Name: تشريح الدماغ البشري غير الرئيسيات في الفضاء التجسيمي (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-07-16T20:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: تعلم تقنية تشريح دماغ الرئيسيات غير البشرية في الفضاء التجسيدي لدراسة التنظيم التشريحي للدماغ. تساعد هذه الطريقة الباحثين على فهم وظائف الدماغ في التطور الطبيعي والاضطرابات المرضية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

فإن الكتاب أود أن أشكر Ikiel Ptito لدعمه الفني المستمر. NSERC منحة لعضوية البرلمان.

الجزء 1 : قبل معالجة الأنسجة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وينبغي أن الأنسجة perfused جيدا مع بارافورمالدهيد ، غلوتارالدهيد ، أو الفورمالين. ويمكن تحقيق ذلك من خلال نضح transcardial القياسية المستخدمة عادة لحصاد الأجهزة الأخرى. في هذه الدراسة كان مخدرا بعمق هذا الموضوع مع هيدروكلوريد الكيتامين (10 ملغم / كغم ، IM) ، الموت الرحيم مع جرعة زائدة من (الرابع 25 ملغ / كلغ ،) والصوديوم بنتوباربيتال perfused transcardially مع PBS حتى 0،1 م ويتبع exsanguinated.This تماما بواسطة حلا بارافورمالدهيد 4 ٪ في برنامج تلفزيوني لمدة 5 دقائق (~ 1 ليتر). </li></ol> الجزء 2 : حظر التجسيمي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل أن يضع رأسه في الإطار التجسيمي إحداثيات صفر الطائرة Horsley-Clarke/interaural يتعين اتخاذها. هذا هو نقطة الوسط بين النظرية والأذنين. لقياس هذه الطائرة ، وأشرطة الأذن الحاجة إلى تركيبها على قدم المساواة في الجهاز ، ثم ضع شفرة المشرط في الذراع تتلاعب التجسيمي وقياس نقطة الوسط بين القضبان الأذن. وهذا أمر مهم لتحديد مكان كتلة النسيج على أساس الاحتياجات البحثية. بمجرد الانتهاء من هذه الجمجمة يحتاج إلى أن تكون مستعدة لتثبيت الجهاز في التجسيمي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من أجل وضع الرأس في الإطار التجسيمي والفك السفلي يجب أن تكون إزالة مع rongeurs العظام ومشرط. بالإضافة إلى ذلك ينبغي أن تتم إزالة الجلد والعضلات والنسيج الضام ، من أجل كشف الجمجمة. حالما يتم إزالة النسيج الضام من الجمجمة ، وتعريض الدماغ عن طريق التقطيع بعيدا calvaria (الجزء جدولي العظم القذالي الجداري ، وكذلك في العظام الأمامية الإعلانية). في الجزء التجربة الحالية لديه كل استعداد calvaria أزيلت. يجب الحرص على عدم إزالة العظام الزمنية ، لأن قنوات الأذن سوف تحتاج إلى أن تكون سليمة لوضع الرأس في الإطار التجسيمي. يجب إزالة هذه المسألة الجافية المتبقية من الدماغ عرضة للخطر. الجمجمة هو الآن على استعداد لوضعها في الإطار التجسيمي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بنفس الطريقة التي يمكن للمرء أن إجراء جراحة التجسيمي ، وضبط العين والحنك والأذن مثل هذه الحانات التي يتم إصلاحها بشكل آمن الرأس في جهاز التجسيمي. ضع التجسيمي تتلاعب في إحداثيات محددة سلفا الأمامي / الخلفي (A / P) ونقل إلى الجانب تتلاعب الوحشي للدماغ. انخفاض ببطء النصل في الدماغ ، ورفع النصل تماما من الدماغ ، ثم ينتقل بشكل إعلامي وانخفاض النصل مرة أخرى. كرر هاتين الخطوتين حتى نصل وصل الجانب الوحشي من نصف الكرة المعاكس. هذا يكمل اللبنة الأولى الاكليلية. للكتل الإكليلية اللاحقة نقل 1cm تتلاعب في المحور A / P ، وكرر حتى تم حجب الدماغ كله. </li></ol> الجزء 3 : إزالة الدماغ من الجمجمة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الرأس من الإطار التجسيمي والاستمرار في الدماغ يتعرض في كف يدك. محاولة لتأمين الدماغ عن طريق وضع تدليل طفيفة في الدماغ في راحة يدك ومكانك الاصبع الخنصر في الفص الجبهي ، وهذا يقلل من حركة الدماغ في الجمجمة. من أجل منع جفاف سطح حنوني من الدماغ ، ضع قطعة من الشاش المبلل في برنامج تلفزيوني عبر الدماغ. عقد رئيس بحزم إلى جانب جمجمة وعظام رقاقة بعيدا المتبقية القذالي الصدغي وجنبا إلى جنب مع العمود الفقري. هذا الكشف عن الجوانب الأساسية والجانبية من الدماغ. أخيرا إزالة أي العظام المتبقية والعظم الجبهي الأنفي ، مما سيتيح الوصول إلى بصيلات الشم. ومن المهم لإزالة العظم الجبهي الماضي بسبب ما قمت بإزالة قاعدة الجمجمة والدماغ يتحرك قليلا ويمكن أن تصبح تلف الفص الجبهي على حواف خشنة من العظام fontal. قطع وإزالة ما تبقى المسألة الجافية. رفع بعناية الجزء الأمامي من الدماغ ، وانزلاق تحت مشرط الدماغ وخالية من الدماغ في الجمجمة. </li></ol> الجزء 4 : قياسات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هناك عدد من القياسات المفيدة التي يمكن إجراؤها قبل التجميد. على سبيل المثال ، محور P / من الدماغ مع الفرجار. وعلاوة على ذلك يمكن أن تقاس كثافة محددة من الدماغ وزنها ، وقياس حجم عن تشريد الماء في الاسطوانة ثم تقسيم الوزن عن طريق حجم النزوح (الجدول 1). </li></ol> الجزء 5 : إنهاء حجب الدماغ. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عادة عندما يتم إدراج شفرة المشرط في الدماغ ليست طويلة بما يكفي لاختراق تماما الكامل الظهري البطني مدى الدماغ. بمجرد إزالة المخ ويتم الحصول على قياسات الإجمالي ، واتخاذ تشريح الأنسجة النصل وإنهاء حظر الدماغ من خلال إلى الجانب البطني من الدماغ (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل تجميد الكتل ، فمن الضروري cryoprotect النسيج في حلول السكروز متدرج PBS - مخزنة (10 ، 20 ، و 30 ٪) في المحافظة 4 ˚ C حتى البواليع الدماغ. يستغرق عادة ما بين عشية وضحاها في الحضانة 10 ٪ ، 2-3 أيام في 20 ٪ و 3-5 أيام إضافية في 30 ٪ للبنات لتنزل الى قاع الإناء. تغيير يومي الخامسويوصى ه حل السكروز 30 ٪. </li></ol> الجزء 6 : النتائج الممثل هناك عدد من القياسات المورفولوجية الجسيمة التي يمكن إجراؤها مرة واحدة تمت إزالة الدماغ من الجمجمة. وتشمل هذه بطول / P ، والوزن ، والكثافة المحددة (الجدول 1). نحن كتلة عموما في الدماغ 6-7 قياس كتل 1cm (الشكل 1). وصورت كل قطعة ثم (الشكل 2) ، ويمكن كذلك اعتمادا على تشريح الاحتياجات البحثية أو المعدة للتجميد في حلول السكروز متدرج. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> موضوع </td><td> طول / P (ملم) </td><td> الوزن (جرام) </td><td> المياه بالتشرد (مل) </td><td> الكثافة المحددة (ز / مل) </td></tr><tr><td> O2303 - 2 - 1 - 1 </td><td> 64.3 </td><td> 28.1 </td><td> 24 </td><td> 1،171 </td></tr><tr><td> O5180 - 1 </td><td> 71.3 </td><td> 38.7 </td><td> 34 </td><td> 1،138 </td></tr><tr><td> O2708 - 3 - 1 </td><td> 62.8 </td><td> 28.7 </td><td> 26 </td><td> 1،104 </td></tr><tr><td> O9184 - 4 - 2 </td><td> 65.3 </td><td> 29.5 </td><td> 24 </td><td> 1،229 </td></tr><tr><td> N459 - 1 - 14-2 </td><td> 68.2 </td><td> 31.6 </td><td> 26 </td><td> 1،215 </td></tr><tr><td> AVERAGE </td><td> 66.38 </td><td> 31.32 </td><td> 26.8 </td><td> 1،171 </td></tr><tr><td> STD DEV </td><td> 3.38 </td><td> 4.33 </td><td> 4.17 </td><td> 0،052 </td></tr></tbody></table> الجدول 1. القياسات المورفولوجية الإجمالي في نصف الكرة الأرضية حق Vervets شهر 5 قديم <img src="/files/ftp_upload/1259/1259fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> <img src="/files/ftp_upload/1259/1259fig2.jpg" alt="الشكل 1.5" /> الشكل 1. الخطط للطائرات تستخدم لحجب الاكليلية الدماغ ، وهذا مثال على الدماغ الكبار الفرفت تخريجها. مثال على هذا الإجراء حظر. متباعدة خطوط عمودية هنا في 1cm ، وتنتج عادة من 7 كتل الإكليلية كل نصف الكرة الغربي. <img src="/files/ftp_upload/1259/1259fig3.jpg" alt="الشكل 2" /> الشكل 2. كتل من نسيج المخ في الفضاء التجسيمي. سوف تسفر كل كتلة ما يقرب من 200 المقاطع التي اتخذت في 50μm. مع هذا البرنامج سوف تؤخذ عينات أكثر من 1200 من خلال المقاطع القشرة و400-500 إضافية من المخيخ عند شرائح في الطائرة الاكليلية.

<ol><li>Gallagher, M., Rapp, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+animal+models+to+study+the+effects+of+aging+on+cognition.+Annu+Rev+Psychol+48%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The use of animal models to study the effects of aging on cognition. Annu Rev Psychol 48.</a> , 339-370 (1997).</li>
<li>Clancy, B., Darlington, R., Finlay, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translating+developmental+time+across+mammalian+species%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Translating developmental time across mammalian species.</a> Neuroscience. 105, 7-17 (2001).</li>
<li>Nowakowski, R. S., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+site+of+origin+and+route+and+rate+of+migration+of+neurons+to+the+hippocampal+region+of+the+rhesus+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">The site of origin and route and rate of migration of neurons to the hippocampal region of the rhesus monkey.</a> J Comp Neurol. 196, 129-154 (1981).</li>
<li>Rakic, P., Bourgeois, J. P., Eckenhoff, M. F., Zecevic, N., Goldman-Rakic, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concurrent+overproduction+of+synapses+in+diverse+regions+of+the+primate+cerebral+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Concurrent overproduction of synapses in diverse regions of the primate cerebral cortex.</a> Science. 232, 232-235 (1986).</li>
<li>Granger, B., Tekaia, F., Le Sourd, A. M., Rakic, P., Bourgeois, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tempo+of+neurogenesis+and+synaptogenesis+in+the+primate+cingulate+mesocortex%3A+comparison+with+the+neocortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Tempo of neurogenesis and synaptogenesis in the primate cingulate mesocortex: comparison with the neocortex.</a> J Comp Neurol. 360, 363-376 (1995).</li>
<li>Zecevic, N., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+layer+I+neurons+in+the+primate+cerebral+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Development of layer I neurons in the primate cerebral cortex.</a> J Neurosci. 21, 5607-5619 (2001).</li>
<li>Ervin, F. R., Palmour, R. M., Young, S. N., Guzman-Flores, C., Juarez, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+consumption+of+beverage+alcohol+by+vervet+monkeys%3A+population+screening%2C+descriptive+behavior+and+biochemical+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Voluntary consumption of beverage alcohol by vervet monkeys: population screening, descriptive behavior and biochemical measures.</a> Pharmacol Biochem Behav. 36, 367-373 (1990).</li>
<li>Palmour, R. M., Mulligan, J., Howbert, J. J., Ervin, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+monkeys+and+men%3A+vervets+and+the+genetics+of+human-like+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">Of monkeys and men: vervets and the genetics of human-like behaviors.</a> Am J Hum Genet. 61, 481-488 (1997).</li>
<li>Boire, D., Théoret, H., Ptito, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereological+evaluation+of+neurons+and+glia+in+the+monkey+dorsal+lateral+geniculate+nucleus+following+an+early+cerebral+hemispherectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Stereological evaluation of neurons and glia in the monkey dorsal lateral geniculate nucleus following an early cerebral hemispherectomy.</a> Exp Brain Res. 142, 208-220 (2002).</li>
<li>Bjugstad, K. B., Teng, Y. D., Redmond, D. E. J. r, Elsworth, J. D., Roth, R. H., Cornelius, S. K., Snyder, E. Y., Sladek, J. R. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+neural+stem+cells+migrate+along+the+nigrostriatal+pathway+in+a+primate+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Human neural stem cells migrate along the nigrostriatal pathway in a primate model of Parkinson's disease.</a> Exp Neurol. 211, 362-369 (2008).</li>
<li>Lemere, C. A., Beierschmitt, A., Iglesias, M., Spooner, E. T., Bloom, J. K., Leverone, J. F., Zheng, J. B., Seabrook, T. J., Louard, D., Li, D., Selkoe, D. J., Palmour, R. M., Ervin, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alzheimer%27s+disease+abeta+vaccine+reduces+central+nervous+system+abeta+levels+in+a+non-human+primate%2C+the+Caribbean+vervet%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Alzheimer's disease abeta vaccine reduces central nervous system abeta levels in a non-human primate, the Caribbean vervet.</a> Am J Pathol. 165, 283-297 (2004).</li>
<li>Mash, D. C., Staley, J. K., Doepel, F. M., Young, S. N., Ervin, F. R., Palmour, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+dopamine+transporter+densities+in+alcohol-preferring+vervet+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Altered dopamine transporter densities in alcohol-preferring vervet monkeys.</a> Neuroreport. 7, 457-462 (1996).</li>
<li>Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+reduction+in+frontal+cortex+of+primates+after+prenatal+alcohol+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure.</a> Neuroreport. 20, 13-17 (2009).</li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.

سانت كيتس والفرفت (Chlorocebus aethiops sabeus) هو الرئيسيات العالم القديم مع أنماط مماثلة ، ومعدلات نمو الدماغ القشرية وتحت القشرية إلى أن من البشر. وقد استخدم هذا النوع لنموذج معقدة اضطرابات سلوكية مثل السلوك البشري القلق ، ارتفاع ضغط الدم 8 ، 9 استئصال نصف الكرة ومرض باركنسون 10 ، Alzhemier المرض في 11 ، وتعاطي الكحول 12. في الآونة الأخيرة ، وقد استخدمت هذه الأنواع لدراسة آثار التعرض تشريحي عصبي طبيعي من الايثانول ...

<table><tbody><tr><td>مشرط</td><td>Fine Science Tools</td><td>10003-12</td><td></td></tr><tr><td>شفرات مشرط</td><td>Fine Science Tools</td><td>10011-00</td><td></td></tr><tr><td>مقصات</td><td>Fine Science Tools</td><td>14090-11</td><td>أي مقصات جراحية تعتبر كافية</td></tr><tr><td>كماشات قضم العظام</td><td>Fine Science Tools</td><td>16121-14</td><td></td></tr><tr><td>ملقط</td><td>Fine Science Tools</td><td>11027-12</td><td></td></tr><tr><td>ورق ترشيح</td><td>Fisher Scientific</td><td>09-924-150</td><td></td></tr><tr><td>إطار التوجيه المجسم</td><td>Kopf Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>شفرة تقطيع الأنسجة</td><td>Thomas Scientific</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

تشريح الدماغ البشري غير الرئيسيات في الفضاء التجسيمي

Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space

استخدام الرئيسيات غير البشرية ، نموذجا متعدية لفهمنا لعمليات النمو والشيخوخة في البشر<sup&gt; 1-6</sup&gt;. بالإضافة إلى ذلك ، قد أتاحت استخدام الرئيسيات غير البشرية مؤخرا الفرصة لنموذج طبيعي اضطرابات نفسية معقدة ، مثل تعاطي الكحول<sup&gt; 7</sup&gt;. نحن هنا وصف تقنية لحجب الدماغ في الطائرة الاكليلية من قرد الفرفت (<em&gt; Chlorocebus aethiops sabeus</em&gt;) في الجمجمة سليمة في الفضاء التجسيمي. وصف الأسلوب يوفر هنا طائرة مستوى القسم بين الكتل والموضوعات والفروع الجزئية يقلل بين الكتل. Sectioning كتلة من الأنسجة في الطائرة الاكليلية يسهل أيضا ترسيم مساحة الفائدة. هذا الأسلوب يوفر كتل التحكم بحجم نصف الكرة الأرضية منذ واحد من قرد الفرفت الغلة أكثر من 1200 المقاطع عند تشريح في 50μm. وعلاوة على ذلك عن طريق منع الدماغ إلى كتل 1cm ، تسهل تغلغل السكروز لcyroprotection ويسمح شرائح كتلة على ناظم البرد العادية.

الرئيسيات غير البشرية هي الأنواع الهامة متعدية لفهمنا لمعالجة العادي من الدماغ. يمكن للمنظمة التشريحية للدماغ الرئيسيات توفير معلومات هامة في الظروف العادية والمرضية لدى البشر.

يوفر استخدام الرئيسيات غير البشرية نموذجاً انتقالياً ممتازاً لفهمنا لعمليات النمو والشيخوخة لدى البشر 1-6. في ...

تبدأ هذه العملية برأس قرد يتم ترويته جيداً. بعد إزالة القحف، يوضع الرأس في الإطار التجسيمي، وتُجرى سلسلة من المقاطع التاجية التجسيمية باستخدام الذراع الموجهة، ثم يُزال الدماغ ويُقاس ويُحفظ بالتبريد. مرحباً، أنا الدكتور مارك بيرك من مختبر العلوم العصبية البصرية في كلية البصريات بجامعة مونتريال.أنا الدكتورة شاهين زور، من مختبر العلوم العصبية البصرية في كلية البصريات بجامعة مونتريال. وأنا الدكتور مو بيتو، مدير مختبر العلوم العصبية البصرية في كلية البصريات بجامعة مونتريال. سنعرض لكم اليوم إجراءً لتثبيت دماغ الرئيسيات غير البشرية في الفضاء التجسيمي.نستخدم هذا الإجراء في مختبرنا لدراسة جوانب مختلفة من تنظيم الدماغ في النمو الطبيعي واستجابةً للتداخلات النمائية. لذا، لنبدأ الآن. يبدأ هذا البروتوكول بعد عملية القتل الرحيم والتثبيت وفصل الرأس لقرد الفيرفيت.قبل إزالة الدماغ، يجب تحضير الإطار التجسيمي (stereotaxic frame). أولاً، يجب تحديد إحداثيات المستوى الصفري البيني للأذنين وفقاً لنظام "هورسلي كلارك" (Horsley Clark Interoral plane zero)، أو نقطة المنتصف النظرية بين الأذنين. ولقياس هذا المستوى، يتم تركيب قضبان الأذن في الجهاز بشكل متساوٍ.بعد ذلك، ضع شفرة المشرط في ذراع المناول الخاص بالجهاز التجسيمي وقس نقطة المنتصف بين قضبان الأذن. بعد ذلك، قم بتجهيز الرأس لإدخاله في الإطار التجسيمي. استخدم مبرد العظام والمشرط لإزالة الفك السفلي.في هذه المرحلة، قم بإزالة أي أجزاء متبقية من القحف تدريجياً خلال هذه الخطوات. كن حذراً كي لا تزيح العظام الصدغية، حيث ستحتاج إلى بقاء القنوات السمعية سليمة لتثبيت الرأس في الإطار التجسيمي. وباستخدام الملقط والمقص، قم بقص المادة الجافية المرئية بعناية من الدماغ المكشوف.الآن أصبحت الجمجمة جاهزة للوضع في جهاز التوجيه المجسم (stereotaxic manipulator). لبدء عملية التثبيت المجسم للدماغ، ضع الرأس داخل الإطار، ثم اضبط مسند العين وقضبان الأذن كما تفعل في الجراحات المجسمة. ضع جهاز التوجيه المجسم في المحور الأمامي أو الخلفي أو المحور AP المحدد مسبقاً.لبدء عملية حصار الدماغ، قم بوضع الملاعب (manipulator) في أقصى الجانب الأيسر أو الأيمن من الدماغ، ثم اخفض الشفرة لإجراء القطع الأول. ستكون الشفرة عمودية على الخط الناصف للدماغ، حيث يتم القطع في المستوى الإكليلي (coronal plane).ارفع الشفرة لتخليصها تماماً من سطح الدماغ. ثم تحرك إنسياً بحيث تتداخل قليلاً مع القطع الأول ثم اخفض الشفرة. كرر هذه العملية من خلال إجراء قطوع متداخلة حتى تصل إلى الحافة المقابلة من الدماغ.بهذا تكتمل الكتلة الإكليلية الأولى. حرك الملاعب سنتيمتر واحد للأمام أو للخلف على طول المحور AP وقم بإجراء سلسلة أخرى من القطوع في المستوى الإكليلِي بالتوازي مع القطوع السابقة. استمر بهذه الطريقة حتى يتم تقسيم الدماغ بالكامل إلى كتل.بعد الانتهاء من عملية القطع، حان الوقت لإخراج الدماغ من الجمجمة. أولاً، أخرج الرأس من الإطار. حاول تثبيت الدماغ من خلال احتضانه بلطف في راحة يدك لمنعه من الاهتزاز داخل الجمجمة وتجنب تعرضه للتلف.ضع إصبع الخنصر فوق الفصوص الجبهية لمنع جفاف سطح القشرة في الدماغ. بلل قطعة من الشاش بمحلول PBS وضعها فوق الدماغ. أمسك الرأس بإحكام من الجمجمة وقم بإزالة ما تبقى من العظام القذالية والصدغية بالإضافة إلى العمود الفقري.يؤدي ذلك إلى كشف الجوانب القاعدية والجانبية للدماغ. الآن، قم بإزالة ما تبقى من الجافية. وأخيراً، قم بإزالة العظم الأنفي وأي جزء متبقٍ من العظم الجبهي، مما يسمح بالوصول إلى البصيلات الشمية.من المهم إزالة العظم الجبهي في النهاية، لأنه عند إزالة قاعدة الجمجمة، يتحرك الدماغ قليلاً، وقد تؤدي الحواف المسننة للعظم الجبهي إلى إتلاف الفصوص الجبهية.قم بإزالة أي بقايا من الأم الجافية، وارفع الجزء الأمامي من الدماغ بعناية، ثم مرر المشرط تحت الدماغ لتحريره من الجمجمة. سيبقى الدماغ متماسكاً كبصلة مقطوعة من الساق لأن شفرة القطع لا تصل إلى الجانب البطني بالكامل. هناك عدد من القياسات المفيدة التي يمكنك إجراؤها قبل تجميد الدماغ.أولاً، يمكن استخدام القدمة ذات الورنية لقياس المحور الأمامي الخلفي (AP axis) للدماغ. بعد ذلك، يتم وزن الدماغ لإيجاد كثافته النوعية. ثم يتم قياس الحجم عن طريق إزاحة الماء في أسطوانة مدرجة.الآن لديك الكثافة، وهي الكتلة مقسومة على الحجم. بعد أن انتهيت من إجراء القياسات على الدماغ بالكامل، حان الوقت لتحرير كتل الأنسجة الفردية من مكان اتصالها بالجانب البطني للدماغ، وتجهيزها للتجميد. استخدم شفرة تقطيع الأنسجة وقم بتمديد كل قطع عبر الجانب البطني للدماغ لتحرير الكتل.يمكن استخدام الفرجار لقياس الأبعاد الخارجية (AEs) الإنسية والوحشية والأمامية الخلفية. أصبحت كتل الدماغ الآن جاهزة للحماية بالتجميد ثم تجميدها. لقد عرضنا لكم للتو كيفية تقسيم دماغ رئيسيات غير بشرية إلى كتل في الفضاء التجسيمي.عند تنفيذ هذا الإجراء، من المهم سحب الشفرة بالكامل قبل إجراء أي حركة إنسية جانبية باستخدام المنسق المجسم. كما يجب توخي الحذر عند إزالة العظام من الدماغ لتجنب إتلاف القشرة بواسطة ERs. هذا كل شيء.شكرًا للمشاهدة، مع تمنياتنا لكم بالتوفيق في تجاربكم.

dissecting-the-non-human-primate-brain-in-stereotaxic-space

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

الدماغ المصرفي وأخذ العينات من المواد البيولوجية المنهجي يوفر الأساس لالتجسيم غير منحازة ويزيد من إمكانية الحصول على بيانات من كل عينة.

الخدمات المصرفية للدماغ : جعل معظم العينات بحوث الخاص

يمكن للمنظمة التشريحية للدماغ الرئيسيات توفير معلومات هامة في الظروف العادية والمرضية لدى البشر. التجسيم هو أسلوب غير متحيز لبدقة وكفاءة تقدير عدد الخلايا العصبية الكلي (أو غيرها من نوع من الخلايا) في الفضاء مرجعية...

معرفة ما يهم : التجسيم غير متحيز في الدماغ البشري غير الرئيسيات

جدران البطين الجانبي تحتوي على أكبر منطقة جرثومي في دماغ الثدييات الكبار. تقليديا ، وقد اعتمدت الدراسات على تكوين الخلايا العصبية في هذه المنطقة على التقنيات الكلاسيكية للتحليل النسيجي sectioning. هنا نقدم نهجا بديلا ، والتقنية wholemount ، الذي يوفر شاملة ، ان وجه نظرا لهذه المنطقة جرثومي.

المنطقة Subventricular اون الوجه : يلطخ Wholemount والتدفق البطانة العصبية

هذه الورقة توضح الاستخدام الفعال لأسلوب تشريح الألياف للكشف عن مساحات سطحية الأبيض المسألة وهياكل تلين الدماغ البشري، في الفضاء ثلاثي الأبعاد، للمساعدة على الفهم الطالب مورفولوجيا البطين.

استكشاف الفضاء السحيق-كشف تشريح لهياكل تلين للكشف عن البطينات الجانبية للدماغ البشري

توضح هذه المقالة منهجية مفصلة الحصول على مقاطع عرضية مسطح من الثدييات كورتيسيس ووضع تصور للوحدات القشرية باستخدام histochemical وأساليب المناعي.

التصور للوحدات القشرية في الأرض كورتيسيس الثدييات

تهدف الطريقة المبينة أدناه إلى توفير بروتوكول شامل لإعداد جراحة الأعصاب غير البشرية (NHP) باستخدام مزيج جديد من طرق الطباعة ثلاثية الأبعاد (3D) واستخراج بيانات التصوير بالرنين المغناطيسي.

صندوق أدوات قائم على التصوير بالرنين المغناطيسي للتخطيط لجرّة الأعصاب في الرئيسيات غير البشرية

نحن نقدم بروتوكولا عمليا وسريعا خطوة بخطوة لإزالة دماغ الفأر وتشريح المناطق المنفصلة من أنسجة المخ الطازجة. أصبح الحصول على مناطق الدماغ للتحليل الجزيئي أمرا روتينيا في العديد من مختبرات علم الأعصاب. يتم تجميد مناطق الدماغ هذه على الفور للحصول على بيانات نسخ عالية الجودة لتحليل مستوى النظام.

التشريح المجهري لدماغ الفأر إلى مناطق مختلفة وظيفيا وتشريحيا

توضح هذه الورقة العمليات الآلية لتخطيط جراحة الأعصاب غير البشرية للرئيسيات بناء على التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI). تستخدم هذه التقنيات خطوات إجرائية في منصات البرمجة والتصميم لدعم تصميم الزرع المخصص ل NHPs. يمكن بعد ذلك تأكيد صحة كل مكون باستخدام نماذج تشريحية ثلاثية الأبعاد (3D) مطبوعة بالحجم الطبيعي.

صندوق أدوات تصميم الغرسة العصبية للرئيسيات غير البشرية

التصوير المقطعي التسلسلي ثنائي الفوتون (STPT) هو تقنية لتصوير كتلة من الأنسجة في شكلها ثلاثي الأبعاد من خلال الجمع بين التصوير ثنائي الفوتون والتحكم التلقائي في المرحلة والتقطيع الدقيق. نصف هنا بروتوكولا لتنفيذه لأدمغة لفهم ميزاتها الهيكلية بشكل أفضل.

التصوير المقطعي التسلسلي ثنائي الفوتون لدماغ القرمزية بالكامل للتحليلات التشريحية العصبية

وحيدة الخلية electroporation (SCE) هي تقنية متخصصة تسمح تسليم الحمض النووي أو غيرها من الجزيئات في الخلايا الفردية داخل الأنسجة سليمة ، بما في ذلك الأعمال التحضيرية الجسم الحي. نحن هنا من التفصيل الداخلي لSCE صبغة الفلورسنت أو DNA البلازميد في الخلايا العصبية في الدماغ سليمة من الشرغوف القيطم المورق.

وحيد الخلية في الجسم الحي Electroporation داخل الدماغ سليمة النامية

تعلم تقنية تشريح دماغ الرئيسيات غير البشرية في الفضاء التجسيدي لدراسة التنظيم التشريحي للدماغ. تساعد هذه الطريقة الباحثين على فهم وظائف الدماغ في التطور الطبيعي والاضطرابات المرضية.

تشريح الدماغ البشري غير الرئيسيات في الفضاء التجسيمي

استكشف المزيد من الفيديوهات