إعداد واستخدام الآفات فانتوم الممارسة التشكيلية الخزعات إبرة الطموح

لتحضير آفة وهمية، يتم قص قطعة من الورق المقوى بمقاس 6 × 6 بوصة لتكون بمثابة لوحة القاعدة. تُغطى لوحة القاعدة بطبقة من مادة السد (caulk) بسمك نصف بوصة. بعد ذلك، يتم قطع قطعة من الموز بطول بوصتين ونصف، ثم تُضغط برفق داخل مادة السد.

تُستخدم الموزة كنواة لآفة وهمية. اغمر النواة تماماً في مادة السد (caulk) دون حبس فقاعات هوائية. غطِ النواة بقطعة من الغلاف البلاستيكي وشكلها على هيئة كومة ملساء. اترك قاعدة مادة السد لتجف في مكان دافئ بعد أن تصبح مادة السد متماسكة وجافة.

انزع الغلاف البلاستيكي للتدرب على مهارة الخزعة بالإبرة الدقيقة (FNA) لاستخراج العينة من لب الموز والتدرب على تحضير اللطاخة. أنا الدكتور فينو من قسم الخلايا المرضية في قسم علم الأمراض بكلية الطب في ويسكونسن. وأنا الدكتور جورج فارزيجي، زميل في قسم الخلايا المرضية في القسم ذاته.

سنقوم اليوم بشرح إجراء لتحضير آفة وهمية للتدرب على إتقان تنفيذ إجراء الخزعة بالإبرة الدقيقة (FNAV) باستخدام أدوات ومواد بسيطة ومتاحة بسهولة. نستخدم هذه التقنية عمومًا لتعريف زمالة علم الأمراض الخلوي ومقيمي علم الأمراض بإجراء خزعة السحب النهائي. وفي مرحلة لاحقة من تدريبهم، سيقوم الزملاء والمقيمون بصقل مهاراتهم من خلال إجراء سحب الخزعة من الآفات التي يمكن جسها سريريًا تحت إشراف أعضاء هيئة التدريس.

لنبدأ الآن. قم بتحضير الآفة الوهمية قبل يوم أو يومين من جلسة التدريب المتوقعة على الخزعة بالإبرة الدقيقة (FNAB). وقبل البدء، جهز على طاولة العمل قطعة من الكرتون، ومسدس سيليكون، وموزة غير مقشرة، وغلاف بلاستيكي رقيق (saran wrap).

تتمثل الخطوة الأولى في تحضير الآفة الوهمية في قص قطعة من الورق المقوى بمقاس ستة في ستة بوصات لتكون بمثابة لوحة القاعدة. بعد ذلك، يتم قص قطعة من الموز بطول بوصتين تقريبًا، والتي ستعمل كقلب للآفة الوهمية. وبعد تجهيز قلب الآفة الوهمية، استخدم مسدس السيليكون لفرد طبقة من السيليكون بسمك نصف بوصة تقريبًا على لوحة القاعدة.

اضغط بلطف على لب الآفة الوهمية داخل الملاط الرطب. الآن، أضف المزيد من الملاط فوق لب الآفة الوهمية لتضمينه بالكامل. كن حذراً من حبس فقاعات الهواء داخل الملاط أثناء ارتداء القفازات.

قم بتوزيع مادة السد (caulk) فوق لب الآفة الاصطناعية يدويًا للتأكد من إحاطتها بالكامل. الآن، قم بتغطية الكتلة بقطعة من الغلاف البلاستيكي بمقاس ستة في ستة بوصات، وقم بتشكيل الكتلة لتأخذ شكلاً محدبًا وأملس. ضع كتلة مادة السد في مكان دافئ لتجف لمدة تزيد بمقدار ست إلى ثماني ساعات عن وقت الجفاف المقترح للعلامة التجارية الخاصة بمادة السد المستخدمة.

يتصلب مادة السد (الكاولك) عند تعرضها للهواء. يمكنك ترك الكتلة في درجة حرارة الغرفة أعلى من 60 درجة فهرنهايت أو تحضينها عند 37 درجة Celsius لتسريع عملية المعالجة. بعد المعالجة، تصبح مادة السد صلبة ويمكنك حينها إزالة الغلاف البلاستيكي بسهولة.

أصبح نموذج الآفة الخاص بالخزعة بالإبرة الدقيقة (FNA) جاهزاً الآن لاستخدامه في التدريب على إجراء الخزعة بالإبرة الدقيقة. بعد أن قمت بتجهيز نموذج الآفة وتصلبه، يمكنك استخدامه للتدريب على إجراء FNAB. نستخدم هنا أداة حصاد الأنسجة المزودة بصمام وظيفي، ولكن يمكنك باختصار استخدام أي نظام FNA.

تتكون خزعة الإبرة ذات المقبض (THFB) من إبرة لثقب العينة، وسرة إبرة لجمع المواد المسحوبة، ومحقنة للتحكم في الضغط داخل الجهاز، وصمام لتوصيل وسرة الإبرة بالمحقنة أو فصلها عنها. ابدأ بتجهيز مجموعة الخزعة بالإبرة الدقيقة (FNA) مع إغلاق الصمام الذي يربط سرة الإبرة بالمحقنة. الآن، اسحب مكبس المحقنة لإحداث فراغ داخل أسطوانة المحقنة.

بعد ذلك، أدخل طرف الإبرة في الآفة. افتح الصمام لتوصيل محور الإبرة بالفراغ الموجود في أسطوانة المحقنة. يقوم الفراغ بسحب المادة من الآفة إلى داخل الإبرة ومن ثم إلى محور الإبرة.

حرك الإبرة ذهاباً وإياباً داخل الآفة لسحب عينة ممثلة من المكونات الخلوية. ومع الحفاظ على تفريغ الهواء، قم بأخذ عينات من مناطق مختلفة من الآفة عن طريق إدخال الإبرة في الآفة في اتجاهات مختلفة. عند الانتهاء من أخذ العينات، أدر الصمام لفصل تفريغ الهواء في أسطوانة المحقنة وموازنة الضغط مع الظروف الخارجية عن طريق فتح الصمام.

بعد ذلك، قم بتدوير الصمام لفصله عن الجزء الخارجي وأسطوانة المحقنة. اسحب الإبرة من الآفة مع إبقاء الصمام مغلقاً. يحافظ إغلاق الصمام على ضغط سلبي طفيف في طرف السرة، ويمنع تدفق العينة عائدةً إلى الآفة بفعل الخاصية الشعرية.

بشكل مشابه لظاهرة السحب بالماصة، أصبحت عينة النسيج الآن آمنة في مركز الإبرة. بمجرد إخراج الإبرة من موضعها، يتم وضع المحتوى المشفط على الشريحة الزجاجية لتحضير مسحة مباشرة. بمجرد وضع قطرة من المادة المشفطة على الشريحة، يمكنك نشرها باستخدام طرق متنوعة اعتماداً على طبيعة المادة المشفطة، وعادةً ما نقوم بنشر العينة بين شريحتين باستخدام الطريقة الموضحة هنا.

في حال كانت العينة الفعلية مخففة بالدم، قم بتصريف الدم الزائد عن طريق إمالة الشريحة قبل وضع الشريحة الزجاجية الثانية في الأعلى. أما إذا كانت المادة المشفوطة عبارة عن معلق في الغالب دون وجود شظايا مجهرية، كما هو الحال في الآفات التكاثرية اللمفاوية، فيمكن فردها باستخدام طريقة التخديد (ribbing method) حيث تُستخدم حافة إحدى الشرائح لإنشاء مجموعة من اللطاخات الشبيهة بالأضلاع على شريحة أخرى، أو يمكن استخدام طريقة الفرد (spreading method) حيث تُستخدم شريحة واحدة لإنشاء فيلم رقيق على شريحة ثانية. وبمجرد تحضير اللطاخات، يمكنك معالجتها وتثبيتها بطرق متنوعة.

بالنسبة لطرق الصبغ المختلفة، فإن أفضل نهج هو تجفيف جميع المسحات هوائياً وبسرعة خلال دقيقة إلى دقيقتين. ويمكن تسريع تجفيف المسحات الأكثر سمكاً ورطوبة عن طريق تحريك الشرائح جانبياً في الهواء، أو يفضل استخدام مجفف شعر أو مروحة محمولة تعمل بالبطارية. عند استخدام مروحة، يجب الحرص على منع تذرير العينات، خاصة بالنسبة للآفات التي يُتوقع أن تكون مصابة؛ وبمجرد جفاف المسحات، يتم صبغها وفقاً لما يتطلبه بحثك التجريبي.

نقوم هنا بتوضيح عملية صبغ لطخة مجففة هوائيًا باستخدام صبغة D quick، وهي إحدى صبغات رومانوفسكي المستخدمة في التوقيتات. اتبع تعليمات الشركة المصنعة. وقد وجدنا أن التجفيف الهوائي يحسن بشكل كبير من وضوح الصبغ، كما هو موضح في هذا المثال للطخات المصبوغة بصبغة باب.

سيحدد تحليل هذه الصبغات الأولية الاختبارات الإضافية التي قد ترغب في إجرائها، مثل المجهر الإلكتروني الاختياري لكتلة الخلايا، أو المزارع الميكروبيولوجية، أو غيرها. سيتيح الإكمال الناجح للآفة الوهمية سحب مادة الآفة بشكل صحيح، وفي هذه الحالة، مادة نباتية عجينية من الموز. يمكن فرد هذه المادة على الشرائح الزجاجية للتدرب على المسح والصبغ.

لقد أوضحنا لكم للتو كيفية تحضير آفة وهمية للتدرب على كفاءة الخزعة بالإبرة الرفيعة (FNAB). وأثناء إجراء هذه التجربة، من المهم تذكر وجوب تحضير الآفة الوهمية قبل 36 ساعة على الأقل من جلسة اختبار الكفاءة، لأن هلام السد (caulking gel) يتطلب بعض الوقت ليتصلب. وهناك نقطة مهمة أخرى وهي تطبيق vacuum وتحرير vacuum بتسلسل صحيح لتحقيق الحصول على أفضل مادة مسحوبة أثناء إجراء عملية FNAV.

هذا كل شيء. شكراً للمشاهدة وبالتوفيق في التدريب، وشكراً جزيلاً لكم.