مايو 29, 2013
يتم عرض بروتوكولات لمهمتين أنشأت محرك التنسيق، وتسريع شريط rotarod والأفقي، أيضا اختبارين المتقدمة في أكسفورد مؤخرا، وقضبان ثابتة والمتوازيين. هذه الاختبارات يمكن الكشف عن الإعاقات الحركية يحتمل أن تكون ذات أهمية في حد ذاتها، فضلا عن كونه المتغيرات المحتملة في اختبارات مناطق أخرى من السلوك.
الهدف العام من هذا الإجراء هو قياس التنسيق الحركي في الفئران. يتم تحقيق ذلك عن طريق الاختبار الأول على قضيب الدوار المتسارع. بعد ذلك ، يتم اختبار التنسيق الحركي على الشريط المرئي.
يمكن أيضا اختبار على قضبان ثابتة. أخيرا ، يمكن قياس الأداء على القضبان المتوازية. في النهاية ، يمكن الحصول على نتائج توضح ما إذا كان الفأر يعاني من أي ضعف في التنسيق الحركي.
بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه التقنية بسبب صعوبة وضع الماوس بشكل صحيح على الجهاز لجميع الاختبارات التالية. أحضر الفئران إلى غرفة التجربة قبل الاختبار بخمس إلى 20 دقيقة للتأكد من أنها مستيقظة تماما. تم بناء مشهد قضيب الدوار هنا في جامعة أكسفورد.
يبلغ قطر القضيب ثلاثة سنتيمترات مع سلسلة من الحواف المتوازية على سطحه ، مما يساعد الفئران على الإمساك به بشكل أكثر فعالية. شفة على كل جانب تمنع الماوس من مغادرة القضيب. يبلغ قطرها 30 سم وتفصل بينهما ستة سنتيمترات.
يتم تأمين القضيب على بعد 30 سم من قاعدة الجهاز. يتم وضع سطح مبطن ناعم في القاعدة لتخفيف أي سقوط قبل بدء التجربة. قم بإعداد قضيب الدوار عن طريق ضبط سرعة بدء أربع دورات في الدقيقة ومعدل تسارع يبلغ 20 دورة في الدقيقة.
للبدء ، أمسك الماوس من الذيل واحمله نحو القضيب بزاوية 45 درجة أسفل الأفقي. حرر بسرعة عندما يكاد يلمس القضيب. بدلا من ذلك ، يمكن إنزال الماوس على وتد وسيتم استخدام وتد لنقل إلى القضيب.
ابدأ التسارع بعد 10 ثوان من وضع الماوس على القضيب ولاحظ السرعة التي يسقط بها الماوس. إذا سقط الماوس قبل خمس ثوان ومن المحتمل أن يكون ذلك بسبب سوء الوضع من قبل المجرب ، فلا ينبغي تسجيل النتيجة وإعادة تشغيل التجربة إذا سقط الماوس قبل 10 ثوان. لاحظ الوقت واسمح للحيوان بمحاولتين أخريين.
بالنسبة للحيوانات التي تبقى على بعد 10 ثوان ، سجل السرعة التي يسقط بها. في بعض الأحيان قد يتوقف الفأر عن المشي وبالتالي ، يهاجم البعض حول القضيب قبل أن يسقط في النهاية. من المفيد ملاحظة سرعة هذا الحدوث.
يتم حساب الأداء على أنه متوسط السرعة بين التجارب. على سبيل المثال ، الماوس الذي يسقط قبل 10 ثوان مرة واحدة ثم يظل قيد التشغيل حتى 12 دورة في الدقيقة. المرة الثانية تسجل أربعة زائد 12 مقسومة على اثنين يساوي ثماني دورات في الدقيقة.
يقيس الشريط الأفقي قوة الأطراف المتساقطة والتنسيق بينما يتم استخدام القضيب الذي يبلغ قطره ملليمترين بشكل شائع. قد توفر القضبان ذات القطر الأكبر درجات أداء أكثر دقة. يتم تثبيت قضبان نحاسية بطول 38 سم على ارتفاع 49 سم فوق سطح المقعد بواسطة عمود دعم خشبي.
يتم تثبيت القضبان تحت التوتر عند تركيبها في شقوق الدعامات التي يتم سحبها معا قليلا. ابدأ الاختبار باستخدام شريط المليمتر. أمسك الماوس من الذيل وضعه على المقعد أمام الجهاز.
حركه بسرعة. للخلف حوالي 20 سم لمحاذاة جسمه عموديا على الشريط بسرعة. ارفع ، مما يسمح له بالإمساك بالشريط الأفقي في المنتصف بمسامه الأربعة فقط.
حرر الذيل مع بدء ساعة التوقف في نفس الوقت. إذا فشل الماوس في فهم الشريط وقد يكون موضع المجرب هو السبب. لا تسجل السقوط وأعد اختبار بعد راحة قصيرة.
إذا سقط الماوس قبل خمس ثوان ، ويبدو أن هذا ليس بسبب سوء وضعه من قبل المجرب ، كرر ما يصل إلى ثلاث مرات في محاولة للحصول على درجة أكبر من خمس ثوان. سجل إما الوقت الذي يسقط فيه الماوس أو الوقت حتى يلمس أربعة ضعفاء عمودا بحد أقصى لوقت الاختبار 30 ثانية ، خذ أفضل نتيجة كداتو الحق لتسجيل الشريط الأفقي. إذا انخفضت الكتلة بين ثوان وخمس ثوان، فسجل واحدة بين ست ثوان و10 ثوان.
سجل اثنين بين 11 ثانية و 20 ثانية. سجل ثلاثة بين 21 ثانية و 30 ثانية. سجل أربعة سقوط بعد 30 ثانية أو البقاء على الشريط حتى 30 ثانية.
يسجل خمسة ، ويسجل الماوس أيضا خمسة إذا لامس نهاية. دعم بمنافذ أربعة في أي وقت أثناء الاختبار. إذا تم تحقيق درجة خمسة على شريط ملليمترين ، فيمكن بعد ذلك اختبار على قضبان أكثر سمكا بعد راحة قصيرة.
نظام تسجيل النقاط لأعمدة الأربعة وستة ملليمترات هو نفسه بالنسبة للشريط المليمتري الاثنين، والنتيجة النهائية هي المجموع التراكمي. وهكذا ، فإن الماوس الذي يسجل خمسة على شريط المليمترين ولكنه يسقط من شريط الأربعة ملليمترات بعد 13 ثانية. الدرجات خمسة زائد تساوي ثمانية.
في هذا الاختبار للتنسيق الحركي ، داكنات خشبية أو قضبان متفاوتة السماكة ، 35 28 ، 22 15 ، وقطر تسعة ملليمترات يبلغ طول كل منها 60 سم مثبتة بمشبك G على رف مختبر على بعد 60 سم من الأرض. يتم عمل علامة على بعد 10 سم من النهاية بالقرب من المقعد للإشارة إلى خط النهاية. للبدء ، ضع الماوس في الطرف البعيد من القضيب الأوسع الذي يواجه بعيدا عن الرف ، سجل الوقت الذي يستغرقه لتوجيه نفسه نحو الرف وإجمالي وقت العبور.
إذا انقلب الماوس رأسا على عقب وتمسك أسفل القضيب أثناء التوجيه ، فقم بتعيينه بشكل تعسفي إلى الحد الأقصى للدرجة البالغة 120 ثانية. لا يتم اختبار على القضبان الأخرى ويتلقى قيمة عبور قصوى أيضا. إذا سقط الماوس أو وصل إلى الحد الأقصى لوقت الاختبار البالغ 120 ثانية بعد التوجيه ، فلا تختبره على قضبان أضيق.
يتم أيضا تعيين الحد الأقصى للدرجة إذا انقلب الماوس رأسا على عقب أثناء تجاوز القضيب بعد التوجيه ، أعد الماوس إلى قفص المنزل واتركه يرتاح قبل الاختبار. القضيب الأصغر التالي. ضع على قضيب أصغر كما هو موضح سابقا.
إذا سقط الماوس قبل خمس ثوان ، فاستبدله واسمح بما يصل إلى محاولتين أخريين. سجل الوقت لعكس القضيب أو حتى يسقط الماوس. لإعداد القضبان المتوازية تدعم شريطين ، طول متر واحد وقطر أربعة ملليمترات ، على بعد 30 ملم على دعامة خشبية.
أعمدة 60 سم فوق الأرض. ضع الماوس في وسط الشريطين مع محوره الطولي عموديا على القضبان. يجب أن تكون كلتا المسام الأمامية على شريط واحد مع كل من المسام الخلفية على الشريط الآخر.
التسجيل مشابه لتلك الخاصة بالقضبان الثابتة. يتم اتخاذ مقياسين في الوقت حتى يوجه الماوس 90 درجة إلى موضع البداية والوقت حتى يصل إلى أحد دعامات النهاية. وبالمثل ، يجب تحقيق التوجيه والعبور دون أن ينقلب رأسا على عقب ، وإلا يتم تخصيص الحد الأقصى للوقت.
إذا سقط قبل خمس ثوان ، فمن المحتمل أن يكون ذلك بسبب سوء وضعه ويجب إعادة اختبار. تم استخدام قضيب ثابت في الأصل لمراقبة تقدم المرض في الفئران الطافرة مع أو بدون إثراء بيئي في أقفاص منازلهم. أدى برنامج التخصيب إلى تأخير كبير في ظهور الخلل الوظيفي الحركي على القضيب ، والذي كان يوازيه تأخير في بداية الإمساك الخلفي السيئ.
أظهرت علامة عامة على الفئران المصابة بالضيافة العصبية انخفاضا في أداء القضيب الأفقي من الأسبوع 16 بعد الحقن في اختبار قضيب الدوار من الأسبوع 18 والقضبان الثابتة من الأسبوع 19 على الأقل. لم يكن لآفات الحصين أي تأثير على أي مقياس للقدرة الحركية ، ولكن 1 2 9 ثانية من الفئران SV أصيناهما بضعف بالنسبة إلى C 57 Black Six Strain على قضيب الدوار والقضبان الثابتة بعد تطوره. مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مرض هنتنغتون لدراسة آثار الإثراء البيئي في الفئران الطافرة لمرض هنتنغتون.
تقدم هذه المقالة بروتوكولات لتقييم التنسيق الحركي لدى الفئران باستخدام مهام متنوعة، بما في ذلك اختبار الروتارود (rotarod) المتسارع واختبار الشريط الأفقي. بالإضافة إلى ذلك، تقدم المقالة اختبارين تم تطويرهما مؤخراً، وهما القضبان الثابتة والقضبان المتوازية، واللذين يمكنهما تحديد القصور الحركي.
يعد تقييم التنسيق الحركي في الفئران أمراً بالغ الأهمية لتقليل المخاطر المصاحبة للتحقق من صحة الأهداف في عملية اكتشاف أدوية العلوم العصبية، مما يضمن أن الأنماط الظاهرية السلوكية المرصودة تعكس تغيرات معرفية أو عاطفية حقيقية بدلاً من أن تكون مجرد قصور حركي مربك. وتتيح الاختبارات الحركية الموحدة ثقة تنبؤية في مراحل الاكتشاف المبكرة من خلال عزل الوظيفة الحركية كمتغير مستقل، مما يدعم قرارات المضي قدماً أو التوقف في مسارات التحقق من صحة الأهداف. وتوفر هذه المقاييس استمرارية ترجمية من مرحلة الارتباط بالهدف إلى الفحص المظهري، مما يقلل من معدلات الفشل في المراحل المتأخرة الناتجة عن آثار جانبية حركية غير متوقعة.
تندرج هذه الطريقة ضمن سلسلة الاكتشاف المستمرة، بدءاً من التحقق من الهدف وصولاً إلى تحديد المركبات الرائدة ثم الفحص قبل السريري، حيث يعمل التنسيق الحركي كمرشح حاسم للمتغيرات المربكة قبل تقييم النقاط النهائية المعرفية أو العاطفية.