Name: سرطان بورياليس فموي معدي تشريح الجهاز العصبي (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-03-23T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 37 s
Description: تعلم تشريح الجهاز العصبي المعدي الفموي من سرطان بورياليس لإعداد التسجيلات الكهربية الفسيولوجية. يتيح هذا البروتوكول دراسة الدوائر العصبية وتوليد أنماط الحركة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

نحن نعترف بامتنان أعضاء مختبر ماردر. نشكر مستشار لدينا ، والدكتور حواء ماردر ، للحصول على الدعم والتشجيع لها. وأيد هذا البحث من قبل المعهد الوطني للاضطرابات العصبية والسكتة الدماغية المنح NS - 17813 - 058110 وNS.

1. تشريح الإجمالي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان السلطعون على الجليد لمدة 30 دقيقة للنظم مملة الحسية والحركية للحيوان. تحيط بها من جميع الجوانب مع الثلج. يجب ارتداء القفازات عند التعامل مع السلطعون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحضير للتشريح الإجمالي وذلك بطرح عموم التشريح والأدوات التي سوف تستخدمها. Rongeurs ، لا بد من قطع العظام المقص ، مقص صغير ، ملقط مسنن ، ملعقة مع حافة مدبب ، وهو طبق Sylgard السوداء المغلفة ، ودبابيس الحشرات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة السرطان من دلو الثلج بواسطة الساق الخلفيتين لمنعها من معسر وضعه في مقلاة تشريح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة مخالب أول من التواء كل واحد إلى الداخل. ثم إزالة كل الساق باستخدام حركة التواء نفسه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام rongeurs ، إزالة لفك تغطية الفم. أيضا إزالة maxillule الناعمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام rongeurs مرة أخرى ، تبدأ من نهاية الخلفي الجانبي للدرع والحصول على قبضة جيدة على حافة منه. تضييق الخناق مع rongeurs وكسر قطعة من درع قبالة. تأكد من إزالة ما يكفي من درع للسماح بدخول ملعقة الافتتاح. تواصل إزالة حافة درع يصل الى العينين وكرر على الجانب الآخر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع الجانب مدبب من البسط ، كشط بلطف الأنسجة اللينة الداخلية بعيدا عن سطح درع الظهرية. تبقي الملعقة في اتصال مع درع لتجنب إتلاف STNS. استخدام rongeurs لكسر بعيدا عن أجزاء من درع التي تم فصلها عن الأنسجة. منفصلة أيضا بعض الأنسجة اللينة من درع بطني مع التأكد من فصل أي العضلات المقربة إرفاق الأنسجة لدرع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الانفصال درع الظهرية والخلفي بقدر القلب حيث هناك نوعان من عظيمات صغيرة جاحظ من درع. خفض بقدر الأمامي ممكن. استقرار سيفالون (&quot;الوجه&quot;) مع إصبع واحد في حين أن الابتعاد أكثر أجزاء الأمامي للدرع الظهرية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على الجانب البطني للدرع ، سحب mandibles في وقت واحد خلال ترسيخ rongeurs الصعود إلى الفك السفلي ، التواء منهم إلى الخارج لإزاحة الفك السفلي من الخليقاء المرفقة ، وجرها بعيدا. يجب أن يرفق اثنين العظيمات الطويلة مع عضلات الفك السفلي للاستخراج في حال القيام به بشكل صحيح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> منفصلة بعيدا عن الأنسجة من الجانبين من سيفالون قرب العينين باستخدام الملعقة. مع مقص تشريح الصغيرة ، وقطع النسيج عبر أقرب إلى التلال من ossicle وطبقة بعد طبقة ممكنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بقية السلطعون ضد جدار من المقلاة ودعم تشريح أنه حتى في تأمين مكان (يمكن أن تستخدم لهذا مخالب). قطع الشفا (&quot;الشفة العليا&quot;) بعيدا عن الخليقاء التأكد من عدم ترك أي نسيج المرفقة. قطع العظم باستخدام مقص جعل اثنين من التخفيضات قطري في درع البطني لإزالة سيفالون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتخاذ شفا مع ملقط مسنن وقطع الشفة (&quot;الشفة السفلى&quot;) بعيدا عن ossicle على الجانب البطني. ثم رفع الشفة بلطف بعيدا عن درع وبطني المتبقية. استخدام مقص صغير لفصل جزء من المعدة بطني من الأنسجة المبطنة للدرع. عندما الأمبولات البواب مرئية ، وقطع المعدة بعيدا عن الأنسجة على جانبي حتى يتم استخراج المعدة من السرطانات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ما زالت تحتجز المعدة بواسطة ملقط مع الشفة ، وبقية المعدة ضد كف اليد وسكب المياه المالحة إلى الفم. هذا توسع المعدة ويسهل قطع مفتوحة. قطع من فتح في الفم باستمرار بين الحق من خلال بوابة المعدة ossicle بين الأمبولات. ثم قص أسفل قطريا من خلال فرعين فؤادي. قطع نصائح للأسنان ثلاثة داخل المعدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان الصعود إلى المعدة ، سوداء كبيرة طبق Sylgard المغلفة ، وداخل المعدة إلى أسفل. دبوس أسفل الزوايا الخمسة للتحضير مع دبابيس الحشرات وملء الطبق مع المالحة الباردة ، وتخبط في إعداد بأكمله (انظر الشكل 1). </li></ol> 2. غرامة تشريح <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وهناك حاجة ، الصغرى ، تشريح أدوات تشريح الغرامة. على وجه الخصوص ، وهناك حاجة إلى مقص وملقط فصل الربيع وكذلك حامل إبرة دبوس مع التنغستن. وينبغي أيضا واضحة ، Sylgard المغلفة ، طبق بتري وبعض المسامير الأسلاك غرامة قد أعدت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبدأ في أدنى التكبير ، تبدأ تعلق اللوحات بالقرب من أسفل الشفة التي كان يتم فتح الفم. ترتيب بقية الدبابيس لجعل إعداد مشدود ودبوس أي مجال من المجالات الأخرى الضرورية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رفع بعناية رصدت اللحمة التي تغطي الجزء السفلي من إعداد وتقليم ذلك عبر ترك بقعة من اللحمة مع اثنين من بقع بيضاء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قشر تصل الصفراء ، والأنسجة ، ناعم الغشائي بالقرب من الجزء السفلي من التحضير. وترد في mvns ضعيف على الجانب السفلي من هذا النسيج. منفصلة بعناية mvns من النسيج الأصفر كما هو جذبه. اتبع النسيج الأصفر وخفض ما يصل الى جانب المخ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> متابعة عمليات كثيفة تخرج من الدماغ التي تمتد laterallي. هذه هي الأعصاب commisural. حالما يتم التوصل في نهاية العصب صواري ، إزالة كتلة الأنسجة الاسفنجية من البيض ، أنه قد تم قطع بعيدا من الجانب من الدماغ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حيث أيونات وأبناء تلبية التروس ، وقطع المسافة في العضلات والأنسجة للكشف عن طول الأيونات والأبناء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عودة الى التصحيح وقطع اللحمة رصدت تشغيله. هذا يجب أن يترك فتحة في الشرايين المحيطة STG. قطع طريق فتح فصل العضلات اللذين يحيطان STG. رفع نهايات هذه العضلات وقطع الحق تحتها للفصل بينهما من الشريان وفضح alns وأغنيس. فصل العضلات المحيطة بقدر ما يصل الغضروف الكذب على STN. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع النسيج الشرايين المحيطة وصولا الى STG DGN للmvns ، حيث ، ويلتقي DVN. العمل باستمرار على DVN lvns وقطع طريق الأنسجة ، وبيضاء تغطي lvns الحساسة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد موقع PSN خلال ossicle بالقرب من الجزء السفلي من التحضير. يمكن أن تستخدم لتحديد PSN lvn ومفرق dlvn. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتبع dlvn المقبل وصولا الى تحديد موقع PYN وPDN. وغالبا ما PYN يلتف حول أمبولة البواب الى فتح. وPDN الشوك الخروج من dlvn وبين أمبولة البواب وصمام البواب عضلات القلب. ترك بعض العضلات المرفقة واحدة من هذه الأعصاب لأنه لا يمكن الخلط بسهولة عندما يتم نقل لإعداد طبق Sylgard واضحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بمجرد أن يتم كشف كل من الأعصاب ، وقطع أية اتصالات المتبقية بين STNS الأعصاب والأنسجة وغير المرغوب فيها من المعدة. التحرك بعناية STNS بعيدا عن باقي المعدة ، وقطع أية اتصالات تفويتها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حالة الطبق Sylgard واضحة مع كتلة من الأنسجة المتبقية في المعدة عن طريق فرك ما يزيد على سطح Sylgard Sylgard حتى لا يشعر بأنه لزجة جدا أو جافة. Sylgard هو مسعور وSTNS ستلتزم بشدة لأنه إذا لم يتم تكييف الطبق Sylgard المغلفة بهذه الطريقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة بعض المالحة الباردة إلى الطبق. الاستيلاء على نهايات الأعصاب العلوي من صواري مع ملقط وتقديم STNS إلى صحن Sylgard واضحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دبوس يسقط على STNS Sylgard. قطع الدماغ من الأعصاب صواري واستخدام الدبابيس minuten لتأمين تنتهي أربعة من التروس اولا القضاء. تأكد من أن يتم إعداد الجانب الأيمن من قبل التحقق من أن يتم الإشارة إيفان يصل بعيدا عن Sylgard. ينبغي للخروج DGN قليلا تحت STG عندما STG هو الجانب الأيمن الأعلى. دبوس بقية العصب تغلق منخفضة مع المسامير الأسلاك الدقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نظيفة من أي العضلات أو الأنسجة المتبقية من STNS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Desheath في STG باستخدام دبوس وحامل ، ودفع غرامة معقوف قليلا الإبرة التنغستن. جعل ثقب صغير في زاوية من غمد STG بعيدا عن أجسام الخلايا واستخدام ذلك للحصول على ثقب بين طبقات الغلاف. قطع بعناية رفرف من غمد فصل لفضح neuropil STG والهيئات الخلية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دبوس أي من اللوحات غمد وصولا الى زيادة إمكانية الوصول إلى الأجهزة المحمولة ولتحقيق الاستقرار في STG للتسجيلات داخل الخلايا. إعادة دبوس بقية STNS ضمان أن كل العصب مشدود ومتباعدة بشكل جيد لتسجيل خارج الخلية (انظر الشكل 3). </li></ol> 3. النتائج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من الناحية المثالية ، ينبغي لجميع الأعصاب تكون خالية من النكات والضرر ، وخصوصا تلك التي سيتم تسجيلها من. وينبغي أن أيا من تشابك الأعصاب أو الملتوية. يجب أن تكون سليمة STG مع كل من خلايا مرتبة في تشكيل حية حول neuropil. وSTNS سليمة غير متناظرة على الصعيدين الثنائي ويشبه أنيسيان مع lvns والساقين ، وmvns مثل الأسلحة ونهاية الأمامي كرئيس. </li></ol> الاختصارات : <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> STNS </td><td> الجهاز العصبي فموي معدي </td></tr><tr><td> STG </td><td> فموي معدي العقدة </td></tr><tr><td> COG </td><td> صواري العقدة </td></tr><tr><td> OG </td><td> العقدة المريء </td></tr><tr><td> mvn </td><td> العصب الناصف البطين </td></tr><tr><td> أيون </td><td> المريء السفلي العصب </td></tr><tr><td> نجل </td><td> المريء العصب متفوقة </td></tr><tr><td> AGN </td><td> المعدة العصبية الأمامية </td></tr><tr><td> ن. </td><td> العصب الأمامي الجانبي </td></tr><tr><td> DGN </td><td> المعدة العصبية الظهرية </td></tr><tr><td> DVN </td><td> العصب الظهري البطين </td></tr><tr><td> lvn </td><td> البطين الوحشي العصب </td></tr><tr><td> PSN </td><td> الخلفية المعدة العصبية </td></tr><tr><td> PYN </td><td> البواب العصب </td></tr><tr><td> PDN </td><td> البواب موسع العصب </td></tr><tr><td> dlvn </td><td> الظهرية فرع من العصب البطين الجانبي </td></tr><tr><td> إيفان </td><td> العصب السفلي البطين </td></tr></tbody></table><img src="/files/ftp_upload/1207/figure_1_90ppi.jpg" alt= &quot;الشكل 1&quot; /&gt; الشكل 1 : رسم بياني يوضح الموضع التقريبي للSTNS في المعدة قبل تشريح. <img src="/files/ftp_upload/1207/figure_2_90ppi.jpg" alt="الشكل 2" /> الشكل 2 : مخطط للعضلات مختلفة في الجزء السفلي من المعدة وتراكب للSTNS في ضوء أخضر. يتم سرد كل نوع من الخلايا في العضلات مع STG من المعروف أنها يعصب. هذه الخريطة هي مفيدة عند التخطيط لتشريح الأعصاب التي تحمل إشارة من خلية معينة (مجاملة من المختبر نديم). <img src="/files/ftp_upload/old/1207_2009_1_12_5/figure_3.jpg" alt="الشكل 3" /> الشكل 3 : رسم تخطيطي للSTNS مع أقطاب كهربائية داخل وخارج الخلية الآبار (من ماردر وبوشر ، 2007).

<ol><li>Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHarris-Warrick%2C+RM+%22Dynamic+Biological+Networks%3A+The+stomatogastric+nervous+system%22">Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system</a>. , MIT Press. Boston. (1992).</li>
<li>Marder, E., Bucher, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+circuit+dynamics+using+the+stomatogastric+nervous+system+of+lobsters+and+crabs%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs.</a> Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).</li>
<li>Maynard, D. M., Dando, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+of+the+stomatogastric+neuromuscular+system+in+Callinectes+sapidus%2C+Homarus+Americanus+and+Panulirus+argus+%28Decapoda+crustacean%29%5BTitle%5D)+AND+%22Philos.+Trans.+R.+Soc.+Lond.+B+Biol.+Sci%22%5BJournal%5D)">The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean).</a> Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268 (892), 161-220 (1974).</li>
<li>Selverston, A. I., Russell, D. F., Miller, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Stomatogastric+Nervous+System%3A+Structure+and+function+of+a+small+neural+network%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">The Stomatogastric Nervous System: Structure and function of a small neural network.</a> Prog. Neurobiology. 7, 215-290 (1976).</li>
</ol>

تشريح STNS هو الخطوة الأولى في إجراء عملية الكهربية أو التجربة المناعية ، أو للحصول على خلايا للثقافة الخلية. بغض النظر عن التجربة المقصود ، فإن تشريح الإجمالي دون تغيير. ومع ذلك ، قد يختلف تشريح غرامة. من المهم أن تخطط للمستقبل من الوقت الذي خلايا الأعصاب ، والتي سوف سجل من. معظم الخلايا العصبية في STG والعمليات التي يعصب العضلات واحد على الأقل في المعدة (انظر الشكل 2) ، وتصنف وفقا لاهدافها معصب. لذا ، هناك حاجة للتحقق من خارج الخلية التسجيلات كاملا هوية الخلية التي يتم تسجيلها i...

<table><tbody><tr><td>Black Sylgard 170</td><td>أخرى</td><td>Dow Corning</td><td>170</td><td>التشريح الكلي</td></tr><tr><td>مقصات دقيقة</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>14090-09</td><td></td></tr><tr><td>دبابيس حشرات مقاس 6</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>26000-65</td><td></td></tr><tr><td>مقصات مايو</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>14110-17</td><td></td></tr><tr><td>ملعقة دقيقة (Micro-Spatula)</td><td>جراحة</td><td>WARD&amp;rsquo;s Natural Science</td><td>15 V 4313</td><td></td></tr><tr><td>كماشة قضم العظام (Rongeurs)</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>16000-14</td><td></td></tr><tr><td>ملاقط أنسجة</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>11021-12</td><td></td></tr><tr><td>سلك تنجستن دقيق (قطر 0.001 in.)</td><td>جراحة</td><td>California Fine Wire Company</td><td></td><td>التشريح الدقيق</td></tr><tr><td>ملقط رقم 5</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>91150-20</td><td></td></tr><tr><td>دبابيس دقيقة (Minuten Pins)</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>26002-10</td><td></td></tr><tr><td>مقصات موريا الزنبركية (شفرات 7mm)</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>15370-52</td><td></td></tr><tr><td>أطباق بتري (100x15mm)</td><td>أخرى</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-757-12</td><td></td></tr><tr><td>حامل دبابيس</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>26018-17</td><td></td></tr><tr><td>ملاقط فائقة الدقة رقم 5SF</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>Sylgard 182</td><td>أخرى</td><td>Dow Corning</td><td>182</td><td></td></tr><tr><td>إبر تنجستن</td><td>جراحة</td><td>Fine Science Tools</td><td>10130-05</td><td></td></tr><tr><td>مجهر تشريح</td><td>مجهر</td><td>Wild</td><td>MC3</td><td>متنوعات</td></tr><tr><td>سرطان يوناه (&lt;em&gt;C. borealis&lt;/em&gt;)</td><td>حيوان</td><td>Commercial Lobster</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

سرطان بورياليس فموي معدي تشريح الجهاز العصبي

Cancer Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection

العقدة فموي معدي (STG) هو نموذج ممتاز لدراسة التفاعلات الخلوية وشبكة لأنه يحتوي على عدد قليل نسبيا من الخلايا (ما يقرب من 25 في الشفق جيم) والتي تتميز بشكل جيد. الخلايا في STG المعرض مجموعة واسعة من المخرجات ومسؤولة عن تصرفات السيارات المعدة. المعدة المعدة يحتوي على طاحونة الطعام الذي ينهار مع ثلاثة أسنان الداخلية ، وبوابة المعدة التي بتصفية الطعام قبل أن تصل إلى المعي المتوسط. وتنتج نتيجتين STG الايقاعي للسيطرة على مصنع للبواب المعدة والمعروفة باسم مولدات نمط المركزية (CPGs). يمكن لكل خلية في STG المشاركة في أحد أو كل من هذه الإيقاعات. هذه CPGs تسمح لدراسة تعديل العمليات العصبية ، التوازن ، وتقلب الخلوية وشبكة ، وتطوير الشبكة ، واستعادة الشبكة. يتم تشريح الجهاز العصبي فموي معدي (STNS) من جونا السلطعون (سرطان الشفق) في جزأين ، وتشريح الجسيمة والغرامة. في تشريح الإجمالي يتم تشريح المعدة بالكامل من السرطانات. أثناء تشريح الغرامة يتم استخراج STNS من المعدة باستخدام مجهر التشريح والتشريح الدقيقة الأدوات (انظر الشكل 1). ويتضمن STNS STG ، والعقدة المريء (خطأ في مرماه) ، والعقد صواري (ترس) وكذلك الأعصاب التي يعصب عضلات المعدة. هنا ، وتبين لنا كيفية إجراء تشريح كامل للSTNS استعدادا لتجربة الكهربية حيث ستسجل الخلايا في STG من intracellularly والأعصاب الطرفية وستستخدم للتسجيلات خارج الخلية. ويظهر هذا الأسلوب السليم من أجل العثور على الأعصاب المطلوب فضلا عن تقنية لدينا desheathing العقدة للكشف عن وsomata neuropil.

فموي معدي النظام العصبي (STNS) من السلطعون جونا (<em&gt; C. الشفق</em&gt;) يمكن استخدامها لالكهربية والمناعية ، ودراسات ثقافة الخلية. ويتم استخراج STNS في جزأين : تشريح الجسيمة والغرامة.

تعد العقدة المعدية الفموية (STG) نموذجاً ممتازاً لدراسة التفاعلات الخلوية والشبكية لأنها تحتوي على عدد صغير نسبياً من...

تبدأ هذه العملية بتشريح عياني لمعدة السرطان، حيث يتم إزالة الزوائد والرسغ الظهري من السرطان. يتم تشريح المعدة بالكامل وفصلها عن الحيوان، ثم تُفتح المعدة وتُثبت بالدبابيس بشكل مسطح على طبق "سارد" أسود.تجهيزاً للتشريح الدقيق، يتم تشريح الجهاز العصبي المعدي لـ Steamatic من المعدة ونقله إلى طبق بتري مطلي بـ Sard شفاف حيث يتم إزالة الغلاف تحضيراً لتجربة الفيزيولوجيا الكهربائية. مرحباً، اسمي راشيل أو من مختبر Martyr في جامعة برانديس. وأنا غابرييل غوتيريز، أيضاً من مختبر Martyr.سنعرض لكم اليوم إجراءً لتشريح الجهاز العصبي المعدي الجسدي من سرطان البحر *Cancer borealis*. نحن نستخدم الجهاز العصبي المعدي في السرطان في مختبرنا لإجراء تجارب الفيزيولوجيا الكهربائية، والكيمياء النسيجية المناعية، وزراعة الخلايا. وباستخدام هذه الشبكة العصبية، يمكننا استقصاء عدة مبادئ أساسية في البيولوجيا العصبية، مثل التوازن في التعديل العصبي، وتباين الشبكة، وتطور الشبكة، وتعافي الشبكة.فلنبدأ الآن. قبل البدء في عملية التشريح، يجب تخدير السرطان عن طريق دفنه في الثلج لمدة 30 دقيقة. تأكد من إحاطته بالثلج من جميع الجوانب.يؤدي الثلج إلى تخدير الأجهزة الحسية والحركية لدى السرطان، ولكن قد يظل السرطان مستجيباً عند إزالته أثناء تبريده. استعد للتشريح العياني من خلال تجميع المعدات المطلوبة لهذا الجزء من البروتوكول: وعاء التشريح، وملاقط Ron، ومقص قطع العظام، ومقصات صغيرة، وملقط أسنان، وملعقة ذات حافة مستدقة، وطبق مغطى بطبقة سوداء واقية من السيليكون، ودبابيس حشرات قبل البدء.استعد من خلال ارتداء القفازات. بعد مرور 30 دقيقة، أخرج السرطان من دلو الثلج من ساقه الخلفية. ولتجنب التعرض للقرص، قم بإزالة المخالب عن طريق تدوير كل منها نحو الداخل، ثم ضعه في وعاء التشريح.بعد ذلك، قم بإزالة كل ساق باستخدام نفس حركة التدوير. والآن بعد أن أصبح الحيوان بدون أطراف، استخدم مقص Ron Jos لإزالة الفك العلوي الذي يغطي الفم والفك العلوي الرخو. باستخدام مقص Ron Jos مرة أخرى، ابدأ من الطرف الخلفي الجانبي للرسغ (carpus) وأمسك حافته بإحكام. اضغط باستخدام مقص Ron Jos واكسر تلك القطعة من الرسغ.تأكد من إزالة جزء كافٍ من الرسغ للسماح للملعقة المسطحة بالدخول إلى الفتحة. استمر في إزالة حافة الرسغ وصولاً إلى العينين وكرر العملية على الجانب الآخر. وباستخدام الجانب المستدق من الملعقة المسطحة، قم بكشط الأنسجة الداخلية الرخوة برفق بعيداً عن سقف الرسغ الظهري.أثناء القيام بذلك، حافظ على تلامس الملعقة مع الـ carus. ولتجنب إتلاف الـ STNS، استخدم الـ Ron Jos لإزالة أجزاء الـ carus التي انفصلت عن النسيج. قم بإزالة الـ dorsal carus وصولاً إلى النقطة التي يبرز فيها اثنان من الـ S الصغيرين من الـ carus.قم بالقص في أقصى نقطة أمامية ممكنة. قم بتثبيت الرأس (cephalon) بإصبع واحد أثناء فصل الأجزاء الأكثر أمامية من الكاروس الظهري (dorsal carus). افصل جزءاً من الأنسجة الرخوة عن الكاروس البطني (ventral carus).تأكد من فصل أي عضلات مقربة تربط النسيج بالـ carus على الجانب البطني من الـ carus. اسحب الفكوك العلوية واحدة تلو الأخرى عن طريق تثبيت الفكوك الخاطئة على الفك العلوي والتدوير للخارج والسحب بعيداً، حيث يجب أن تكون عضلتان طويلتان مرتبطة بالفك العلوي المستخرج. إذا تم ذلك بشكل صحيح، افصل النسيج عن جوانب الـ cephalon بالقرب من العينين.باستخدام الملعقة المخبرية ومقصات تشريح صغيرة، قم بقص الأنسجة طبقة تلو الأخرى بشكل عرضي بجوار حافة العظيمات مباشرةً. ثبّت ما تبقى من السرطان بمسند مقابل وعاء التشريح. وباستخدام الملاقط المنفصلة، قم بفصل الشفة العلوية بالكامل عن الجزء العلوي من الرأس.باستخدام مقصات قص العظم الصغيرة، قم بإجراء قطعين قطريين في الرسغ البطني. لإزالة الرأس، أمسك الآن بالشفة باستخدام ملقط مسنّ واقطع الشفة بعيداً عن الفتحات في الجانب البطني. ارفع الشفة برفق بعيداً عن ما تبقى من الرسغ البطني.استخدم مقصاً صغيراً لفصل الجزء البطني من المعدة عن الأنسجة المبطنة للدرع. وعندما تصبح القناة المسامية مرئية، اقطع المعدة بعيداً عن الأنسجة على كلا الجانبين حتى يتم استخراج المعدة من السرطان، مع تثبيت المعدة من الشفة باستخدام ملقط. ضع المعدة على راحة يدك واسكب المحلول الملحي في الفم.سيؤدي ذلك إلى تمدد المعدة وجعل عملية فتحها باستخدام المقص الصغير أكثر سهولة. قم بالقص من فتحة الفم نزولاً بين ula مروراً عبر العائق. ثم قص بشكل قطري نزولاً عبر فرعي cardio.أخيرًا، اقطع رؤوس الأسنان الثلاثة الموجودة داخل المعدة. ضع المعدة على طبق مطلي بالبارافين الأسود بحيث يكون الجزء الداخلي للمعدة لأسفل للتحضير للتشريح الدقيق. ثبّت الزوايا الخمس للمعدة باستخدام دبابيس الحشرات واغمر التحضير في محلول ملحي بارد.يتم إجراء التشريح الدقيق تحت المجهر الستيريوسكوبي، ويتطلب استخدام ملاقط ومقصات زنبركية، بالإضافة إلى حامل دبابيس مزود بإبرة تنغستن. يجب تحضير طبق بيتري شفاف مغطى بواقٍ حواف وبعض الدبابيس السلكية الدقيقة مسبقاً؛ وبالبدء بأدنى قوة تكبير، يتم تثبيت السدائل القريبة من الشفة التي كانت تمثل فتحة الفم باستخدام الدبابيس. بعد ذلك، اجعل العينة مشدودة عن طريق إعادة ترتيب الدبابيس وإضافة المزيد منها حسب الحاجة.باستخدام الملقط، ارفع بحذر طبقة الجلد الخفي المنقطة التي تغطي الجزء السفلي من العينة وقم بتقليمها عرضياً، بحيث يتبقى جزء من الجلد الخفي يحتوي على نقطتين بيضاويتين. الآن، قم بتقشير النسيج الغشائي الأصفر الرقيق الموجود بالقرب من أسفل العينة. تكون الـ M vns مرتبطة بشكل ضعيف بالجانب السفلي من هذا النسيج.باستخدام شفرة المقص، افصل بعناية العصب المبهم الحنجري (M VNS) عن الأنسجة الصفراء أثناء سحبه للأعلى. استأصل الأنسجة الصفراء المجاورة للزوائد البيضاء السميكة القليلة المرئية في الدماغ. معظم أجزاء الدماغ تكون مدفونة حالياً في الأنسجة.تتبع العمليات التي تمتد جانبياً وباتجاه الشفة. هذه هي العصبان التوصيليان. بمجرد العثور على نهاية العصب التوصيلي، قم بإزالة النسيج الإسفنجي الضخم مائل البياض الذي تم قطعه من جانب الدماغ.حدد موقع العصب تحت المريئي (ios) والعصب تحت المريئي (sos) عند نقطة التقائهما بالعقد commissural. قم بقص العضلات والأنسجة للكشف عن طول العصب تحت المريئي (IO ns) والعصب تحت المريئي (so ns)، حيث يسير هذان العصبان إنسياً من العقد commissural ليلتقيا بالعصب المريئي. عد إلى رقعة الجلد تحتية المنشأ المنقط وقم بقصها.سيترك هذا فتحة في الشريان المحيط بـ STG. قم بالقطع عبر هذه الفتحة لفصل العضلتين اللتين تحيطان بـ STG. ارفع نهايتي هاتين العضلتين واقطع تحتهما لفصلهما عن الشريان. تكشف هذه الخطوة عن ALNs.قم بإزالة العضلات المجاورة للأعلى حتى خط الغضروف الموجود فوق STN. العصب TN هو عصب يمتد للأعلى من STG ويتميز ببروز طفيف. بعد ذلك، استأصل الأنسجة الشريانية المحيطة بـ STG نزولاً إلى نقطة التقاء M vns DGN و DVN.تتبع العصب الظهري (DVN) حيث ينقسم إلى العصبين الظهريين الجانبيين (LVNs). قم بالقص عبر النسيج الرقيق المائل للبياض حتى يتم الكشف عن كل عصب ظهري جانبي (LVN) بالكامل ويلتقي بالعصب الظهري الجانبي العميق (DLVN). حدد موقع العصب المريئي (PSN) فوق العضلة المريئية (Osco).بالقرب من الجزء السفلي من التحضير، يمكن استخدام PSN لتحديد موقع الوصلة بين LVN و DLVN. لذا، يتجه DV DLV بهذا المسار. إنه ينزل إلى هنا. نعم.ثم ينقسم ويتجه بهذا المسار. صحيح. لذا فإن ما أفعله عادةً هو البحث عنها هنا في الأسفل ثم أتتبع مسارها صعوداً. يتفرع العصب PDN من العصب DLVN ويقع بين الـ ULA وعضلات الصمام القلبية Pylori. نعم. هنا توجد ampule ula، و ula ampule، والعصب PYN هنا تماماً.تأكد من ترك جزء من العضلات متصلاً بأحد هذه الأعصاب ليكون بمثابة علامة لتمييزها عن بعضها البعض. وبمجرد الكشف عن جميع الأعصاب، اقطع أي اتصالات متبقية بين العصب المبهم الجذعي (STNS) والمعدة. وأخيراً، قم بإبعاد الـ STNS بعناية عن بقية المعدة.قطع أي اتصالات فائتة. قم بتجهيز طبق الحماية S الشفاف عن طريق مسح بعض أنسجة المعدة فوقه حتى يصبح مبللاً وأقل لزوجة. سوف تلتصق STNS بقوة بـ sogar.إذا لم يتم تهيئة الطبق بهذه الطريقة، فأضف بعض المحلول الملحي البارد الطازج إلى الطبق. أمسك النهايات العلوية للأعصاب التوصيلية باستخدام الملقط وانقل الـ st NS إلى طبق sogar الشفاف. سيبقى الدماغ متصلاً بالأعصاب التوصيلية لمنع التشابك.الآن، قم بتحضير العصب ثلاثي التوأم (STNS) للتثبيت عن طريق فصل الدماغ عن أعصاب المفصل (Commis nerves). استخدم دبابيس مينيوشين (minuchin pins) لتثبيت النهايات الأربع لأعصاب المفصل في واقي العتبة (sill guard). تأكد من أن التحضير في الوضع الصحيح من خلال التحقق من أن العصب الوربي الرابع (IVN) يتجه للأعلى وأن العصب القنوي العميق (DGN) يخرج أسفل دبوس العقدة ثلاثية التوأم (STG pin) قليلاً.يتم إنهاء بقية العصب باستخدام دبابيس سلكية دقيقة وباستخدام ملاقط ومقصات دقيقة. قم بإزالة أي عضلات أو أنسجة متبقية بعناية من STNS. يجب الآن إزالة غمد STG باستخدام حامل دبابيس وإبرة تنغستن دقيقة معقوفة قليلاً.اصنع ثقباً صغيراً في زاوية غمد الـ STG بعيداً عن أجسام الخلايا. أدخل إبرة التنجستن برفق في الثقب حتى تستقر بين الغمد والسامارا. قم بقص أو تمزيق جزء من الغمد المنفصل برفق للكشف عن الحبة العصبية للـ STG وأجسام الخلايا.قم بتثبيت أي سدائل من الغمد لزيادة إمكانية الوصول إلى أجسام الخلايا ولتثبيت العقدة الصدغية العليا (STG) من أجل التسجيلات داخل الخلوية. قم بشد بقية الأعصاب الحسية الصدغية (STNS) مع التأكد من أن كل عصب مشدود ومتباعد بشكل جيد للتسجيل خارج الخلوي. ومن المثالي أن تكون جميع الأعصاب خالية من التضيق أو التلف، خاصة تلك التي ستقوم بالتسجيل منها.يجب ألا تكون أي من الأعصاب متشابكة أو ملتوية. يجب أن تكون العقدة تحت المريئية (STG) سليمة مع ترتيب جميع خلاياها في تشكيل يشبه اللحية حول منقار العصب تحت المريئي (NI bill). كانت الشبكة العصبية المريئية (TNS) متماثلة في كلا الجانبين وتبدو مثل "هومونكولوس" (قزم بشري)، حيث تمثل الأعصاب الحشوية الجانبية (LVNs) الساقين.تمثل M vns الأذرع، ويمثل الطرف الأمامي الرأس. لقد عرضنا لكم للتو كيفية تشريح الجهاز العصبي المعدي الجسدي لسرطان البحر تحضيراً لتجربة الفسيولوجيا الكهربائية. عند إجراء هذا الإجراء، من المهم تذكر تشريح الأعصاب التي تخطط للتسجيل منها عن طريق تتبع الأعصاب المطلوبة وصولاً إلى العضلات التي يُعرف أنها تعصبها.تأكد من تثبيت الـ STNS بإحكام على طبق السيجار الشفاف، بحيث يكون الجانب المنزوع الغلاف من الـ STG متجهًا للأعلى. هذا كل شيء. شكرًا للمشاهدة، وبالتوفيق في تجاربكم.

cancer-borealis-stomatogastric-nervous-system-dissection

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

وصفنا تشريح غرامة الجهاز العصبي فموي معدي من المعدة من جراد البحر الأميركية...

Homarus Americanus فموي معدي تشريح الجهاز العصبي

وصفنا تشريح الإجمالي المعدة للجراد الأمريكي...

إجمالي تشريح المعدة من جراد البحر ، Homarus Americanus</em

التعاون بين الجين الورمي تفعيلها مثل RAS V12 والطفرات في جينات الخلية القطبية مثل خربش، يؤدي إلى نمو الأورام في ذبابة الفاكهة حيث عرض الخلايا السرطانية أيضا السلوكيات الغازية. هنا يتم تقديم بروتوكول بسيط للتحريض والمراقبة من الأورام الحميدة والغازية.

بروتوكول لالتعريفي الجيني والتخيل من أورام حميدة والغازية في رأسي مجامع<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

Lampreys تستعيد الحركة بعد إصابة كاملة في الحبل الشوكي. ومع ذلك ، فإن بعض الخلايا العصبية المسقطة في العمود الفقري هي مجددات جيدة والبعض الآخر ليس كذلك. توضح هذه الورقة تقنيات إيواء يرقات لامبري البحر (والبالغين الذين تم تحويلهم مؤخرا) ، وإنتاج قطع كاملة للحبل الشوكي وإعداد أدمغة كاملة وأحبال شوكية للتهجين في الموقع.

إصابة الحبل الشوكي الكامل وبروتوكول تشريح الدماغ لاحقا Wholemount<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين في اليرقات البحر الجلكى

هنا نصف تشريح الحبل العصبي البطني لجراد البحر. نعرض أيضا تقنية الفيزيولوجيا الكهربية لتسجيل الحركة الخيالية من الخلايا العصبية الحركية للسباحين.

نظام Swimmeret من جراد البحر: دليل عملي للتشريح من الحبل العصب وخارج الخلية تسجيلات من نمط للسيارات

توضح مقالة الفيديو هذه استخدام العقد الجذرية الظهرية (DRG) / نموذج الخلية السرطانية في سرطان البنكرياس الغدي الأقنية.

في المختبر نمذجة السرطانية العصبية الغزو: وظهري الجذر العقدة نموذج

الغزو حول العصب (PNI) هو سمة شائعة لسرطان الخلايا الحرشفية في الرأس والرقبة (HNSCC) ، مما يمنح معدلات بقاء أقل. آلياته غير مفهومة جيدا. باستخدام الخلايا العصبية المتولدة من العقد الجذرية الظهرية للفئران المحصورة في مصفوفة شبه صلبة ، يمكن التحقيق في المسارات المتضمنة في PNI لخطوط خلايا HNSCC.

نموذج للمحيط بالعصب الغزو في الرأس والرقبة قشري سرطان الخلايا

هنا نقدم بروتوكول للآفات الجراحية طفيفة التوغل من العضلات المتأصلة في جهاز تغذية الرخويات البحرية Aplysia كاليفورنيكا لفهم أدوار هذه العضلات أثناء سلوك التغذية.

تقنية آفة طفيفة التوغل للعضلات المتأصلة في Odontophore من كاليفورنيكا Aplysia

يقدم هذا البروتوكول طريقة لتصوير النشاط السكاني للخلايا العصبية بدقة خلية واحدة في الأنواع غير اللافقارية غير المعدلة وراثيا باستخدام الأصباغ الحساسة لجهد الامتصاص ومجموعة الصمام الثنائي الضوئي. ويتيح هذا النهج سير عمل سريع، حيث يمكن متابعة التصوير والتحليل على مدار يوم واحد.

التصوير البصري المستند إلى الصمامات الثنائية الضوئية لتسجيل ديناميكيات الشبكة بدقة أحادية الخلايا العصبية في اللافقاريات غير المعدلة وراثيا

يصف البروتوكول الحالي نموذجا للفأر لاستئصال التعصيب الأدرينالي من خلال تحديد واستئصال العقدة العنقية العلوية.

تقنية جراحية لاستئصال العقدة العنقية الفائقة في نموذج الفئران

تعلم تشريح الجهاز العصبي المعدي الفموي من سرطان بورياليس لإعداد التسجيلات الكهربية الفسيولوجية. يتيح هذا البروتوكول دراسة الدوائر العصبية وتوليد أنماط الحركة.

سرطان بورياليس فموي معدي تشريح الجهاز العصبي

استكشف المزيد من الفيديوهات