Name: ضمة الكوليرا : النموذجي لدراسة الكائنات البكتيرية إمراض -- مقابلة (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-05-28T00:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 44 s
Description: استكشف آليات بقاء مسببات الأمراض البشرية في البيئات غير المضيفة باستخدام Vibrio cholerae كنموذج. تساعد هذه الدراسة على فهم ديناميكيات انتقال الكوليرا وتطوير استراتيجيات الصحة العامة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ليس لدى المؤلفين أي تضاربات مصالح للإفصاح عنها.

ضمة الكوليرا : النموذجي لدراسة الكائنات البكتيرية إمراض -- مقابلة

Vibrio cholerae: Model Organism to Study Bacterial Pathogenesis - Interview

أنا في MindUP، حيث نقوم بدراسة بيولوجيا المسببات المرضية البشرية في البيئات غير المضيفة. تضطر العديد من المسببات المرضية البشرية بعد خروجها من المضيف البشري إلى البقاء على قيد الحياة في البيئة قبل أن تصيب مضيفاً آخر. لذا، فإن هدفنا هو فهم العمليات التي تتحكم في بقاء المسببات المرضية البشرية في البيئة بشكل أفضل.وهدفنا بعد ذلك هو فهم ديناميكيات انتقال العوامل المعدية بشكل أفضل. لذا، فإننا نستخدم بكتيريا Vibrio cholerae، المسبب المرضي للإسهال، مرض الكوليرا، ككائن نموذجي. وتعتبر Vibrio cholerae ممرضاً بشرياً اختيارياً ولها دورة حياة مائية.وبناءً على ذلك، فإن هذا يمنحنا فرصة كبيرة لدراسة بقاء المسبب المرضي البشري في بيئة طبيعية. وتتوفر العديد من الأدوات لدراسة هذا الكائن، حيث تم تحديد تسلسل جينومه بالكامل، وهناك مصفوفات دقيقة تمثل كل جين في الجينوم.وعلاوة على ذلك، تتوفر العديد من الأدوات التي تمكننا من تعديل الجينوم الخاص بهذا الكائن. ويستفيد برنامجي البحثي من هذه الأدوات ويدمجها لدراسة دورة حياة الكوليرا المائية. لذا، نحاول في تجاربنا محاكاة البيئات المائية التي يعيش فيها هذا الكائن.وبعد ذلك، نود أن نعرف كيف يستشعر هذا الكائن التقلبات في بيئته فيما يتعلق بالحمولة الغذائية، أو درجة الحرارة، أو الملوحة، أو الضغوط البيولوجية الأخرى مثل البلاجديفلجيا والـ tzo؟ ففي البيئة المائية، يوجد Vibrio cholerae إما في شكل حر أو في شكل ملتصق بالأسطح. وتُعرف الأشكال الملتصقة بالأسطح باسم الأغشية الحيوية (biofilms)، والتي تتكون ببساطة من كائنات دقيقة وموادها البوليمرية خارج الخلية، والتي يمكن أن تكون سكريات متعددة خارجية وبروتينات وأحياناً DNA.وتعمل هذه المصفوفة بمثابة مادة لاصقة تربط الكائن الحي معاً. وعندما تنمو هذه الكائنات في نمط الغشاء الحيوي، فإنها تصبح في الواقع مقاومة للتغيرات في معاملات بيئاتها، ويمكن حمايتها بشكل أفضل من، على سبيل المثال، العاثيات والتحلل البروتيني. وتعد هذه العوامل هي التي تتحكم في وفرة الكائنات الدقيقة في البيئة.تتمثل بعض التطورات التقنية الحديثة التي ساعدتنا في دراساتنا في إكمال تسلسل الجينوم الخاص بالكائن الحي وتطوير تقنية المصفوفات الدقيقة (microarray). وباستخدام هذه التقنيات، يمكننا تحديد كيفية استجابة هذا الكائن، على مستوى الجينوم بأكمله، للتقلبات الرئيسية في بيئته، مثل الحرمان من العناصر الغذائية أو التغيرات في درجات الحرارة. كما أن أحد أهدافنا الرئيسية هو دمج دراسات التعبير الجيني للجينوم بأكمله في تحليل الشبكات.لذا، نود تحديد الشبكة التنظيمية الجينية التي تتحكم في استجابة الكائن للمتغيرات البيئية المتقلبة. كما نرغب في أن نكون قادرين على نمذجة سلوك الكائن الحي في البيئة. وعلاوة على ذلك، لا نزال نجهل التوقيت الذي يتفاعل فيه *Vibrio cholerae* مع الكائنات الأخرى في البيئة.لا نعرف الكثير عن إيكولوجيا هذا الكائن، كما أننا لا نعرف مدى صلة الجينات والعمليات التي حددناها على أنها مهمة لبقاء هذا الكائن في المختبر بالعالم الحقيقي. ولا نعرف ما إذا كانت الجينات التي حددناها يتم التعبير عنها عندما يتواجد Ria cholera في البيئة الطبيعية. كما نرغب في أن نكون قادرين على تحديد واستزراع الكائنات التي يتفاعل معها Vibrio Cora لأن Vibrio Cora في البيئة جزء من مجتمع ميكروبي معقد.لذا، أعتقد أن فهم بيولوجيا بكتيريا Vibrio cholerae في البيئة الطبيعية يمثل تحديًا، وهو أمر بالغ الأهمية لنا لفهم بيولوجيا هذا الكائن الحي. وآمل خلال السنوات الخمس المقبلة أن نتمكن من توصيف مكونات السكريات المتعددة الخارجية (op polysaccharide) للأغشية الحيوية بشكل أفضل. فعلى سبيل المثال، لا نزال نجهل بنية السكريات المتعددة الخارجية التي تعمل على ربط الخلايا معًا في بكتيريا Vibrio cholerae.كما أننا لا نعرف جميع مكونات مقاييس الغشاء الحيوي. وأعتقد أنه سيكون من الرائع في نهاية المطاف أن نتمكن من قياس مكونات مقاييس الغشاء الحيوي في الأغشية الحيوية الطبيعية لهذه الكائنات. وأعتقد أن تحدياً رئيسياً آخر يتمثل في دراسة OC في البيئة الطبيعية.وآمل أن نتمكن من الاستفادة من دراسات الجينوم المقارنة والجمع بين تحليل التعبير الجيني الشامل والجينوميات المقارنة لفهم تطور بكتيريا IBR cholera كعامل ممرض بشكل أفضل.

vibrio-cholerae-model-organism-to-study-bacterial-pathogenesis

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

وهناك طريقة سريعة لتعديل...

TransFLP - طريقة لتعديل وراثيا<em&gt; ضمة الكوليرا</em&gt; بناء على التحول الطبيعي وإعادة التركيب، FLP

المصدر: برومفيلد، ك. د. وآخرون، تقنيات المختبر المستخدمة للحفاظ على وتمييز الأنواع الحيوية للعزلات السريرية والبيئية لمرض فيبريو كوليرا . J. Vis. Exp. (2017).يوضح هذا الفيديو اختبار فوجيس-بروسكوير (VP) للتمييز بين ثلاثة أنواع حيوية من الكوليرا الفيبريو: الكلاسيكي، النوع البري من إل تور، ونوع إل تور. يتم تلقيح كل مزرعة في وسط يحتوي على الجلوكوز، ويتم حضنها، ومعالجتها ب α-نفثول وهيدروكسيد البوتاسيوم للكشف عن وجود الأسيتوين. يلاحظ لون وردي-أحمر، يشير إلى تفاعل إيجابي في VP، فقط في النوع الحيوي...

اختبار فوغز-بروسكاوير لتمييز الأنواع الحيوية للفيبريو كوليرا

المصدر: ناج، د.، وآخرون. قياس استيطان وإسهال Vibrio cholerae في نموذج سمك الزرد البالغ. J. Vis. Exp. (2018)يوضح هذا الفيديو بروتوكول لقياس الحمل البكتيري المعوي في أسماك الزرد البالغة المصابة بسلالة مقاومة للمضادات الحيوية من فيبريو كوليرا. بعد القتل الرحيم والتشريح، يتم عزل الجهاز الهضمي وتجانسه باستخدام خرز زجاجي، ومعالجته لإطلاق البكتيريا. يتم طلاء النظير المتجانس الناتج على وسط انتقائي، وتعد مستعمرات زرقاء اللون تعبر عن β-جالاكتوسيداز لتقدير العبء البكتيري.

قياس كمية البكتيريا المعوية في أسماك الزرد المصابة بمرض فيبريو كوليرا

المصدر: ناج، د.، et.al. قياس استيطان وإسهال Vibrio cholerae في نموذج سمك الزرد البالغ. J. Vis. Exp. (2018)يوضح هذا الفيديو تطعيم سمك الزرد البالغ بسلالة فيبريو كوليرا الممرضة لدراسة استعمار الأمعاء ونتائج الأمراض. يظهر كيف تعطل السموم البكتيرية سلامة الأمعاء، مما يؤدي إلى تسرب السوائل، وإفراز المخاط، والإسهال المائي قبل تجهيز الأسماك لمزيد من التحليل.

استعمار الأمعاء وتحفيز الإسهال بواسطة Vibrio cholerae في أسماك الزرد البالغة

شرعنا في تحديد التركيزات المسموح من ثلاثة أحماض الدهنية (الأحماض الأوليك، اللينوليك واللينولينيك) وبكتيريا الكوليرا التي لم تؤثر سلبا بشكل ملحوظ وبقاء الخلية بواسطة solubilizing الأحماض الدهنية والسموم واستخدامها في المقايسات بقاء الخلية.

تقرير من الأحماض الدهنية المسموح وتركيزات ذيفان الكوليرا عن طريق خلايا الإنسان الظهارية في الأمعاء وBALB / ج الضامة ماوس

أداء المقايسات ثقافة الخلية عن التحقيق في التصاق البكتيريا وغزو تحت الظروف الهوائية عادة ما يكون غير ممثل...

الغزو الجرثومي المعوي الخلايا الظهارية المعوية<em&gt; في المختبر</em&gt; تتعزز بشكل كبير عن طريق دائرة إنتشار عمودي الموديل

وتصف هذه المخطوطة تقنيات صيانة الكوليرا فيبريو المناسبة بالإضافة إلى سلسلة من المقايسات الكيميائية الحيوية، وتستخدم بشكل جماعي للتمييز السريع والموثوق به بين السريرية والبيئية V. كوليراي، بيوتيبس، إلى داخل، أداة تعريف إنجليزية غير معروفة، المختبر، الإطار.

تقنيات المختبر تستخدم للحفاظ على والتمايز بيوتيبس<em&gt; ضمة الكوليرا</em&gt; العوازل السريرية والبيئية

نقدم هنا، ديدان أسطوانية ايليجانس كاينورهابديتيس كنموذج مضيف تنوعاً لدراسة التفاعل الميكروبية.

ايليجانس كاينورهابديتيس السلكية-نموذج تنوعاً في فيفو لدراسة التفاعلات بين الميكروبات والمضيف

هي الزرد طبيعية الكوليرا استضافة ويمكن استخدامها للخص ودراسة دورة المعدية بأكملها من الاستعمار إلى انتقال العدوى. هنا، نحن لشرح كيفية تقييم مستويات الاستعمار ضد الكوليرا والإسهال في الزرد كمياً.

التحديد الكمي لاستعمار الكوليرا والإسهال في النموذج الزرد الكبار

البكتيريا ترميز آليات متنوعة للانخراط في المنافسة بين البكتيريا. هنا، نقدم بروتوكولاً قائماً على الثقافة لتوصيف التفاعلات التنافسية بين العزلات البكتيرية وكيفية تأثيرها على البنية المكانية للسكان المختلطين.

اختبار تكعيبي لتحديد التفاعلات التنافسية بين عزل فيبريو فيشري

استكشف آليات بقاء مسببات الأمراض البشرية في البيئات غير المضيفة باستخدام Vibrio cholerae كنموذج. تساعد هذه الدراسة على فهم ديناميكيات انتقال الكوليرا وتطوير استراتيجيات الصحة العامة.

ضمة الكوليرا : النموذجي لدراسة الكائنات البكتيرية إمراض -- مقابلة

استكشف المزيد من الفيديوهات