Name: الولبخية عدوى بكتيرية في ذبابة الفاكهة (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: تعلم بروتوكول عزل وحقن العامل المسبب للولبخية في ذبابة الفاكهة باستخدام جهاز ترشيح متخصص. تساعد هذه الطريقة الباحثين على دراسة آليات العدوى داخل الحشرات.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.

الولبخية عدوى بكتيرية في ذبابة الفاكهة

Wolbachia Bacterial Infection in Drosophila

اسمي فويا فريدمان، وأنا باحثة مشاركة في جامعة برينستون. وسأحدثكم اليوم عن بعض البروتوكولات التي قمت بتطويرها لنقل العدوى، وتحديداً لعزل الهيموليمف من الذباب المصاب، ومن ثم حقن هذا الهيموليمف في ذباب غير مصاب.بشكل أساسي، هذا بروتوكول بسيط للغاية لعزل الذكور فقط للأغراض الأساسية. وستستخدم هذا الجهاز من شركة mepo والذي يحتوي على مرشح يوضع فوق أنبوب E. لذا، تحتاج أساساً إلى البدء بحوالي 100 ذبابة. قم بتخدير الذباب، ثم ضعها في جهاز الترشيح، ويمكنك ببساطة استخدام قمع لإضافة الذباب بسهولة إلى هذا الجهاز وغسله بـ 70% ethanol.قم ببساطة بإزالة الإيثانول، حيث يمكنك التخلص منه، وبعد ثلاث مرات من الغسل، قم بإجراء الغسلة الأخيرة باستخدام ماء منقّى (molecular water) لتجنب بقاء آثار من الإيثانول مع البكتيريا. بعد ذلك، انقل المزيج إلى أنبوب جديد، ثم قم بالطرد المركزي باستخدام جهاز طرد مركزي دقيق (microcentrifuge) لمدة دقيقتين. ولاحقاً، يمكنك حقن ذلك، حيث يتم إطعام الذباب غير المتأثر فقط.لذا، قم ببساطة باستخدام شريط لاصق مزدوج الوجه، وعادةً ما يكون لهذه الأشرطة جانبان، أحدهما أكثر التصاقاً من الآخر. اترك الجانب الأكثر التصاقاً للأعلى لأنه الجانب الذي ستلصق عليه الذباب. وبشكل أساسي، في جهاز الغاز، إذا وضعت هذه الشريحة في الأعلى، فلن يكون هناك تدفق للغاز وسيبقى الذباب مستيقظاً إذا كان موجوداً فوق الشر

wolbachia-bacterial-infection-in-drosophila

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

الطفيل (الطفيلية) الدبابير تشكل فئة كبيرة من الأعداء الطبيعيين للحشرات كثيرة...

مقدمة لالدبابير الطفيلية من<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; والاستجابة المناعية Antiparasite

المصدر: سيفا-جوثي، ج. أ. وآخرون. العدوى البكتيرية الفموية والتساقط في ذبابة الفاكهة الميلانوغاستر. J. Vis. Exp. (2018)يظهر الفيديو العدوى الفموية لذبابة الفاكهة الميلانوغاستر بالبكتيريا الممرضة. يشمل ذلك تحضير قوارير العدوى ونقل الذباب الجائع لتمكين ابتلاع البكتيريا. تلتقط العملية استعمار الأمعاء، تليها تعقيم السطح وتجانس الذباب. وأخيرا، يظهر قياس كمية الحمل البكتيري الداخلي من خلال التخفيف المتسلسل وعد المستعمرات.

عدوى الفم في ذبابة الفاكهة الميلانوغاستر بالبكتيريا الممرضة

المصدر: هيروياسو، أ.، د وآخرون، استخراج الخلايا الدموية من يرقات ذبابة الفاكهة الميلانوغاستر لإجراء العدوى الميكروبية وتحليلها. J. Vis. Exp. (2018)يوضح هذا الفيديو عملية إثبات العدوى البكتيرية في يرقات ذبابة الفاكهة عن طريق وضعها في قطرة بكتيرية ووخزها بإبرة التنجستن. ثم تحضن اليرقات على صفيحة أجار مثقبة غنية بالمغذيات لدراسة التفاعلات بين المضيف والممرض.

تأسيس العدوى البكتيرية في يرقات ذبابة الفاكهة

ذبابة الفاكهة السوداء هو كائن حي نموذجي بارز لدراسة أجهزة المناعة الفطرية والعواقب الفسيولوجية للعدوى والمرض. يصف هذا البروتوكول كيفية توصيل عدوى بكتيرية قوية وقابلة للتكرار كميا إلى D. melanogaster ، وكيفية قياس شدة العدوى لاحقا وتحديد الاستجابة المناعية للمضيف.

العدوى البكتيرية النظامية والمناعة الظواهر الدفاع في<em&gt; الدروسوفيلاميلانوجاستر</em

تم توضيح طريقة لتربية ذبابة الفاكهة في ظل ظروف ممحوضة ومعروف المعايشات. وdechorionated يطير الأجنة في هيبوكلوريت الصوديوم، نقل جو معقم و مطهر لنظام غذائي العقيمة، وتربى في حاويات مغلقة. بتلقيح النظام الغذائي والأجنة مع البكتيريا يؤدي إلى الجمعيات معروف المعايشات، ويتم التأكد من وجود البكتيريا عن طريق طلاء كامل الجسم الخليط ذبابة الفاكهة.

تربية ذبابة الفاكهة<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; تحت ممحوضة ومعروف المعايشات شروط

هي أن يطلق سراحه البعوض بعوض الزاعجة المصرية المصابين ولبخيه إلى السكان الطبيعية لمنع انتقال سيتناقش. يصف لنا أساليب لخلفي عبد اللطيف-مصرية مع التهابات ولبخيه في المختبر للتجارب والإفراج عن الميدان، مع أخذ الاحتياطات اللازمة للتقليل من التكيف مع المختبر واختيار.

الحفاظ على بعوض الزاعجة المصرية "البعوض مصابة" ولبخيه

ويصف هذا البروتوكول طرائق فضح شفويا وتصيب ذبابة الفاكهة المورفولوجية ميلانوجاستيr مع مسببات الأمراض البكتيرية، وقياس عدد تسليط البكتيريا المعدية عقب الإصابة بالقناة الهضمية. نحن كذلك وصف تأثير طفرات محصنة في بقاء يطير بعد العدوى البكتيرية عن طريق الفم.

شفوي من العدوى البكتيرية وإلقاء في melanogaster المورفولوجية

هذا البروتوكول يصف كيفية إنشاء العدوى الفيروسية في فيفو في المورفولوجية ميلانوجاستير باستخدام أسلوب الحقن نانو والتقنيات الأساسية لتحليل التفاعل الفيروس--المضيف.

إنشاء العدوى الفيروسية، وتحليل التفاعل المضيف للفيروسات في Melanogaster المورفولوجية

تم استخدام ذباب ذبابة الفاكهة الميلانوغاستر البالغة على نطاق واسع ككائنات حية نموذجية للتحقيق في الآليات الجزيئية الكامنة وراء الاستجابات المناعية الفطرية المضادة للميكروبات المضيفة واستراتيجيات العدوى الميكروبية. لتعزيز مرحلة يرقة D. melanogaster كنظام نموذج إضافي أو بديل ، يتم وصف تقنية حقن اليرقات.

ذبابة الفاكهة ميلانوغاستر بروتوكول حقن اليرقة

تم استخدام أربع طرق للكشف عن Wolbachia داخل الخلايا ، والتي تكمل بعضها البعض وتحسن دقة الكشف عن عدوى Wolbachia من الزاعجة المشتقة من Aedes albopictus Aa23 و Aa23-T التي تم علاجها من عدوى Wolbachia الأصلية باستخدام المضادات الحيوية.

الكشف عن سلالة Wolbachia wAlbB في خطوط خلايا الزاعجة البيضاء

خطوط الخلايا مفيدة في الدراسات التي أجريت على الكائنات داخل الخلايا التي لا يمكن زراعتها خارج الخلايا المضيفة. على الرغم من أن الخطوط المصابة ب Wolbachia قد مكنت من العديد من الاكتشافات ، إلا أن عدم التجانس داخل هذه الخطوط يمكن أن يؤدي إلى نتائج تجريبية متغيرة. نقدم بروتوكولا لتوليد استنساخ أحادي الخلية وثقافات مستمرة من خلايا JW18 المصابة ب Wolbachia.

توليد الثقافات وحيدة النسيلة من ذبابة الفاكهة السوداء JW18 المصابة بالوولباخيا

تعلم بروتوكول عزل وحقن العامل المسبب للولبخية في ذبابة الفاكهة باستخدام جهاز ترشيح متخصص. تساعد هذه الطريقة الباحثين على دراسة آليات العدوى داخل الحشرات.

الولبخية عدوى بكتيرية في ذبابة الفاكهة

استكشف المزيد من الفيديوهات