التصوير النقيض المحسن باستخدام سفينة MicroCT

الهدف من هذه التقنية من تصوير الأوعية الدموية المعزز بالتباين باستخدام التصوير المقطعي المحوسب المجهري أو التصوير المقطعي المحوسب الصغير هو توفير الطريقة المثلى لإنشاء مجموعات بيانات عالية الجودة لتحليل شبكات الأوعية الدموية في الفئران الحية. يتم تحقيق ذلك عن طريق الحقن الوريدي لعامل تباين غير شفاف في الجسم الحي. ثم يتم تحضير للتصوير المقطعي المحوسب الدقيق عن طريق تحفيز التخدير ووضع بشكل آمن في غرفة متعددة الوسائط لتقليل القطع الأثرية للحركة أثناء الفحص المقطعي المحوسب الدقيق.

بعد عمليات المسح ، يتم إعادة بناء بيانات التصوير المقطعي المحوسب الصغير وتحميلها في برنامج التصور. تتمثل الخطوة الأخيرة من الإجراء في ضبط معلمات وظيفة النقل ثنائي الأبعاد لتحسين رؤية الأوعية الدموية وتوفير ألوان مختلفة للأوعية الدموية والعظام والأنسجة الرخوة لأغراض التمييز. في النهاية ، يمكن الحصول على نتائج تظهر شبكة الأوعية الدموية في الحية من خلال التصوير المحسن للتباين المقطعي المحوسب وعرض وظيفة النقل ثنائي الأبعاد.

مرحبا ، أنا سو ريش ، PJA باتي من مركز تصوير الصغيرة في قسم معهد أبحاث سرطان الأطفال في مركز العلوم الصحية بجامعة تكساس ، سان أنطونيو. أنا تشارلز كيلر ، أيضا من معهد Greehey لأبحاث سرطان الأطفال في مركز العلوم الصحية بجامعة تكساس في سان أنطونيو. سنعرض لك اليوم إجراء لتصور الأوعية الدموية في الحية باستخدام عامل تباين تجمع الدم غير الشفاف الراديوي.

نستخدم هذا الإجراء في مختبراتنا لدراسة الأوعية المتوسطة والكبيرة للأورام العفوية المعقدة في الفئران المعدلة وراثيا. لذلك دعونا نبدأ. لبدء هذا الإجراء ، احصل على 0.2 مل لكل 20 جراما من 20 ملليغراما من اليود لكل مليلتر من عامل التباين في تجمع الدم المعالج باليود Xia one 60 XL باستخدام حقنة أنسولين منخفضة 28 ونصف مقياس نصف سم مكعب.

حقن عامل التباين في فأر حي عبر الوريد الذيل البعيد. بعد 10 دقائق من الحقن. تحضير للتصوير المضغوط الدقيق.

أولا ، قم بتخدير في صندوق أكريليك متصل ب 2٪ من الفلور في 100٪ أكسجين بمعدل 2.5 لتر في الدقيقة. بعد بضع دقائق ، قم بإجراء قرصة إصبع القدم للتحقق من عمق التخدير. بعد ذلك لتقليل القطع الأثرية للحركة ، قم بتثبيت الماوس عن طريق وضعه في غرفة متعددة الوسائط مصممة خصيصا ومتاحة تجاريا مع توفير الهواء والعادم.

حافظ على إمداد الهواء بنسبة 2٪ من الفلور و 100٪ من الأكسجين لضمان التخدير المستمر للحيوان أثناء الفحص. بمجرد تحضير الماوس ، يمكن مسحه ضوئيا على وحدة التصوير المقطعي المحوسب الدقيقة القادرة على إجراء عمليات مسح للحيوانات الحية. قم بتوصيل غرفة الوسائط المتعددة التي تحتوي على الماوس بأنابيب عادم المهمات.

باستخدام الماسح الضوئي الحجمي المقطعي المحوسب GE Explorer locus ، يمكن مسح بدقة 93 ميكرومتر. يستخدم هذا الماسح الضوئي الحجمي كاشف CCD 3 ، 500 × 1750 لإعادة بناء شعاع مخروط Feld Camp ، حيث تم تعيين المعلمات المستقلة للمنصة ثابتة بتيار 450 ميكروأمبير ، وجهد جهد DP كيلو ووقت تعرض يبلغ 100 مللي ثانية. لتحقيق تباين فائق بين العظام والأنسجة الرخوة من الوعاء الدموي ، يمكن تغيير المعلمات القياسية بخمسة إلى ثمانية إطارات لكل عرض وعدد من المشاهدات من 360 إلى 720 لدوران كامل بزاوية 360 درجة ، استخدم وقت المسح الإجمالي من 15 إلى 20 دقيقة تقريبا بعد الفحص المقطعي المحوسب.

أعد بناء الصور باستخدام برنامج شعاع EVS الخاص بالشركة المصنعة. استمر في مراقبة الفأر حتى يتعافى تماما من التخدير. بمجرد إعادة بنائها ، يمكن استخدام بيانات التصوير المقطعي المحوسب الصغير لوظيفة النقل المتساوي السطحية المتقدمة أحادية البعد أو ثنائية الأبعاد.

عرض الصور باستخدام برنامج معالجة الصور SEG 3D لتقديم إسقاط ثنائي الأبعاد لمجموعة البيانات ثلاثية الأبعاد ، استخدم وظيفة نقل ثنائية الأبعاد مما يزيد من تحسين التمييز بين الوعاء والعظام. أثناء عرض الصورة ، قم بتعيين الألوان والعتامة لعينة الشعاع بناء على وظيفة النقل ، والتي تعتمد بدورها على قيمة التصوير المقطعي المحوسب وحجم التدرج. اضبط وظائف النقل يدويا بناء على الإرشادات المقدمة بواسطة الرسوم البيانية لقيمة التصوير المقطعي المحوسب لتسليط الضوء على المناطق والأشياء ذات الأهمية المعروضة.

فيما يلي نتائج تمثيلية توضح صورة لوظيفة النقل ثنائية الأبعاد على فحص التصوير المقطعي المحوسب الصغير لماوس من النوع البري المحقون ب Xia one 60 xl. لقد أوضحنا لك للتو كيفية إنشاء مجموعات بيانات عالية الجودة لتحليل شبكات الأوعية الدموية في الفئران الحية. يمكن استخدام هذه التقنية بشكل جيد جدا للتقييم النوعي والكمي لمضادات تكوين الأوعية في الدراسات قبل السريرية باستخدام الفئران المعدلة وراثيا أو الفئران الغريبة.

عند القيام بهذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر الحصول على حقن مثالي لعامل التباين في وريد الذيل ووضع بطريقة تقلل من قطعة الحركة التي يمكن أن تحدث بسبب التنفس. هذا كل شيء. شكرا على المشاهدة ونتمنى لك السعادة في تجاربك.