July 12th, 2011
حقن الفأر جدار المثانة هو نهج مفيد لدراسة orthotopically المثانة الخلايا الجذعية وعلم الأحياء السرطان. يمكن أن يتقن هذه الطريقة المجهرية الدقيقة مع تقنية دقيقة والممارسة.
الهدف العام من هذا الإجراء هو إدخال الخلايا في مناطق محددة من جدار المثانة. يتم تحقيق ذلك عن طريق عمل شق في البطن أولا لكشف المثانة. الخطوة التالية من الإجراء هي إدخال شطبة الإبرة داخل الجلسة.
الخطوة الأخيرة من الإجراء هي دفع مكبس المحقنة لحقن الخلايا ذات الأهمية في جدار المثانة. يتميز الزرع الناجح للخلايا بفقاعة موضعية جيدة لا تتسرب من السوائل وتبقى مستقرة في الحجم. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل تلقيح الفئران عبر الإحليل بالخلايا ، هي أنها تمكن المرء من توجيه المكان الذي ستزرع فيه الخلايا نفسها داخل المثانة.
يعد العرض البصري لعضلة لي أمرا بالغ الأهمية حيث يصعب تعلم بقاء الحقن. تعد معرفة الزاوية الصحيحة وموضع دخول الإبرة في المثانة أمرا ضروريا لنجاح التقنية. حدد عمر الفئران وجنسها وسلالها بناء على احتياجات التجربة هنا.
تستخدم الفئران التي تتراوح أعمارها بين ثمانية و 12 أسبوعا لبدء تنظيف سطح الطاولة الجراحية بالماء والصابون. بعد ذلك ، امسح سطح طاولة الجراحة بمناديل جانبية أو مناديل مطهرة. يجب تعقيم الأدوات الجراحية في الأوتوكلاف قبل الجراحة.
امسح الأدوات بنسبة 70٪ من الإيثانول قبل الاستخدام مباشرة وأعد تعقيمها باستخدام معقم الخرز الساخن بين العمليات الجراحية الفردية. قم بتنظيف حقنة هاميلتون سعة 100 ميكرولتر متصلة بإبرة قياس 30 عن طريق الشفط المتكرر للكحول المطلق ، متبوعا بمحلول ملحي معقم بالفوسفات. ضع مخدرا في وضع ضعيف على وسادة دافئة للمساعدة في الحفاظ على درجة حرارة الجسم الطبيعية.
حافظ على مستوى كاف من التخدير عن طريق وضع خطم في فوهة تحتوي على الفلور المتبخر. بعد ذلك ، قم بإزالة الشعر من جلد البطن باستخدام المقصات. استخدم ستارة جراحية معقمة يمكن التخلص منها لتغطية فتحة الشرج لمنع تلوث البراز أثناء الجراحة.
ضع ستارة جراحية ثانية فوق أسفل البطن وكشف نافذة جراحية. تعقيم موقع الجراحة بالتطبيقات المتكررة للبيتادين والكحول باستخدام مجهر تشريح للتكبير. قم بعمل شق في البطن في خط الوسط السفلي بالمقص.
استخدم ضغطا لطيفا على البطن لكشف المثانة. نظرا لأن المثانة عادة ما تكون جزئيا أو كليا ، فإن الضغط على البطن سيدفع الأعضاء الأخرى بعيدا بشكل تفضيلي ويسمح للمثانة بالخروج من الشق. إذا كانت المثانة ممتلئة ، فقم بالضغط النزولي برفق على القبة لفك ضغطها جزئيا.
املأ حقنة هاميلتون المعقمة ب 50 ميكرولتر من محلول العينة. أدخل طرف الإبرة بحيث يكون الشطبة متجها لأعلى في جدار المثانة وقم بحقن محلول العينة. يتميز الحقن الناجح بفقاعة موضعية جيدة لا تتسرب من السوائل وتحافظ على حجم ثابت.
بعد الحقن ، أغلق الشق بمشابك الجرح. اسمح للسيد بالتعافي على وسادة الاحترار سيد واحد. يمكن القيام بهذه التقنية في غضون 10 إلى 15 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.
يمكن تأكيد النجاح من خلال التحليل النسيجي للمثانة في نقاط زمنية متسلسلة بعد الحقن.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
تناقش هذه المقالة تقنية جراحية دقيقة لحقن الخلايا في جدار المثانة الفأرية، مما يسهل دراسة الخلايا الجذعية للمثانة وعلم السرطان. تتيح هذه الطريقة تحديدًا دقيقًا لزرع الخلايا، مما يشكل ميزة كبيرة مقارنة بالتقنيات التقليدية.
Mouse bladder wall injection enables precise orthotopic modeling of bladder biology, supporting mechanistic studies in stem cell, smooth muscle, and cancer research. This technique enhances predictive confidence in disease-relevant systems by allowing targeted cell delivery and localized tissue interrogation. Its reproducibility and anatomical specificity position it as a critical tool for early discovery and preclinical model development in urologic disease pipelines.
This microsurgical injection method integrates into the discovery-to-preclinical continuum by enabling hypothesis-driven in vivo studies and supporting lead identification in bladder disease research.