December 30th, 2010
هذه المخطوطة يوضح ويناقش التقنيات المستخدمة لمسح والكشف عن حساسية المبيدات المقاومة للاتصال ومبيدات الآفات المفصلية في المنهجية.
الهدف العام من التجربة التالية هو تحديد ما إذا كانت الحشرة قد طورت مقاومة للمبيد الحشري. يتم تحقيق ذلك عن طريق إجراء تركيزات ليتم اختبارها عن طريق إذابة المبيدات الحشرية من الدرجة التقنية إلى الأسيتون للمبيدات الحشرية الملامسة كما هو موضح بواسطة plaid AL في عام 1987. أو محلول ماء العسل للمبيدات الحشرية الجهازية كما هو موضح من قبل الشخير Etol في عام 2008.
كخطوة ثانية ، قم بتدوير 0.5 مل من محلول المبيدات الحشرية الأسيتون في قارورة عازلة زجاجية سعة 20 مليلتر ، وقم بتدوير القوارير على أسطوانة هوت دوج تجارية مع إيقاف تشغيل عنصر التسخين أو Eloqua 0.5 مل من محلول المبيدات الحشرية بماء العسل على قطعة من رغوة الأزهار موضوعة داخل قارورة. بعد ذلك ، اجمع الحشرة المرغوبة لاختبار قارورة البالغين من أجل إجراء المقايسة الحيوية ، والتي تراقب نتائج مقاومة المبيدات الحشرية التي توضح ما إذا كانت الحشرة قد طورت مقاومة للمبيد الحشري أم لا بناء على مقارنة LC 50 الذي تم تحقيقه عبر تحليل الوصايا بالخمسينيات LC الموجودة مسبقا. مرحبا ، اسمي أودرا ميلر.
أنا من كلية الزراعة بجامعة ميسوري ومركز أبحاث دلتا الأغذية والموارد الطبيعية في بورتاجفيل بولاية ميسوري. سأقوم بإجراء تجربة من مختبر علم الحشرات التابع للدكتور كيلي كيندل. سأعرض الإجراء لاكتشاف ما إذا كانت مقاومة المبيدات الحشرية تحدث أم لا.
الآن لنبدأ. من الضروري استخدام احتياطات السلامة المناسبة مثل نظارات السلامة والأقنعة والقفازات وما إلى ذلك. عند التعامل مع المبيدات الحشرية ، راجع ورقة بيانات سلامة المواد لمعدات الحماية الشخصية الموصى بها لمبيد الآفات المحدد الذي يتم اختباره.
من أجل عمل محلول مخزون ، اضبط النقاء وقم بقياس المبيدات الحشرية من الدرجة الفنية بطريقة ما. يملأ القارب الموجود في غطاء محرك السيارة جزئيا قارورة حجمية بالأسيتون. أضف المبيد الحشري ، واشطف قارب مصل اللبن بالأسيتون في القارورة.
املأ القارورة الحجمية إلى خط التخرج بالأسيتون الممزوج بالقلب عدة مرات. قم بعمل التخفيف التسلسلي كما هو مطلوب رمز اللون للقوارير للتركيزات باستخدام الطلاء أو أقلام التحديد. صب ما يقرب من نصف الحجم مثل عدد القوارير التي سيتم صنعها في دورق صغير عندما لا يكون المحلول قيد الاستخدام ، قم بتغطيته لتقليل التبخر.
استخدم ماصة مكرر لتوصيل 0.5 مل إلى القوارير. اعمل من التركيز المنخفض إلى العالي ، بدءا من التحكم في الأسيتون فقط من أجل تغطية الجزء الداخلي من القارورة بمبيد حشري من الدرجة التقنية. ضع القوارير على أسطوانة هوت دوج تجارية مع إطفاء الحرارة.
اسمح للقوارير بالدوران حتى يتبخر كل الأسيتون. افحص كل قارورة على حدة للتأكد من جفافها. اجمع الحشرات لاختبارها باستخدام مصائد الفرمون أو شباك الكنس أو أي وسيلة أخرى للالتقاط الجماعي.
زود الحشرات بالطعام والرطوبة لمدة ثماني إلى 24 ساعة. حدد عينات نشطة صحية للمقايسة الحيوية مع 10 إلى 25 حشرة لكل اختبار. تركيز. ضع الحشرات في القوارير بحيث تتعرض لمجموعة كاملة من التركيزات ، وليس تركيزا واحدا فقط في كل مرة.
بعد وقت الحضانة المناسب ، قم بتقييم معدل الوفيات بناء على معايير الحركة المنسقة ، مثل القدرة على كتابة نفسها إذا تم وضعها على سطحها الظهري أو الحركة المنسقة عند حثها برفق. إذا تمكنت الحشرة من كتابة نفسها ولكنها سقطت ، فلا توجد حركة منسقة ، لذلك يجب تقييم الحشرة على أنها ميتة. سجل عدد الأفراد الأحياء والمواتي واحسب النسبة المئوية للبقاء على قيد الحياة لجميع التركيزات.
تحضير قوارير بمبيد حشري من الدرجة التقنية مذاب في محلول ماء العسل بنسبة 10٪ وزن العسل لعمل محلول ماء عسل بنسبة 10٪ من حيث الحجم ، ونقله إلى قارورة حجمية وإضافة مبيد حشري من الدرجة التقنية إلى محلول ماء العسل وشطف قارب الطريق. كرر عملية تخفيف الحبوب ، لكن استخدم ماء العسل بدلا من الأسيتون. قطعي قطعة من رغوة الأزهار وضعيها داخل قارورة Eloqua.
ضع خمسة ملليلتر من المحلول على رغوة الأزهار التي تحيط بالحشرات بكرة قطنية بدلا من الغطاء. قم بإجراء الاختبار الحيوي بنفس الطريقة التي تفعل بها مع المبيدات الحشرية الملامسة الصحيحة للوفيات في السيطرة. وفقا لأبوت ، حدد التركيز المميت المطلوب لقتل 50٪ من السكان و 95٪ من فترات الثقة.
يمكن إجراء ذلك باستخدام برنامج مثل SAS Proc proate أو Polo Plus ، على سبيل المثال ، في هذا البرنامج النموذجي لجرعة SAS تمثل التركيز المستخدم في المقايسة الحيوية. N هو عدد الأفراد الذين تم اختبارهم بتركيز معين والاستجابة هي عدد الأفراد الموتى الذين يجدون احتمال 0.5 وهذا هو lc 50 بحدود ثقة من 0.1891 إلى 0.3273 ميكروغرام لكل حقير. إذا كانت البيانات الأساسية موجودة للحشرة التي تم اختبارها أو lc 50 التي تم الحصول عليها من مجموعة معروفة معرضة للإصابة ، فيمكن مقارنة lc 50 الجديد ب lc 50 من بيانات خط الأساس أو المجموعات السكانية المعرضة للإصابة.
إذا كان خط الأساس lc 50 هو 0.1487 ميكروغرام لكل حقير مع حدود ثقة تتراوح من 0.1167 إلى 0.1793 ميكروغرام لكل حقير ، فيمكن للمرء أن يستنتج أن هناك تغيرا كبيرا في المقاومة لأن حدود الثقة لا تتداخل. ومع ذلك ، إذا كان خط الأساس lc 50 هو 0.1487 ميكروغرام لكل حقير ، ولكن حدود الثقة كانت 0.0958 إلى 0.1983 ميكروغرام لكل حقير ، فلن تكون هناك زيادة كبيرة في المقاومة لأن حدود الثقة متداخلة. يمكن استخدام هذه التجربة للمساعدة في معرفة ما إذا كانت مقاومة المبيدات الحشرية سببا لفشل المبيدات الحشرية أم لا ، ولكن تذكر أنه عند العمل مع المبيدات الحشرية ، يجب عليك دائما استخدام معدات الحماية المناسبة. الآن.
شكرا على المشاهدة ونتمنى لك السعادة في تجاربك.
تناقش هذه الرسالة التقنيات المستخدمة لمسح حساسية المبيدات الحشرية واكتشاف المقاومة في الآفات من المفصليات. يركز الدراسة على تحديد ما إذا كانت الحشرات قد طورت مقاومة للمبيدات الحشرية من خلال الاختبارات الحيوية.
Monitoring insecticide resistance through standardized bioassays enables early detection of reduced compound efficacy, supporting proactive resistance management in agricultural biotechnology. By establishing baseline LC50 values and tracking shifts over time, R&D teams can de-risk field performance predictions and inform lifecycle extension strategies for existing chemistries. This approach strengthens predictive confidence in compound durability and supports data-driven decisions in discovery and formulation optimization.
The adult vial test and its systemic variant function as phenotypic screening tools that bridge early hit validation and preclinical resistance profiling in agrochemical discovery pipelines.