قياس ضغط الدم في الفئران باستخدام تسجيل حجم الضغط ، وهو أسلوب الذيل الكفة

كلمة coda تعني "الذيل" باللغة الإيطالية. يتيح نظام Coda لقياس ضغط الدم غير الجراحي قياس ضغط الدم في القوارض، وذلك بفضل مستشعر تسجيل ضغط الحجم المتخصص الذي يقيس التغيرات في حجم دم الذيل عند وضعه فوق ذيل الحيوان. يوضح هذا الفيديو كيفية إعداد النظام، وتحضير الحيوانات، والحصول على قياسات ضغط الدم لثمانية حيوانات في وقت واحد.

مرحباً، أنا أنجو بالا كريشنان، أعمل في مختبر آلان دوغرتي بمركز أبحاث القلب والأوعية الدموية في جامعة كنتاكي بليكسينغتون. سنعرض لكم اليوم إجراءً لكيفية قياس ضغط الدم في الفئران باستخدام طريقة تسجيل الضغط الحجمي عبر سوار الذيل. نحن نستخدم هذا الإجراء في مختبرنا لدراسة جهاز القلب والأوعية الدموية.

لنبدأ الآن. لإعداد نظام CODA، اختر منطقة في المختبر تكون فيها درجة حرارة الغرفة مستقرة عند 20 درجة مئوية أو أعلى. تجنب المواقع القريبة من فتحات تكييف الهواء، حيث أن تعريض الحيوانات للضوضاء العالية أو الروائح قد يؤدي إلى تهيجها أو إجهادها.

يمكن أن تشمل روائح الحيوانات أي عطر قوي قد تضعه. قم بتشغيل وحدة تحكم Coda ثم منصات التدفئة المضبوطة على المستوى الثالث. إذا كانت درجة حرارة الغرفة أعلى من 25 °C، ابدأ بالمستويين الأول أو الثاني.

قم بإجراء اختبار تشخيصات وحدة التحكم أولاً، ثم افتح برنامج Coda. حدد جهاز Coda من خلال النقر عليه، ثم انقر على اختبار الجهاز المحدد.

حدد الأربطة والقنوات المراد اختبارها وانقر على اختبار. بعد اكتمال اختبار تشخيصات وحدة التحكم، أغلق نافذة اختبار الجهاز. اختر رمز وحدة التحكم المراد استخدامها، ثم انقر.

استخدم هذه الأجهزة لإعداد البرنامج. اختر أدوات إدارة الموظفين. بعد ذلك، انقر على الباحث الأول.

لتغيير الاسم، انقر فوق الصفوف اللاحقة لإضافة باحثين إضافيين. ثم انقر فوق حفظ البيانات. انقر فوق علامة تبويب الفنيين لتعديل الفنيين أو إضافتهم.

بعد ذلك، انقر فوق علامة تبويب العينات لتسمية الحيوانات لسهولة التعرف عليها واختيار نوع الحيوان. ثم انقر فوق حفظ البيانات. وأخيرًا، انقر فوق علامة تبويب الحيوانات.

لتغيير نوع الحيوان والحساسية، انقر فوق حفظ البيانات، ثم إغلاق. لبدء تجربة جديدة، اختر ملف ثم تجربة جديدة. أدخل اسم التجربة، وحدد الباحث الرئيسي وتاريخ البدء.

انقر على التالي. الخطوة التالية هي إدخال معلومات الجلسة الأساسية. ابدأ بإدخال اسم الجلسة، ثم اضبط دورات التأقلم على خمسة؛ وإذا كنت تفضل عدم تضمين دورات التأقلم، فقم بضبطها على صفر.

اضبط عدد المجموعات على مجموعة واحدة، والمدة الفاصلة بين المجموعات على 30 ثانية في حال وجود مجموعات متعددة. واضبط عدد الدورات لكل مجموعة على 20 دورة، والمدة الفاصلة بين الدورات على خمس ثوانٍ. ثم انقر فوق "التالي".

لبدء عملية اختيار العينة، اختر العينة من مجموعة العينات وخصصها لأول قناة متاحة. ثم انقر على "التالي" لضبط معاملات الجلسة. اضبط الحد الأقصى لضغط الانسداد على 250 millimeters.

اضبط وقت تفريغ الزئبق إلى 20 ثانية. وبالنسبة للفئران، اجعل الحد الأدنى للحجم 15 µL ونمط العرض قناة واحدة لكل رسم بياني. يمكنك أيضًا إضافة باحثين وفنيين إضافيين.

بعد ذلك، انقر على التالي. راجع نص الجلسة وانقر على التالي. لا تختر إنهاء حتى تكمل قسم تحضير الحيوان، والذي سيتم وصفه فيما يلي.

والآن يمكنك استعادة الحيوانات ووضعها بجانب نظام CODA لقياس ضغط الدم. قبل وضع الحيوانات في الحوامل، لاحظ حجم كل حيوان بالنسبة لحجم الحامل المختار؛ إذ يجب أن يكون الحيوان قادرًا على الدخول إلى الحامل بحرية.

ضع كل حيوان في الحامل عن طريق إمساكه من الذيل ووضعه برفق في الجزء الخلفي من الحامل، والذي يواجه الطرف المفتوح لمخروط الأنف. ثبّت الغطاء الخلفي بعناية في الحامل عن طريق تدوير المسمار الموجود على الغطاء الخلفي. احذر من قرص الذيل أو أي أجزاء أخرى من الجسم أثناء تثبيت الغطاء الخلفي.

الشريحة التالية. توجيه مخروط الأنف نحو الفتحة الخلفية، وذلك للحد من حركة الحيوان.

يجب وضع المخروط الأنفي في وضعية تمنع الحيوان من الدوران. وأثناء وجود الحيوان داخل الحامل، ضع الحامل على منصة التسخين. وفي الوضع المحدد، اترك الحيوان لمدة خمس دقائق على الأقل للتأقلم مع الحامل.

لا تلمس الحيوان أو تتعامل معه. فأثناء وجود الحيوان داخل الحامل، قد يؤدي زيادة التلامس إلى تهيجه، لذا لا تترك الحيوان في الحامل دون مراقبة أبداً. لوضع سوار سد الذيل بشكل صحيح، مرر الذيل عبر سوار السد وضع السوار في أقرب نقطة ممكنة من قاعدة الذيل دون استخدام القوة.

بعد ذلك، مرر الذيل عبر سوار مستشعر VPR، مع وضعه على مسافة 2 مليمتر من سوار السد. قم بتثبيت الأنبوب في الفجوة الموجودة في الجزء العلوي الخلفي من الحامل. يتم نفخ سوار سد الذيل لإعاقة تدفق الدم إلى الذيل.

يتم تفريغ الهواء ببطء من كفة الإغلاق، وتقوم كفة ذيل VPR التي تحتوي على مستشعر مصمم خصيصاً بقياس الخصائص الفسيولوجية لتدفق الدم العائد عند رجوع الدم إلى الذيل. وتقيس كفة مستشعر VPR تورم الذيل الناتج عن النبضات الشريانية لتدفق الدم. ويتم قياس ضغط الدم الانقباضي تلقائياً عند أول ظهور لتورم الذيل.

يتم حساب ضغط الدم الانبساطي تلقائيًا عند توقف معدل زيادة التورم في الذيل. بعد وضع جميع الحيوانات في الحوامل ووضع الأصفاد على ذيولها، اتركها لمدة خمس دقائق على الأقل للتنظيم الحراري. سجل درجة حرارة الحيوانات.

غالباً ما يجب أن تتراوح درجة حرارة الحيوان، عند قياسها بميزان حرارة يعمل بالأشعة تحت الحمراء، بين 32 و 35 درجة Celsius. والآن بعد أن أصبحت الحيوانات جاهزة، يمكننا البدء في التجربة. انقر فوق "إنهاء" لبدء التجربة.

يمثل الخط الأحمر تفريغ الهواء من سوار الإغلاق وسوار مستشعر VPR. بينما يمثل الخط الأزرق التغيرات في حجم الدم في الذيل. وتحدد نقطة الانعطاف الأولى للخط الأزرق، وهي أقل معدل للتغيير، ضغط الدم الانقباضي.

تحدد نقطة الانثناء الثانية للخط الأزرق، وهي أقصى معدل للتغير، ضغط الدم الانبساطي عند انتهاء التجربة. أخرج الحيوانات فوراً من الأكمام والحامل. سيظهر تقرير ملخص بسيط للجلسة.

يتم حفظ البيانات التي تم جمعها في التجربة كملف Excel. هناك عدة طرق لمعالجة البيانات داخل ملف Excel؛ ومن الممارسات الشائعة استخراج المتوسط الحسابي والانحراف المعياري، وحذف القياسات.

إذا كان الانحراف المعياري أكبر من 30. بالإضافة إلى ذلك، يمكن عرض الدورات المرفوضة وتصدير قاعدة البيانات بالكامل بسهولة إلى برنامج Excel. يرجى مراجعة البروتوكول المكتوب ودليل المستخدم.

لمزيد من المعلومات، لقد أوضحت لكم للتو كيفية قياس ضغط الدم في الفئران بطريقة غير باضعة باستخدام تسجيل ضغط الحجم. ومن الأهمية بمكان تقليل إجهاد الحيوان من خلال اتباع هذا الإجراء من أجل الحصول على قياسات دقيقة ومتسقة. وهذا كل شيء.

شكرًا للمشاهدة، ونتمنى لكم نجاحًا كبيرًا في تجاربكم.