تصور تنكس مفصل الركبة بعد إصابة الرباط الصليبي الأمامي غير الغازية في الفئران

إصابة الرباط الصليبي الأمامي غير الغازية

1. ارتد معدات الحماية الشخصية المناسبة. يمكنك استخدام قناع الجهاز التنفسي ، لكنه ليس إلزاميا لهذا البروتوكول.
2. قم بتخدير الفئران باستخدام غرفة الحث مع 5٪ إيزوفلوران و 1 لتر / دقيقة من الأكسجين. الحفاظ على تدفق التخدير باستخدام مخروط الأنف مع 1 - 3٪ إيزوفلوران و 500 مل / دقيقة من الأكسجين. إذا لم يتم إعداد الجهاز على طاولة سحب أو سحب ، فتأكد من تنظيف غاز النفايات باستخدام نظام منضدية ومرشحات فحم.
3. قم بإجراء قرصة إصبع القدم لضمان الوصول إلى عمق كاف للتخدير. لاحظ أنه ليس من الضروري استخدام زيوت تشحيم العين: يتم تنفيذ البروتوكول بسرعة (< 3 دقائق) ، وهناك خطر ضئيل من جفاف القرنية.
4. ضع الطرف الخلفي الأيمن عند 30 درجة من الانثناء الظهري و 100 درجة من ثني الركبة مع توفير مساحة للخلع الأمامي للساق بالنسبة لعظم الفخذ.
5. قم بتركيب مرحلة الركبة العلوية بشكل صارم على مشغل خطي.
6. ضع الركبة المرنة على المرحلة السفلية ، والتي يتم تركيبها مباشرة فوق خلية التحميل.
7. إحداث إصابة الرباط الصليبي الأمامي باستخدام حمولة واحدة من ضغط الظنبوبي بسرعة 8 مم / ثانية.
8. يلاحظ إصابة الرباط الصليبي الأمامي من خلال إطلاق قوة الضغط. تتم مراقبة ذلك عبر برنامج مخصص.
9. بعد الإصابة ، بينما لا يزال تحت مستوى التخدير ، قم بإجراء اختبار لاكمان لتأكيد حدوث تمزق في الرباط الصليبي الأمامي سريريا. اختبار لاكمان هو اختبار سريري يستخدم لتقييم سلامة الرباط الصليبي الأمامي من خلال تقييم استقرار الخطة السهمية. أثناء تثبيت عظم الفخذ ، اسحب الساق للأمام (في اتجاه أمامي) لتقييم مقدار الحركة. سينتج الرباط الصليبي الأمامي السليم "إحساسا نهائيا ثابتا" حيث لن يتمكن الباحث من ترجمة الساق إلى الأمام. ينتج عن الرباط الصليبي الأمامي المصاب "إحساسا نهائيا ناعما أو طريا" ، مما يدل على تمزق الرباط الصليبي الأمامي.
10. ملامسة عظم الفخذ والساق للكشف عن أي تلف جسيم في العظام. إذا لم يتم تحديد موانع ، فقم بنقل إلى قفصه واتركه يتعافى. خلال هذا الوقت ، راقب للتأكد من أنه لا يظهر عليه أي علامات للألم ، مثل الإحجام عن الحركة أو النطق أو الموقف غير الطبيعي.

تصوير μCT لتنكس المفصل

يتم الحصول على صور ثنائية الأبعاد باستخدام إعدادات الماسح الضوئي 70 كيلو فولت ، 85.5 ميكرو أمبير الحالي ( الشكل 2 ب ). يتم جمع البيانات كل خطوة دوران 0.6 درجة بدقة 11.5 ميكرومتر من خلال 180 درجة كاملة. يتم إعادة بناء الصور المقطعية باستخدام خوارزمية إسقاط خلفي سلسة وعلى مجموعة من الصور المعاد بناؤها ( الشكل 2C ). ثم يتم تحليل الهيكل التربيقي عن طريق التجزئة في البرنامج ، حيث يتم توسيط كرة 1.53 مم في الصفيحة الهوائية للهضاب الظنبوبية الإنسية والجانبية وعظم الفخذ لتحديد السماكة التربيقية (ميكرومتر) والفصل التربيقي (ميكرومتر) والعدد التربيقي (1 / مم). ^5,6

1. في 4 أسابيع بعد إصابة الرباط الصليبي الأمامي ، قم بالقتل الرحيم للفأر مع التعرض المطول لثاني أكسيد الكربون ₂ في غرفة الحث.
2. قم بتمديد وتأمين الطرف الخلفي المصاب بالرباط الصليبي الأمامي في جهاز مخصص مطبوع ثلاثي الأبعاد ( الشكل 2 أ ).
3. الحصول على الصور باستخدام μCT.
4. الحصول على صور شعاعية أمامية لتحديد مساحة المفصل. تضيق (بين اللقمة الفخذية وهضبة الظنبوبة [تقاس بالمليمتر]) مقارنة بالطرف غير المصاب.
5. احصل على صور ثنائية الأبعاد باستخدام إعدادات الماسح الضوئي التالية: 70 كيلو فولت والتيار 85.5 ميكرو أمبير.
6. اجمع البيانات كل خطوة دوران 0.6 درجة بحجم بكسل 11.5 ميكرومتر من خلال 180 درجة كاملة.
7. إعادة بناء الصور المقطعية باستخدام خوارزمية إسقاط خلفي سلسة على مجموعة الصور المعاد بناؤها.
8. لضمان قياس منطقة اهتمام متسقة ، ضع كرة 1.53 مم في صفيحة المشاشية للهضاب الظنبوبية الإنسية والجانبية وعظم الفخذ لتحديد السماكة التربيقية (ميكرومتر) ، والفصل التربقي (ميكرومتر) ، والعدد التربيقي (1 / مم).

الشكل 2: أ) جهاز مطبوع مخصص لتثبيت الطرف الخلفي أثناء التصوير المقطعي المحوسب ، ب) صور ثنائية الأبعاد ، و ج) 3-D μCT.