام أرق للسماح باختراق المحاليل التثبيتية.
مرارة
1. المرارة عبارة عن كيس شفاف صغير غالبا ما يظهر باللون الأصفر بسبب تراكم الصفراء. إنه موجود في الفئران ، ولكن ليس في الفئران.
2. تقع المرارة بين معظم فصوص الكبد العلوية على طول خط الوسط. يرتبط بشكل عام بالحجاب الحاجز بواسطة لجام رفيع يمكن أن يتمزق عن طريق الخطأ ، مما يتسبب في تمزق المرارة.
3. يمكن إزالة المرارة بالكبد وفصلها لاحقا لفحصها.
طحال
1. الطحال أحمر غامق ويقع على طول الانحناء السفلي للمعدة. يجب أن يكون منتظم الشكل ، مع سطح غير لامع قليلا.
2. بشكل عام أكبر عند الذكور من الإناث. قد يكون لدى المصابة بالتهابات طفيلية داخلية أو التهابات بكتيرية أو أمراض الدم تضخم في الطحال.
3. نظرا لأن الطحال يقوم بتصفية خلايا الدم الحمراء التالفة من الدورة الدموية ، فإنه يمتلئ بالدم. عند إزالة الطحال ، تجنب ثقب العضو.
4. لإزالته ، يتم رفع الطحال وقطع المرفقات بين المعدة والطحال.
الأمعاء
1. تحدث تغييرات ما بعد الوفاة بسرعة وتشمل تجمع الدم في الأنسجة ، مما يؤدي إلى ظهور كدمات وانتفاخ الأمعاء بالغازات التي غالبا ما تنتج عن فرط نمو البكتيريا. يتم فحص الأمعاء بدقة بعد إزالتها من الجسم.
معدة
1. تقع المعدة في الطرف البعيد من المريء. يبدو أنه ذو لونين ، يميز بين الأجزاء العضلية والغدية.
2. يجب تقييم المعدة لوجود الطعام عن طريق الإحساس. تأكل القوارض عموما باستمرار بسبب ارتفاع معدل الأيض. يجب ملاحظة المعدة الفارغة ، لأنها يمكن أن تكون مؤشرا على المرض.
3. لا تقطع المعدة ، لأن المحتويات سوف تلوث الأعضاء الموجودة في تجويف البطن.
4. لإزالة المعدة من الأمعاء ، يتم قطع المريء أمام المعدة مباشرة. إذا كان سيتم وضع المعدة في وعاء مشترك من المثبت ، فيمكن ربط قطعة من الخيط حول المريء لمنع انسكاب محتويات المعدة قبل القطع.
الامعاء
1. تتكون الأمعاء الدقيقة من ثلاثة أقسام: الاثني عشر ، الصائم ، والدقاق. لن تحتوي على كريات برازية.
2. الاثني عشر هو قسم أقصر من العضلة العاصرة للمعدة الخلفية إلى بداية الصائم. تدخل القناة الصفراوية إلى الأمعاء الدقيقة عند الاثني عشر ، ويرتبط نسيج البنكرياس بقوة أكبر بهذا الجزء من الأمعاء الدقيقة.
3. الصائم هو الجزء المركزي من الأمعاء الدقيقة.
4. بقع باير - المكونة من أنسجة ليمفاوية في بقع بيضاوية صغيرة - على السطح غير المساريقي للصائم والدقاق في الفئران. ³هذه جزء من جهاز المناعة ويمكن أن تكون مفيدة في تشخيص أمراض المناعة.
5. الدقاق هو الجزء البعيد من الأمعاء الدقيقة وهو الجزء الأطول ، وينتهي عند الأعور.
الأعور
1. الأعور لونه أخضر وناعم جدا.
2. وهي تقع عند تقاطع الأمعاء الدقيقة والغليظة.
3. يحدث التخمير في الأعور ، لذا فإن ثقب العضو سيؤدي إلى رائحة كريهة وتلوث الأعضاء بالبكتيريا.
الغليظه
1. تبدأ الأمعاء الغليظة من الأعور وتستمر إلى فتحة الشرج. يمكن التعرف عليها بسهولة ، حيث يمكن تصور الكريات البرازية داخل تجويف الأمعاء.
2. يجب ألا يكون هناك أي مناطق نزيف أو تغير في اللون مباشرة بعد القتل الرحيم.
المساريق
1. يتم تثبيت الأمعاء الدقيقة والغليظة في الجسم بواسطة المساريق ، وهو غشاء يحتوي على الأوعية الدموية والدهون والغدد الليمفاوية.
2. يجب فحصه بحثا عن تضخم الغدد الليمفاوية وأي كتل قبل إزالة الأمعاء.
بنكرياس
1. البنكرياس هو عضو منتشر يقع أسفل المعدة وبين الطيات الأولى من الاثني عشر. إنه لونه أسمر فاتح إلى رمادي ويتكون من عدة فصوص صغيرة ذات حواف غير منتظمة.
2. قد لا يكون من الممكن إزالة البنكرياس في قطعة واحدة.
3. إذا كان سيتم حصاد أنسجة البنكرياس ، فيجب أن يتم ذلك قبل إزالة الأمعاء.
4. يجب إزعاج الأنسجة التي تم تحديدها على أنها بنكرياس بعناية بعيدا عن الأنسجة المساريقية المحيطة بها.
استئصال الأمعاء
1. تتم إزالة الأمعاء على شكل قطعة واحدة ، بدءا من المعدة وتمتد إلى فتحة الشرج.
2. يتم إجراء قطع من خلال الأمعاء الغليظة ، أمام فتحة الشرج مباشرة. يمكن رفع الأمعاء بالكامل وقطع أي مرفقات غشائية. يمكن بعد ذلك إزالة الأمعاء من المساريق وتقطيعها إلى أقسام وتثبيتها.
3. عند وضع أجزاء من الأمعاء في برطمانات تحتوي على أعضاء أخرى ، من الضروري ربط الأطراف لمنع تلوث الأنسجة بالبكتيريا المعوية.
4. يمكن الكشف عن تجويف الأمعاء عن طريق قطع طوله باستخدام مقص صغير ذو رؤوس دقيقة. يمكن شطف الجزء الداخلي بعد تعريض التجويف.
5. قد تتطلب بعض الدراسات إزالة جزء من الأمعاء وشطفه بدلا من قطعه. عن طريق تثبيت إبرة حادة في أحد طرفي الأنسجة المستأثورة ، يمكن دفع محلول ملحي أو مثبت إلى الأمعاء لطرد المحتويات.
كلية
1. الكلى عبارة عن أعضاء مقترنة تقع على عضلات الظهر. الكلية اليمنى أعلى من الكلية اليسرى. قد تكون الكلى في الأكبر سنا محاطة برواسب دهنية ، مما يجعل من الصعب تصورها.
2. يبلغ حجمها ولونها تقريبا حبة الكلى الداكنة ، ويجب أن تكون أسطحها ناعمة.
3. أمام الكلى توجد الغدة الكظرية ، وتظهر على شكل عقيدة صغيرة ذات لون وردي فاتح.
4. لإزالة الكلى ، قم بعزلها باستخدام ملقط ، وقم بقصها بين الكلى والحالب.
5. الكلى على كبسولة خارجية صلبة يمكن تقشيرها لتصور الأسطح بشكل أفضل. اقطع كلية واحدة إلى نصفين على طول المحور الطويل والكلية الأخرى بشكل عرضي. لاحظ أن أي حبيبات داخل الكلى يمكن أن تشير إلى وجود بلورات أو رواسب معدنية.
الجهاز التناسلي الأنثوي
1. الرحم هو هيكل على شكل حرف Y. جسم الرحم قصير مع القرون المزدوجة على اليسار واليمين. تنتهي القرون عند قناتي فالوب والمبايض. في الأنثى غير الحامل ، ستكون القرون وردية شاحبة ورقيقة. في الحامل ، ستظهر القرون أغمق ولها أوعية دموية واضحة تمتد بجوار قرون الرحم. مع استمرار الحمل ، سيكون لقرون الرحم مظهر "سلسلة من اللؤلؤ". ستخلق الأجنة النامية منطقة شاحبة داخل القرن ، ومع تطورها ، سوف يتمدد الرحم وسيصبح النسيج أرق ، مما يسمح بالتصور.
2. يقع المبيضان أسفل الكلى مباشرة. سيكون لها سطح خشن بسبب مراحل النضج المختلفة للبصيلات. تحتوي المبايض الكيسية على حويصلات مملوءة بالسوائل. يمكن أن يتراوح هذا السائل من القش الملون إلى المتفائل.
3. لإزالة المبايض، قم بقطع المرفقات الشريانية الأمامية وقناة فالوب للخلف. إذا رغبت في ذلك ، يمكن إخراج المبايض متصلة بالرحم.
4. لإزالة الرحم ، يجب الإمساك به برفق وتطبيق الجر حتى تتمكن من القطع أسفل عنق الرحم. بعد القطع ، ارفع الجسم وقرون الرحم ، وكسر أي تعلق في تجويف الجسم.
الجهاز التناسلي الذكري
1. الحويصلات المنوية بيضاء ، على شكل قرن كبش ، وتقع في الأمام للمثانة البولية ومتصلة على خط الوسط في غدة البروستاتا. يختلف الحجم ، لكن يمكن أن يكون كبيرا مثل الأعور.
2. تقع غدة البروستاتا المحيطة بالمثانة البولية في القاعدة. هذا النسيج بشكل عام هو تان خفيف. في الأكبر سنا ، قد تظهر تضخم. عادة ما يكون لدى الأكبر سنا المزيد من الدهون في الجسم التي قد تجعل تصور غدة البروستاتا أمرا صعبا.
3. يتم إقران الخصيتين وتقع في أكياس كيس الصفن. يجب أن يكون السطح أملسا مع ظهور الأوعية الدموية الدقيقة على السطح. تفتقر الفئران والجرذان إلى حلقة إربية أو العضلة العاصرة ، مما يسمح للحيوان بسحب الخصيتين إلى تجويف البطن. لتصور هذه ، أمسك وسادات دهون البطن الموجودة في أسفل البطن واسحبها إلى الأمام. سيؤدي ذلك إلى سحب الخصيتين من كيس الصفن للسماح بالفحص. يقع البربخ على طول الهامش السفلي للخصية ويتناقص تدريجيا نحو الأعلى. ترتبط الأسهر بنهاية البربخ وتؤدي إلى البروستاتا.
4. يمكن إزالة الخصيتين عن طريق قطع المرفق في كيس الصفن وقطع الأسهر.
5. تتطلب إزالة البروستاتا والحويصلات المنوية الإمساك بقاعدة المثانة البولية ورفعها ، مع قطع المرفقات الموجودة أسفل البروستاتا.

< p class = "jove_title" >4. التجويف الصدري

الرئتين
1. عادة ما تكون الرئتان ذات لون وردي فاتح ، وإسفنجية الملمس مع سطح أملس. ومع ذلك ، يمكن أن يسبب القتل الرحيم مع ثاني أكسيد الكربون₂ نزيفا رئويا ، مما يؤدي إلى بقع حمراء داكنة يمكن أن تغطي سطح الرئة بالكامل.
قلب
1. القلب أحمر غامق مع أربع غرف. البطينان عضليان ويشعران بالصلابة عند لمسه. الأذينين أحمر أغمق اللون ويجلسان في الجزء العلوي من البطينين. هم أقل عضلية بكثير ويبدون مترهلين.
2. كيس التامور عبارة عن غشاء رقيق وشفاف يحيط بالقلب.
الغدة الصعترية
1. الغدة الصعترية في الأمام من القلب وتجلس فوق القصبة الهوائية. يجب أن تكون ناعمة في الملمس.
2. في الصغيرة ، يظهر على شكل تان مع قوام دهني.
3. تتسلل الأكبر سنا إلى الأنسجة الدهنية في الغدة الصعترية ، مما يؤدي إلى توسيعها وإعطاء الغدة الصعترية لونا أبيض.
القصبه الهوائيه
1. تمتد القصبة الهوائية من لسان المزمار إلى تشعب الشعب الهوائية. إنه أنبوب غضروفي مموج ومرن.
2. يجب أن يكون واضحا ولا يحتوي على أي سائل أو سائل رغوي في التجويف. يمكن أن يتسبب القتل الرحيم مع ثاني أكسيد الكربون₂ في تراكم السوائل (المصلية و / أو الرغوية) في الرئتين والقصبة الهوائية بسبب النزيف.
المرئ
1. يمتد المريء من تجويف الفم إلى المعدة. إنه أنبوب رفيع جدا يقع خلف القصبة الهوائية وخلف القلب مباشرة ، ويمر عبر الحجاب الحاجز إلى المعدة.
2. يصعب إزالة المريء ، حيث يتمزق بسهولة على الرغم من أن الأنسجة قابلة للتمدد. تتم إزالة المريء بسهولة عن طريق تشريحه بعيدا عن القصبة الهوائية بعد إزالة القلب والرئتين.
إزالة الأعضاء الصدرية
1. يمكن إزالة القلب والرئتين معا بسهولة.
2. ضع الملقط بشكل عمودي على القصبة الهوائية وامسك القصبة الهوائية بإحكام ، فوق الغدة الصعترية مباشرة.
3. باستخدام المقص ، قم بعمل قطع عمودي على القصبة الهوائية أمام الملقط. يجب أن يقطع هذا القطع القصبة الهوائية والمريء.
4. دون تخفيف قبضة القصبة الهوائية ، ارفع القصبة الهوائية لأعلى ذيليا ، وقص أي ملحقات للرئتين على سطح العمود الفقري في القفص الصدري.
5. قد يحتاج المريء إلى القطع ليتمكن من رفع القلب والرئتين من تجويف الصدر.
6. بعد إزالة القلب من الجسم ، يمكن شطفه بالمحلول الملحي لإزالة الدم المتبقي والجلطات ، أو يمكن ملؤه بالمثبت من خلال الشريان الأورطي.
7. بمجرد استئصال الرئتين ، يتم نفخهما بالمثبت. يتم وضع الرباط بشكل فضفاض حول القصبة الهوائية. يتم ربط إبرة متصلة بحقنة تحتوي على مثبت الاختيار في تجويف القصبة الهوائية. يتم شد الرباط حول الإبرة ، ويتم حقن المثبت حتى يتم نفخ الرئتين. عند إزالة الإبرة ، يتم شد الرباط لمنع التسرب.
تجويف الفم
1. لسان
  1. لسان القوارض ناعم.
  2. افحص السطح بحثا عن الآفات ، بما في ذلك الجانب السفلي.
  3. نادرا ما يتم حصاد اللسان باستثناء الفحوصات المتخصصة مثل دراسات سرطان الفم.
  4. لإزالة اللسان ، قم بقطع الأسطح الشدقية على كل جانب من تجويف الفم إلى المفصل الصدغي الفكي.
  5. خلع الفك السفلي وعكس الفك العلوي للكشف عن لسان المزمار وقاعدة اللسان.
  6. باستخدام ملقط لتمديد اللسان ، قم بقص المرفقات الموجودة تحتها ذيلية إلى قاعدة اللسان.
  7. الحفاظ على الجر ، وقطع أفقيا في قاعدة اللسان لتحريره من تجويف الفم.
2. أسنان
  1. تتكون أسنان الفئران من ثلاثة أضراس وقاطعة واحدة في كل ربع مفصولة بانبساط بلا أسنان. وهي مغطاة بالمينا فقط على الجانب الشفوي ؛ على السطح الداخلي للسن هو العاج.
  2. عادة ما تكون أسنان الفئران صفراء / برتقالية. يظهر هذا اللون بشكل أكثر وضوحا على مينا القاطعة ويرجع ذلك إلى وجود صبغة تحتوي على الحديد. يبدأ اللون في حوالي 21 يوما بعد الولادة ويتعمق مع تقدم العمر.
  3. افحص الأسنان بحثا عن فرط النمو أو سوء الإطباق.

< ص الفئة = "jove_title" >5. الرأس

العيون
1. يجب أن تكون العيون متساوية في الحجم وخالية من الإفرازات. يجب أن تكون الملتحمة ناعمة.
2. لإزالة العينين ، اضغط على الجلد المحيط بالعين للخلف ولأسفل لإبعاد العين عن الحجاج. باستخدام ملقط منحني ، اعزل الكرة الأرضية وقم بقص المرفقات التي تثبتها في المقبس.
اذان
1. راقب الأذنين لتحديد الهوية. يطلب بعض المحققين تضمين علامات الأذن مع عينات الأعضاء لتأكيد هوية.
2. يتم فحص قنوات الأذن بحثا عن أي آفات أو كتل أو إفرازات.
أنف
1. لوحظ الأنف بحثا عن السوائل أو الإفرازات.
2. يجب أن تكون النافذة متماثلة وواضحة.

يعد

فحص ما بعد الوفاة للأعضاء والأنسجة مكونات لا يتجزأ من العديد من التجارب المعملية ، والتي تعتمد على النقاط الزمنية النهائية لجمع البيانات التي تم جمعها من تحليلات الأعضاء المحصودة. لذلك ، من المهم معرفة تقنية التشريح التشخيصية الصحيحة وحصاد الأنسجة ، حيث يمكن أن يؤثر الإجراء بشكل كبير على جودة العينات التي تم جمعها. سيراجع هذا العرض طريقة تشريح واستخراج أعضاء البطن والتناسلية والصدرية من المختبر.

قبل البدء في الإجراء ، يجب بدء نموذج يتضمن تاريخا كاملا للحيوان: رقم تعريف ، والجنس ، وظروف السكن ، وتاريخ الميلاد ، وتاريخ الوفاة ، ورقم الدراسة / البروتوكول ، واسم الباحث الرئيسي.

بعد ذلك ، قم بإعداد منطقة التشريح. ضع غطاء مقعد ، وصينية تشريح ، وأدوات مخصصة للتشريح ، والتي تشمل المقص ، والملقط ، وشفرة المشرط المعقمة ، وقواطع العظام ، والمسبار الحاد ، والملعقة الصغيرة ، ومواد الخياطة غير القابلة للامتصاص. يتطلب حصاد الأعضاء والأنسجة للفحص النسيجي الحفاظ على الأنسجة في محلول تثبيتي. ما لم ينص على خلاف ذلك ، فإن المثبت الأكثر استخداما هو الفورمالين المحايد المخزن المؤقت بنسبة 10٪. لاحظ أن عينات الأنسجة يجب أن يكون سمكها 0.5-1 سم للسماح باختراق كاف للمحلول المثبت. التثبيت يمنع التسوس والتحليل الذاتي والتعفن. يوقف أي تفاعلات كيميائية حيوية مستمرة ؛ وقد تزيد من القوة الميكانيكية واستقرار الأنسجة المعالجة.

يمكن أن تؤثر طريقة القتل الرحيم للحيوان أيضا على جودة العينات. الطريقة الأكثر استخداما للقتل الرحيم للفئران والجرذان هي جرعة زائدة من غاز ثاني أكسيد الكربون. تترك في قفص منزلها ، الذي يتم وضعه ، في غرفة ، ويتم إدخال ثاني أكسيد الكربون تدريجيا إلى الغرفة بمعدل إزاحة يتراوح بين 10 و 30٪ من حجم الغرفة / دقيقة. يؤدي هذا إلى فقدان للوعي قبل إدراك الألم المرتبط بتنشيط مستقبلات الألم بواسطة حمض الكربونيك. ثم يتم الحفاظ على التدفق في الغرفة حتى يحدث توقف التنفس ويموت.

بعد القتل الرحيم ، قم أولا بإجراء فحص خارجي أولي عن طريق فحص الذبيحة بصريا بحثا عن الآفات والكتل ، أو النمو المفرط للأسنان ، أو أي تلطيخ للفراء في الفم ، والأناد ، والأذنين ، والعينين ، والفتحات الشرجية والأعضاء التناسلية. إذا لزم الأمر ، قم بإجراء اختبار الشريط وكشط الجلد وفحوصات الجلد للكشف عن الطفيليات الخارجية. بمجرد الانتهاء من الفحص الخارجي ، حان الوقت لبدء التشريح ، بدءا من تجويف البطن. لاحظ أنه قبل إزالة أي عينات من الأنسجة ، من المهم مراقبة العضو في الموقع.

لبدء استئصال الجلد ، ضع جرحا صغيرا أمام الحوض عند الإناث وفوق القلفة عند الذكور. ثم ، باستخدام تقنية التشريح الحاد ، قم بفك الجلد من اللفافة والعضلات. التشريح الحاد هو تقنية في التشريح التشريحي حيث يتم فصل الأنسجة وتعريض الهياكل الأساسية دون قطع. في هذه التقنية ، يتم استخدام المقص لنشر الأنسجة بدلا من تقطيعها. يتم دفع الأطراف المغلقة في الأنسجة ثم فتحها لتقسيم الأنسجة على طول المستويات الطبيعية. تتطلب هذه العملية الصبر واللمسة الرقيقة ، حيث يمكن أن يؤدي تمدد الأنسجة إلى تلف الأعضاء والأوعية الدموية المجاورة. ثم قم بتمديد القطع إلى الذقن. بعد ذلك ، قم بعمل شقوق عرضية أمام الأطراف الخلفية وخلف الأطراف الأمامية ، واستخدم تشريحا حادا لفضح منطقة عنق الرحم والصدر. يجب توخي الحذر الشديد لتجنب تمزق الأوعية الوداجية والسباتية في الرقبة.

في الإناث ، مع استئصال الجلد ، لاحظ الأنسجة الثديية من أعلى القص عند الغزة إلى فتحة الأعضاء التناسلية على السطح البطني ؛ تمتد بشكل جانبي على كلا الجانبين. زيادة حجم أنسجة الثدي المرضعات أو الحوامل وقد يكون الحليب. لاستئصال الغدد الثديية ، أمسك حافة الأنسجة بالملقط واستخدم تشريحا حادا لفك المرفقات بالجلد. بمجرد فصل الغدة ، يمكن وضعها في محلول مثبت للتحليل النسيجي اللاحق.

في هذه المرحلة ، يمكنك ملاحظة الغدد اللعابية تحت الفك السفلي ، والتي يتم إقرانها وتقع في الفك السفلي - تمتد على طول الرقبة إلى عظم القص. تتطلب إزالة هذه الغدد تشريحا حادا وعناية إضافية عند العمل في منطقة عنق الرحم لمنع تمزق الأوعية الدموية. بمجرد تحريرها من العضلات الأساسية ، ارفع الغدد واقطع أي مرفقات متبقية. تتطلب الغدد قطعا واحدا على الأقل للسماح باختراق المثبت.

بالإضافة إلى ذلك ، يمكنك رؤية القصبة الهوائية ، التي تمتد من لسان المزمار إلى تشعب الشعب الهوائية. إنه أنبوب غضروفي مموج ومرن. على الرغم من أن القتل الرحيم مع ثاني أكسيد الكربون واضح عادة ، إلا أنه يمكن أن يتسبب في تراكم السوائل في الرئتين والقصبة الهوائية التي تشبه السائل الصافي الرغوي. ستكون الدهون تحت الجلد موجودة أيضا في هذه المنطقة. قم بتقييمه من حيث الكمية والترسيب. قد يحتوي السمين على كمية كبيرة من الدهون مع شعور الجلد بسماكة.

قبل فتح تجويف الجسم ، راقب عضلات وأطراف الرقبة البطنية والوربية والمكشوفة بحثا عن أي سماكة أو كتل أو تغير في اللون. لفتح تجويف الجسم ، قم أولا بعمل قطع عرضي صغير في النقطة الذيلية في عضلة البطن المكشوفة. ثم ارفع العضلة بعيدا عن الأعضاء ، واقطع على طول الخط إلى الخنجري. بعد ذلك ، قم بتشريح العضلات بشكل جانبي من خط الوسط إلى فوق الأطراف الخلفية مباشرة على كلا الجانبين. أخيرا ، قم بقص منحنى الأضلاع على كلا الجانبين. بمجرد فتح تجويف الجسم ، قم بتقييم كمية وتراكم دهون البطن. سيكون للحيوان السليم ضمادات دهنية في البطن وبعض الدهون على طول السطح الظهري في التجويف. راقب لون هذا النسيج ولاحظ أي تشوهات.

الآن نحن مستعدون لبدء حصاد أعضاء البطن. ابدأ بتحديد موقع الطحال ، وهو أحمر غامق ويقع على طول الانحناء السفلي للمعدة. يجب أن يكون منتظما في الشكل وذات سطح غير لامع قليلا. لإزالة الطحال ، ارفع العضو وقص المرفقات بالمعدة.

تقع المعدة في الطرف البعيد من المريء. يبدو أنه ذو لونين ، يميز بين الأجزاء العضلية والغدية. اشعر به لوجود الطعام. يجب ملاحظة المعدة الفارغة ، لأنها يمكن أن تكون مؤشرا على المرض. لا تقطع المعدة ، لأن المحتويات سوف تلوث الأعضاء الموجودة في تجويف البطن.

ترتبط الأمعاء الدقيقة بعيدا وأدنى من المعدة. هناك ثلاثة أقسام متميزة من الأمعاء الدقيقة. الأول هو الاثني عشر - قسم أقصر من العضلة العاصرة للمعدة الخلفية إلى بداية الصائم. تدخل القناة الصفراوية هنا ويرتبط نسيج البنكرياس بقوة أكبر بهذا الجزء من الأمعاء الدقيقة. الصائم هو الجزء المركزي. يمكن ملاحظة بقع باير ، وهي مناطق بيضاوية صغيرة تتكون من أنسجة ليمفاوية ، على سطح الصائم والدقاق. الدقاق هو أطول جزء من الأمعاء الدقيقة ينتهي عند الأعور - الموجود عند تقاطع الأمعاء الدقيقة والغليظة. يبدو الأعور أخضر اللون وناعما جدا.

تستمر الأمعاء الغليظة من الأعور إلى فتحة الشرج. يمكن التعرف عليها بسهولة حيث يمكن تصور الكريات البرازية داخل تجويف هذا الهيكل. يتم تثبيت الأمعاء الدقيقة والغليظة في الجسم بواسطة المساريق ، وهو غشاء يحتوي على الأوعية الدموية والدهون والغدد الليمفاوية. يجب فحص ذلك بحثا عن تضخم الغدد الليمفاوية وأي كتل قبل إزالة الأمعاء. البنكرياس هو عضو منتشر يقع خلف المعدة. إنه لونه أسمر فاتح إلى رمادي ويتكون من عدة فصوص صغيرة ذات حواف غير منتظمة. لحصاد البنكرياس ، أمسك العضو وقم بمضايقته برفق من الأنسجة المساريقية المحيطة. يجب أن يتم ذلك قبل إزالة الأمعاء.

لإزالة المسالك بأكملها كقطعة واحدة تبدأ بالمعدة وتمتد إلى فتحة الشرج ، ضع أولا رباط عند المستقيم ثم قم بعمل قطع في الأمعاء الغليظة أمام فتحة الشرج. بعد ذلك ، ضع رباط عند تقاطع المريء والمعدة ، وبعد ذلك يمكن رفع الأمعاء بأكملها وقطع أي مرفقات غشائية. يمكن بعد ذلك فصل كل شيء عن المساريق وتقطيعه إلى أقسام وإصلاحه.

الكلى عبارة عن أعضاء مقترنة تقع على عضلات الظهر. يجب أن تكون بحجم ولون حبة الكلى الداكنة ولها سطح أملس. مباشرة أمام الكلى تظهر الغدة الكظرية على شكل عقيدات وردية فاتحة صغيرة.

لإزالة الكلى ، قم بعزلها باستخدام ملقط وقم بقصها بين العضو والحالب. يمكن بعد ذلك تقشير الطبقة الخارجية الصلبة لفحص السطح. قطع كلية واحدة إلى نصفين على طول المحور الطويل والأخرى بشكل عرضي. قد تشير أي حبيبات بداخلها إلى وجود بلورات أو رواسب معدنية. أخيرا ، قم بإزالة الكبد ، وهو أحمر غامق اللون ويجب أن تكون هوامشه ناعمة مع حافة هشة. يجب توخي الحذر عند التعامل مع الكبد ، لأنه نسيج قابل للتفتيت. أي اضطراب في سلامة العضو سيؤدي إلى تسرب الدم إلى تجويف الجسم وإخفاء الأعضاء الأخرى.

لإزالة الكبد ، قم أولا بعكس الفصوص برفق بعيدا عن الحجاب الحاجز وقم بعمل قطع في الأوعية الدموية الأمامية للهيكل. بعد ذلك ، اعكس الكبد مرة أخرى باتجاه الحجاب الحاجز وامسك العقدة الليفية التي تربط جميع الفصوص مركزيا. أخيرا ، ارفع العضو مع قطع جميع المرفقات بالأمعاء والمعدة.

يتكون الجهاز التناسلي الأنثوي من الرحم والمبايض. الرحم عبارة عن هيكل قصير على شكل حرف Y مع قرون تمتد في كلا الاتجاهين. تنتهي القرون عند قناتي فالوب والمبيضين - الموجودين أسفل الكلى مباشرة. سيكون للمبايض سطح خشن بسبب مراحل النضج المختلفة للبصيلات.

لإزالة المبايض، قم بقطع المرفقات الشريانية الأمامية وقناة فالوب للخلف. لإزالة الرحم ، أمسك عنق الرحم برفق واقطعه أدناه. بعد الجرح ، ارفع الجسم وقرون الرحم لكسر أي مرفقات في تجويف الجسم.

في الذكور ، يمكنك أيضا ملاحظة الغدد الحاملة الموجودة أمام القلفة. تبدو كبيرة ولونها رمادي إلى مصفر مع مظهر رغوي. تشبه إزالة هذه الغدد وتثبيتها الغدد تحت الفك السفلي. بالإضافة إلى ذلك ، يتكون الجهاز التناسلي الذكري من الحويصلات المنوية وغدة البروستاتا والخصيتين. الحويصلات المنوية بيضاء ، وهياكل "على شكل قرن الكبش" تقع أمام المثانة البولية ومتصلة على خط الوسط في غدة البروستاتا.

تقع

غدة البروستاتا - ذات اللون البني الفاتح بشكل عام - حول المثانة البولية في القاعدة. لتصور الخصيتين ، أمسك ضمادات دهن البطن الموجودة في أسفل البطن واسحبها إلى الأمام. سيؤدي ذلك إلى سحب الخصيتين من كيس الصفن للسماح بالفحص. يجب أن يكون السطح أملسا مع ظهور الأوعية الدموية الدقيقة على السطح.

يقع البربخ على طول الهامش السفلي للخصية ويتناقص تدريجيا نحو الأعلى. ترتبط الأسهر بنهاية البربخ وتؤدي إلى البروستاتا. لإزالة الخصيتين ، قم بقص المرفق في كيس الصفن وقطع الأسهر. لإزالة البروستاتا والحويصلات المنوية ، أمسك قاعدة المثانة البولية وارفعها أثناء قطع المرفقات الموجودة أسفل البروستاتا.

الانتقال إلى الأعضاء داخل التجويف الصدري. لفضح الهياكل الحيوية ، قم بإزالة الحجاب الحاجز من المرفق بالأضلاع. بعد ذلك ، قم بقطع القفص الصدري بشكل جانبي على كلا الجانبين حتى الجزء العلوي من عظم القص ، ثم عكس العظام في الجمجمة لتصور الأعضاء الصدرية.

عادة ما تكون الرئتان ذات لون وردي فاتح ، إسفنجي الملمس مع سطح أملس. ومع ذلك ، يمكن أن يسبب القتل الرحيم مع ثاني أكسيد الكربون نزيفا رئويا ، مما يؤدي إلى بقع حمراء داكنة يمكن أن تغطي أسطح الرئة بأكملها.

القلب أحمر غامق والبطينان عضليان ، ويشعران بالصلابة عند لمسها. الأذينين أحمر أغمق اللون ويجلسان في الجزء العلوي من البطينين. هم أقل عضلية بكثير ويبدون مترهلين. يحيط بالقلب غشاء شفاف رفيع يسمى كيس التامور.

تقع الغدة الصعترية أمام القلب وتقع فوق القصبة الهوائية. يجب أن تكون ناعمة في الملمس. يمكنك رؤية القصبة الهوائية كما هو موضح من قبل ، والمريء عبارة عن أنبوب رفيع جدا يقع مباشرة خلف القصبة الهوائية وخلف القلب ويمر عبر الحجاب الحاجز إلى المعدة.

لإزالة الأعضاء الموجودة في التجويف الصدري ، ابدأ بإمساك القصبة الهوائية فوق الغدة الصعترية مباشرة وقم بعمل قطع عمودي أمام الملقط. مع الحفاظ على الإمساك ، ارفع القصبة الهوائية لأعلى بشكل ذيلي وقص أي ملحقات للرئتين على سطح العمود الفقري في القفص الصدري. قد يحتاج المريء إلى القطع ليتمكن من رفع القلب والرئتين من تجويف الصدر

بعد إزالة القلب للجسم ، اغسله بالمحلول الملحي لإزالة الدم المتبقي والجلطات ، أو املأه بالمثبت من خلال الشريان الأورطي. بمجرد استئصال الرئتين ، ضع رباط فضفاض حول القصبة الهوائية. بعد ذلك ، قم بربط إبرة متصلة بحقنة تحتوي على مثبت في تجويف القصبة الهوائية ، وشد الرباط. ثم حقن المثبت حتى تنتفخ الرئتين. أخيرا ، قم بإزالة الإبرة وشد الرباط بشكل أكبر لمنع التسرب.

مع هذا التنفس من المعرفة فيما يتعلق بتشريح القوارض وحصاد الأنسجة ، دعونا نلقي نظرة على بعض التجارب المعملية الحالية التي تنطوي على هذه الإجراءات.

التشريح التشخيصي هو نقطة نهاية شائعة في تجارب ورم خبيث سرطاني. في هذا المثال ، قام الباحثون بحقن الخلايا السرطانية في طحال القوارض ثم ، بعد ثلاثين إلى ستين يوما ، أجروا تشريحا ، مما كشف عن نقائل كبيرة في الكبد.

غالبا ما يتبع استخراج الأنسجة تحليل نسيجي ، مما يساعد في دراسة التشريح المجهري للعينة. باتباع بروتوكول تثبيت الأنسجة وتضمينها وتقسيمها وتلوينها ، يمكن للباحثين دراسة الهياكل المجهرية في هذه الأعضاء ، والكشف عن تأثير التدخلات الجينية أو الدوائية على المستوى الذري.

في بعض الأحيان ، يقوم الباحثون بإزالة الأنسجة لدراسة العمليات الفسيولوجية ، مثل تكوين الأوعية. هنا ، قام المجربون بإخراج الأنسجة المساريقية للفئران لتحفيز نمو الأوعية الدموية. بعد ذلك ، قاموا بحصاد بعض الأقسام ، ومعالجتها بالعلامات التي تلطخ خلايا أي وعاء دموي ، لدراسة الديناميكيات الخلوية المشاركة في نمو شبكة الأوعية الدموية.

لقد شاهدت للتو فيديو JoVE الذي يوضح بالتفصيل خطوات التشريح التشخيصي وحصاد الأنسجة في المختبر. من المهم استخدام التقنيات المناسبة لإزالة الأعضاء والحفاظ عليها ، بحيث لا يكون لإجراء القلع أي تأثير على تفسير البيانات التي تم جمعها. كما هو الحال دائما ، شكرا على المشاهدة!

المصدر: كاي ستيوارت ، RVT ، RLATG ، CMAR. فاليري أ. شرودر ، RVT ، RLATG. جامعة نوتردام ، إنديانا

تعتمد العديد من التجارب على على النقاط الزمنية النهائ…