عالية الكثافة تسجيلات EEG من الفئران تتحرك بحرية باستخدام بوليميد المستندة Microelectrode

في هذه المقالة ، وصفنا إجراء الجراحة ونصائح للتعامل مع زرع رقيقة جدا مجموعة microelectrode بوليميد على أساس (PBM - الصفيف) على الجمجمة الماوس لاقتناء عالية الكثافة تصوير الدماغ (EEG) في نموذج الفأر.

مرحبا ، أنا مينا لي من مختبر Gen Choice في مركز علم الأعصاب في المعهد الكوري للعلوم والتكنولوجيا. سنوضح اليوم حالة EG عالي الكثافة في نموذج الكتلة باستخدام مجموعة أقطاب كهربائية صغيرة قائمة على بولي. يتضمن الإجراء إعداد الأدوات وإعداد للجراحة وإجراء جراحة ستيريو سامة.

بعد الجراحة ، سنقوم بتسجيل مخطط كهربية الدماغ ثم نحلل البيانات. هيا بنا نبدأ. قبل البدء في الجراحة ، قم بإعداد أدوات الاستريو السامة وجميع المواد اللازمة.

يجب أن تكون البيئة نظيفة. جهز الفأر للجراحة. سأعرض جراحة اليوم باستخدام فأر هجين أساسي يبلغ من العمر 17 أسبوعا ستة أسود ستة J 1 29 ثانية أربعة S-V-J-A-E.

يمكننا أيضا استخدام الفئران التي يزيد وزنها عن 25 جراما. قم بتحريك الماوس بحقن IP من كوكتيل يحتوي على 120 ملليغرام لكل كيلوغرام وكيتامين وستة ملليغرام لكل كيلوغرام من الخروج. اضغط برفق على ذيل الماوس أو إلى, للتأكد من أن الفأر مخدر بعمق بما يكفي لمتابعة الجراحة.

لبدء الجراحة ، قم بتركيب على جهاز الاستريو السام بعيدا عن بعضه البعض. ضع قضبان الهواء في محفظة الماوس واحدة تلو الأخرى واجعلها مشدودة. ضع بعض الميثانول على رأسه ثم شكل رأسه بعيدا.

حقن ، قم بعمل شق خلفي أمامي من بين العينين إلى بين الأذنين والجمجمة. اضغط على الجلد في الماوس باستخدام المشابك الدقيقة للحفاظ على الشق واسعا. قم بإزالة أي أنسجة أو غشاء متبقي من الجمجمة باستخدام مقايضات القطع المعقمة.

ضع قلم الوسم فوق رأسه. ضع علامة على نقاط BMA lambda. ثم قم بإزالة قلم الوسم وقم بتمييز النقاط باستخدام أفضل قلم قديم.

مباشرة على العلامة. النقطة. أحضر قطب الفيلم فوق الرأس وضع قطرة من الماء على الجمجمة.

ضع BMA في منتصف الطبقة الخامسة من أونتاريو من أفضل مجموعة كهربائية صغيرة. قم باستبدال الفيلم بعناية من الإنسي إلى لاحقا باستخدام مقايضات القطن الناعم للماء. أعط بضع دقائق حتى يجف تماما.

هذا يساعد في الالتزام بشكل أفضل. قم بعمل ثلاث علامات قلم بقلم زيتي في المساحة المتبقية. هذه العلامات هي المكان الذي ستقوم فيه بالحفر.

كن حذرا جدا في حفر الثقوب حتى لا تلمس الداخل. ضع براغي التوجيه الثلاثة للخطوط المعقمة على الجمجمة وضعها حتى تصبح في الطوق بإحكام. امزج مجموعة سميكة من الأسمنت السائل والسائل والدقيق وقم بتغطية مسامير قطب الفيلم وبقية الجمجمة.

اصنع دفعة أخرى واستخدمها لتغطية القطب بالكامل. اكشف الغطاء عن البراغي مرة أخرى لتثبيتها. تذكر أن هذا الرجل لا ينبغي أن يكون تحت قطب الفيلم.

ضع علامة مزدوجة بها شريط لاصق في الجزء الخلفي من مستوى الموصل. ضع عصا صلبة كحزام في منتصف الجمجمة باستخدام غراء قوي. في تجربة اليوم ، أستخدم طرفا من مسحة القطع لخطوة العصا هذه ، وقم بمعالجة موضع الموصل ليكون للخلف حتى يتلامس مع طرف بقعة القطع.

يجب أن تكون المسافة بين الجمجمة والموصل أكثر من خمسة ملليمترات. قم بلصق مستوى الموصل على طرف مقايضة القطن عن طريق إضافة غراء قوي. قم بتغطية باقي المنطقة المفتوحة بالأسمنت الأكريليك.

بعد معالجة الأسمنت ، قم بإزالة المشابك وحرك الجلد. قم بإزالة الماوس من الباروس وقم بتغطية المساحة الإضافية. مع الأسمنت الأكريليك للأسنان ، ضع المضاد الحيوي للصوديوم الذي تم تناوله حول الأسمنت ومنطقة الخياطة.

ضع الماوس في قفصه الخاص وأعط قائمة من خمسة أيام للتعافي. قم بتوصيل الماوس بمخطط كهربية الدماغ واسحب النار وامنح أكثر من ساعة للسكن. بعد ساعة من تسجيل مخطط كهربية الدماغ ، أجرينا الحصول على مخطط كهربية الدماغ عالي الكثافة في نموذج ماوس مع مجموعة أقطاب كهربائية صغيرة قائمة على بولي.

عند القيام بهذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر التعامل مع الفيلم الكهربائي Tri برفق لأنه يبلغ سمكه سبعة ميكرومتر فقط. أ ، قطرة من ماء الصنبور ضرورية عند إعادة ترتيب القطب. إذا تخطيت هذه الخطوة ، فيمكن تدوير القطب بسهولة والتأكد من أن أسنان الأكريليك المصنوعة من اللزوجة العالية لا تتخلل تحت الفيلم.

بعد التسجيل ، نجري تحليلا غير متصل بالإنترنت باستخدام مختبر الميثامفيتامين لرسم العديد من الرسوم البيانية للدماغ لتصور أنشطة الدماغ في الفئران بوضوح. هذه هي إشارات مخطط كهربية الدماغ متعددة القنوات التمثيلية بعد حقن GBL. على اللوحة اليسرى ، يمكنك رؤية الإشارات الإلكترونية متعددة القنوات التمثيلية بعد حقن GBL على اللوحة اليمنى.

يتم تقديم خرائط تضاريس الدماغ مثل متوسط تأخير وقت الطاقة ومتوسط قوة الذروة ومتوسط خريطة احتمالية ظهور النوبة. هذا كل شيء. شكرا للمشاهدة.