رواية جهاز وطريقة لتدعيم المخدرات

يوضح هذا الفيديو نهجاً جديداً في دراسة إساءة استخدام العقاقير من خلال الجمع بين إجراءات تفضيل المكان الشرطي التقليدية وإجراءات الإدارة الذاتية. أولاً، يتم تحديد تفضيلات خط الأساس لبيئتين تشغيليتين متمايزتين. ثم تبدأ جلسات الإدارة الذاتية التي تقوم فيها الجرذان بإعطاء نفسها الكوكايين في واحدة فقط من البيئات التشغيلية المتميزة.

بعد عملية الإشراط، يتم قياس مقدار الوقت الذي تختار الحيوانات قضاءه في أي من البيئتين الإجرائيتين، ومن ثم يمكن قياس التغيرات في تفضيل المكان ومعدلات الإدارة الذاتية للعقار وربطها ببعضها البعض. مرحباً، أنا أليسون فيدوسيا من مختبر الدكتورة كريستين إل في كلية الصيدلة، قسم علم الأدوية وعلم السموم في جامعة تكساس في أوستن. وأنا كريستين إل.

نود اليوم أن نعرض لكم جهازاً مبتكراً يمكن استخدامه بطرق عدة مختلفة لدراسة تعزيز العقاقير والإدمان لدى الجرذان. نحن نستخدم هذا الإجراء في مختبرنا لدراسة آثار الحالة المترتبة على الإدارة الذاتية للكوكايين. لذا، فلنبدأ.

لبدء التحضيرات لتجارب التعزيز الدوائي، قم أولاً بتدريب ذكور الجرذان على الضغط على رافعة للحصول على مكافأة غذائية. بعد ذلك، قم بتصنيع القثطرات الوريدية، والتي ستُستخدم للإدارة الذاتية للدواء. تُصنع القثطرات من كانيولا من الفولاذ المقاوم للصدأ وأنابيب Celeste، ويجب غسلها باستخدام الميثانول والماء.

ثم تُجفف بالهواء أثناء تحضيرها في يوم الجراحة، وتُغمر في ethanol بتركيز 70%. وعند اكتمال القساطر، تخضع الجرذان لإجراء جراحي لتركيب قسطرة في الوريد الوداجي للسماح بالإعطاء الذاتي للدواء. وخلال التجارب، يتم تخدير الجرذ باستخدام isof fluorine بتركيز يتراوح من 2.5% إلى 4%.

بعد ذلك، قم بحلاقة الرأس والصدر، ثم طهر هاتين المنطقتين باستخدام محلول Betadine. بعد ذلك، ضع الحيوان على وسادة معقمة بعد الجراحة. راقب الجرذ لعدة ساعات قبل إعادته إلى مستعمرة الحيوانات.

حافظ على نفاذية القسطرة عن طريق الغسل اليومي بـ 0.1 milliliters من محلول ملحي بتركيز 0.9%، ومحلول هيبارين ومينتون. ولتحضير الكوكايين المستخدم في التجارب، يتم إذابته في محلول ملحي متساوي التوتر بتركيزات الجرعة المناسبة وفقاً لأوزان الحيوانات، مع تحضير الحيوانات وطريقة إيصال الدواء. لنلقِ نظرة على الجهاز المستخدم أثناء التجارب. يتكون الجهاز المستخدم في التجارب من غرفتين برافعة واحدة، مجهزتين بأضواء منزلية ومحفزة، وثلاث مجموعات من الأشعة الضوئية التي تُستخدم لقياس النشاط الحركي.

يتم توصيل الغرف ببعضها البعض عبر ممر مصنع من البليكسي جلاس. يتكون الممر من جدارين أسودين بخطوط بيضاء وجدارين معدنيين، وسقف شفاف من البليكسي جلاس وأرضية بيضاء من البليكسي جلاس. تحتوي الغرفتان التشغيليتان على أرضيات من قضبان الشبكة الفولاذية مثبتة فوق قواعد أقفاص معدنية قابلة للإزالة.

توضع إشارات بصرية وشمية داخل غرفة الاشتراط الإجرائي لإنشاء بيئات فريدة يمكن تمييزها. وفي إحدى هذه البيئات، سيتاح للحيوان الوصول إلى حقن الكوكائين، بينما في البيئة البديلة، سيتاح له الوصول فقط إلى حقن المحلول الملحي.

تتكون الإشارات البصرية إما من مادة لباد بيضاء أو سوداء مثبتة على الجدران الأمامية والخلفية وفوق سقف القفص. أما الإشارات الشمية فهي عبارة عن رائحة زيتية من صفوف أو قرفة تشبع كرة قطنية موضوعة أسفل الأرضية السلكية للغرفة. وخلال التجارب، يتم تسجيل استجابات Libra وبيانات النشاط الحركي باستخدام جهاز كمبيوتر Med Pentium بتردد 100 megahertz مجهز ببرنامج med PC.

بعد أن اطلعنا على الجهاز التجريبي، دعونا نرى كيفية جمع البيانات. يتم الإجراء التجريبي على مدار عدة أيام، بدءاً باختبارات التفضيل الأساسية التي تستمر لمدة يومين، تليها جلسات الإعطاء الذاتي للدواء التي تستمر ثمانية أو 16 يوماً، وتنتهي باختبار التفضيل الشرطي للمكان. لبدء جمع قياسات التفضيل الأساسية، ضع الجرذ في الممر المركزي مع إتاحة الوصول إلى كلتا غرفتي التشغيل لمدة 20 دقيقة.

قم بتفعيل برنامج كمبيوتر الكاميرا الفيديو والمؤقت فور وضع الجرذ في الغرفة. بعد مرور 20 دقيقة، أخرج الجرذ من الغرفة وأعده إلى القفص الرئيسي. وفي اليوم التالي لآخر اختبار أساسي، ابدأ جلسات الإعطاء الذاتي للدواء.

أولاً، ضع المؤثرات الحسية ثم ضع حاجزاً لمنع الوصول من الممر المركزي المصنوع من البلكسي جلاس إلى الغرفة. الآن، قم بتوصيل مدخل قسطرة الحيوان بمحقنة الدواء المثبتة لبدء الجلسة. أولاً، ضع الحيوان داخل الغرفة.

بعد إغلاق باب غرفة الإشراط الإجرائي، ابدأ تشغيل برنامج الكمبيوتر الطبي والمؤقت بحيث يكون الحصول على الكوكائين متاحاً لمدة ساعة واحدة. يتم إعطاء الكوكائين باستخدام جدول تعزيز ذي نسبة تصاعدية، ويتطلب هذا الجدول استجابات رافعة تزداد تدريجياً لتلقي كل حقنة كوكائين تالية.

تتكون كل حقنة من جرعة مقدارها 0.75 مليجرام لكل كيلوجرام في أيام متبادلة. وفي البيئة البديلة، يُستخدم جدول النسبة التصاعدية أيضًا لحقن المحلول الملحي. وفي نهاية كل جلسة إدارة ذاتية، افصل الغلاف عن أنابيب الدواء، وأخرجه من الغرفة، ثم أعده إلى القفص الرئيسي.

في اليوم التالي لآخر جلسة إدارة ذاتية، يتم إجراء اختبار تفضيل المكان الشرطي. وتكون إجراءات هذا الاختبار مماثلة لتلك المتبعة في قياسات الخط الأساسي. والآن، دعونا نرى كيفية تقييم البيانات وتحليلها.

خلال تقييم البيانات، يقوم الباحث الذي لا يعرف توزيع المجموعات (experimenter blind) بتحديد مقدار الوقت الذي قضاه الحيوان في كل مقصورة. يراجع الباحث الشريط المسجل لعد مرات الدخول والخروج بين المقصورات لمدة 15 دقيقة، تبدأ بعد خمس دقائق من وضع الحيوان داخل الجهاز. تُستخدم نفس الإجراءات المستخدمة لتحديد التفضيل الأساسي ونتائج اختبار CPP.

تُستخدم الفروق بين قياسات خط الأساس ودرجات تفضيل المكان الشرطي (CPP) بعد التكييف لتحديد تأثيرات تكييف الدواء. تُحسب درجات الفرق بعد التكييف عن طريق طرح مقدار الوقت الذي قضاه الحيوان في الحجرة المقترنة بالمثير البارز من مقدار الوقت الذي قضاه في الحجرة المقترنة بالدواء أثناء اختبار CPP. وبالمثل، تُحسب درجات فرق خط الأساس ثم تُطرح من درجات فرق CPP.

يمكن إجراء التحليل الإحصائي للتغيرات في درجات مختلفة من خط الأساس إلى جلسات الاختبار لتحديد تأثيرات تكييف العقار. يظهر هنا رسم بياني ممثل لدرجات خط الأساس ودرجات اختبار CPP. كانت درجات اختبار CPP أعلى بكثير من درجات خط الأساس، مما يشير إلى تفضيل لبيئة الكوكايين.

يتم هنا توضيح تحليل الارتباط بعد التكييف لاستجابات ترك العقار وإجمالي درجات اختبار فرق التفضيل الشرطي للمكان (CPP). كانت مجموعة الكوكائين طويلة المدى هي المجموعة الوحيدة التي أظهرت ارتباطاً إيجابياً دالاً بين استجابات ترك العقار ودرجات اختبار CPP. لقد قدمنا لكم للتو كيفية الجمع بين طرق التكييف التقليدية، والتفضيل الشرطي للمكان، وطرق الإدارة الذاتية لابتكار نهج جديد لدراسة تعزيز العقاقير في الجرذان.

عند إجراء هذا الإجراء، من المهم الحفاظ على سجلات دقيقة. هذا كل شيء. شكراً للمشاهدة وبالتوفيق في تجاربكم.