التعديل الجيني للخلايا الكيراتينية البشرية الأولية: طريقة للتلاعب الوراثي بالخلايا الكيراتينية باستخدام الفيروسات القهقرية المؤتلفة

- الخلايا الكيراتينية هي نوع الخلايا البارز الموجود في البشرة أو الطبقة الخارجية من الجلد. لتعديل الخلايا الكيراتينية وراثيا ، ابدأ بثقافة خلايا فينيكس العبوات الفيروسية القهقرية. بعد ذلك ، أضف خليطا يحتوي على نواقل فيروسات قهقرية تحمل الجين محل الاهتمام وكاشف التعداد. احتضان اللوحة للمدة الزمنية المطلوبة.

يسهل

كاشف التعدي توصيل المادة الوراثية الفيروسية إلى خلايا العبوة. تقوم هذه الخلايا المصممة خصيصا بتشفير البروتينات المطلوبة لإنتاج القفيصة القهقرية وتعزز تغليف الحمض النووي الريبي الناقل للفيروسات القهقرية الذي يحمل الجين محل الاهتمام. عند التعبئة ، تخرج الفيروسات الناضجة من الخلايا إلى الوسائط. الآن ، انقل الوسائط المعلقة بسبب الفيروس إلى طبق ثقافة جديد يحتوي على الخلايا الكيراتينية الأولية. قم بزيادة الثقافة بمحلول بوليمر كاتيوني مرغوب.

يعمل

البوليمر الكاتيوني على تحييد الشحنات السالبة على الأغشية الفيروسية والكيراتينية ، مما يزيد من كفاءة الاندماج الفيروسي مع سطح الخلية. عند الاندماج ، يطلق الفيروس الحمض النووي الريبي الخاص به في سيتوبلازم الخلية ، والذي ينسخ إلى الحمض النووي مزدوج الشريطة. يدخل هذا الحمض النووي الفيروسي إلى النواة ويتكامل مع جينوم الخلايا الكيراتينية ، مما يؤدي إلى تغييرات جينية. في البروتوكول التالي ، سنعرض التعديل الجيني للخلايا الكيراتينية البشرية الأولية