April 21st, 2010
مستعرضة انقباض الأبهر (TAC) في الفأر نموذج استخداما تجريبيا لدراسة الآليات الكامنة وراء تضخم القلب والقلب التنمية الفشل. هنا ، نحن تصف إجراءات لتقليص الأبهر لخلق درجة استنساخه من تضخم القلب في الفئران.
يبدأ هذا الإجراء بتخدير الفأر وإعداده لجراحة معقمة ووضعه في وضع ضعيف فوق وسادة تدفئة. يتم إجراء التنبيب الرغامي باستخدام أنبوب PE 90 ، والذي يتم توصيله بعد ذلك بجهاز التنفس الصناعي للقوارض. بعد ذلك ، يتم إجراء بضع الصدر الجزئي إلى الضلع الثاني وتراجع القص.
يتم تحديد الشريان الأورطي المستعرض وربطه لاحقا بين الشرايين السباتية غير اليسرى والشرايين السباتية. يتم إغلاق القفص الصدري ، يليه الجلد بنمط خياطة مستمر. أخيرا ، تتم إزالة الأنبوب الرغامي ويسمح للفأر بالتعافي.
مرحبا ، أنا أنجيلا دال ميدا من مختبر الدكتور زاندر وورز في قسم علم وظائف الأعضاء الجزيئي والفيزياء الحيوية في كلية بايلور للطب. سنعرض لك اليوم إجراء انقباض الأبهر المستعرض في الفئران. نستخدم هذا الإجراء في مختبرنا لدراسة الآليات الكامنة وراء تضخم القلب وتطور قصور القلب.
لذلك دعونا نبدأ. قبل البدء في انقباض الأبهر المستعرض أو الجراحة الضريبية ، قم بتطهير مجال التشغيل بكحول الأيزوبروبيل بنسبة 75٪. قم بتشغيل وسادة التسخين واضبطها على درجة الحرارة المناسبة.
النظام الذي نوصي به هو مضخة مياه تعميم للاعبين متصلة بوسادة العلاج الحراري التي يتم الحفاظ عليها عند 37 درجة مئوية زائد أو ناقص درجة مئوية. تعقيم الأدوات الجراحية في معقم الخرز الساخن قبل الجراحة. بالنسبة للإجراء الجراحي الضريبي ، هناك حاجة إلى الأدوات الجراحية التالية.
زوج من المقص غير الحاد ، ملقطان منحنيان خشنتان للعثور على ملقط بزاوية 45 درجة ، زوج من مقص الزنبرك بزاوية ، ضام للصدر ، وحامل إبرة. يجب أن تكون أدوات تطبيق القطن في متناول اليد أيضا في حالة النزيف. مع إعداد مجال التشغيل ، يمكننا المضي قدما في تنبيب الفأر.
استعدادا للتنبيب ، يتم تخدير الفأر في غرفة الحث وتستخدم مقصات الشعر لحلاقة الفراء من خط الرقبة إلى منتصف مستوى الصدر. ضع الماوس في وضع ضعيف فوق وسادة التدفئة. من المهم الحفاظ على درجة حرارة الجسم الطبيعية أثناء الجراحة لتجنب الانخفاض السريع في معدل ضربات القلب والموت المفاجئ المحتمل.
اضغط على فراش ظفر الماوس للتأكد من أن الماوس مخدر تماما. ضع شريطا مطاطيا على الأسنان الأمامية للحيوان لتمديد الرقبة باستخدام ملقط منحني في يد واحدة ، قم بمعالجة اللسان برفق إلى الجانب باليد الأخرى. أدخل أنبوب PE 90 في القصبة الهوائية.
بعد ذلك ، قم بتوصيل أنبوب القصبة الهوائية بجهاز التنفس الصناعي الدوري للقوارض بحجم هارفارد. يجب أن يتحرك جهاز التنفس الصناعي بسرعة 125 إلى 150 نفسا في الدقيقة وحجم المد والجزر من 0.1 إلى 0.3 مل اعتمادا على وزن جسم الفأر ، وتطهير الجلد داخل المجال الجراحي بمحلول البيتادين متبوعا بالكحول بنسبة 70٪. كرر هذا الإجراء ثلاث مرات لمنع تلوث المجال الجراحي أثناء العملية ، ضع ستارة معقمة فوق الفأر ، مع ترك مجال العملية فقط مكشوفا.
نحن الآن على استعداد لإجراء ربط الشريان الأورطي المستعرض أثناء هذا الإجراء الجراحي. يتم الحفاظ على التخدير عند 1.5 إلى 2٪ من الفلور مع 0.5 إلى لتر واحد في الدقيقة ، 100٪ أكسجين. تحقق من المستوى الصحيح للتخدير عن طريق الضغط على فراش ظفر الفأر.
لتأكيد عدم وجود رد فعل الرمز المميز. ابدأ الجراحة بإجراء بضع الصدر الجزئي. قطع القص بدءا من نهاية الجمجمة وصولا إلى مستوى الضلع الثاني.
باستخدام المجهر الجراحي ، اسحب القص باستخدام ضام الصدر. بعد ذلك ، استخدم ملقطا بزاوية 45 درجة لفصل الغدة الصعترية والأنسجة الدهنية برفق عن قوس الأبهر. بعد تحديد الشريان الأورطي المستعرض ، ضع قطعة صغيرة من خياطة الحرير 6.0 بين الشرايين السباتية المسامية والشرايين السباتية اليسرى.
اربط عقدتين فضفاضتين حول الشريان الأورطي المستعرض وضع قطعة صغيرة من إبرة حادة قياس 27 ونصف. بالتوازي مع الشريان الأورطي الانتقال. اربط العقدة الأولى بسرعة بالإبرة ، متبوعة بالعقدة الثانية ، ثم قم بإزالة الإبرة على الفور من أجل إنتاج انقباض يبلغ قطره 0.4 ملم.
بمجرد ربط الشريان الأورطي المستعرض ، قم بإزالة ضام الصدر واضغط على تدفق جهاز التنفس الصناعي لمدة ثانيتين. لإعادة نفخ الرئتين بعناية ، أغلق القفص الصدري باستخدام خياطة برولين 6.0 بنمط خياطة مقطع. أخيرا ، أغلق الجلد باستخدام خياطة برولين 6.0 بنمط خياطة مستمر.
لتسكين الألم بعد الجراحة. حقن الفأر داخل الصفاق مع البوبرينورفين. إذا كانت هناك علامات على الجفاف بعد الجراحة، يتم إعطاء 0.3 إلى مليلتر واحد من محلول ملحي معقم.
اخفض التخدير تدريجيا إلى وضع إيقاف التشغيل. عند ظهور علامات التنفس التلقائي ، قم بإزالة الأنبوب الرغامي ، ثم حرك الماوس إلى وضع الانبطاح واتركه يتعافى على وسادة تدفئة. بعد أسبوع واحد من انقباض الأبهر المستعرض ، يتم إعادة تخدير الفأر لتحديد درجة الضغط الزائد الناجم عن شرائق الشريان الأورطي المستعرض.
يتم الحفاظ على التخدير ودرجة حرارة الجسم كما هو موضح سابقا. ضع مسبار دوبلر بقوة 20 ميجاهرتز على الجانبين الأيسر والأيمن من الرقبة بزاوية 45 درجة. للكشف عن سرعات تدفق الشريان السباتي ، نستخدم معالج إشارة دوبلر المستند إلى الكمبيوتر لعرض إشارات دوبلر وتخزينها.
اعتمادا على درجة الضغط الزائد المطلوبة للبروتوكول التجريبي ، يتم تضمين الفئران التي تحتوي على الشريان السباتي الأيمن أو RC فقط على نسبة تدفق الشريان السباتي الأيسر أو LC ضمن نطاق معين لمزيد من التحليل. على سبيل المثال ، تؤدي درجة معتدلة من الضغط الزائد إلى نسبة خمسة إلى ثمانية ، في حين أن الانقباض الأكثر إحكاما الذي يؤدي إلى الحمل الزائد للضغط الشديد يؤدي إلى نسبة ثمانية إلى 10. ومع ذلك ، من المتوقع أن يكون للحيوان الوهمي نسبة حوالي واحد.
البقاء على قيد الحياة الجراحي النموذجي بعد TAC في الفئران البرية ناجح بحوالي 80 إلى 90٪. سيؤدي الربط الجراحي للشريان الأورطي المستعرض إلى نسبة سرعة تدفق دوبلر بين الشريان السباتي الأيمن والأيسر أو RC على lc من خمسة إلى 10 مقارنة بالفئران التي يتم تشغيلها بشكل زائف. من المتوقع أن تصاب الفئران المصابة بالحمل الزائد للضغط بتضخم القلب في غضون أسبوع إلى أسبوعين وتوسع القلب بعد ستة إلى ثمانية أسابيع اعتمادا على ضيق الانقباض.
لقد أوضحنا لك للتو كيفية إجراء انقباض الأبهر المستعرض في الفئران ، ولكن إجراء هذا الإجراء مهم للحفاظ على درجة حرارة الجسم الطبيعية وتقليل فقدان الدم. هذا كل شيء. شكرا على المشاهدة ونتمنى لك السعادة في تجاربك.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
تصف هذه المقالة إجراء أداء التضيق الشرياني المستعرض (TAC) في الفئران، وهو نموذج يستخدم لدراسة تضخم القلب وفشل القلب. تتضمن الطريقة تقنيات جراحية لتضييق الشريان الأورطي، مما يؤدي إلى درجة خاضعة للسيطرة من تضخم القلب.