عد الخلايا الجذعية العصبية البشرية

الآن سأوضح لكم كيفية حساب الخلايا السليفة العصبية البشرية وستقوم بحساب خلاياك عندما تريد وضعها في الكيمياء المناعية أو عندما تريد إجراء تعداء باستخدام آلة العامل النووي. أستخدم مقياس الخلوي الدموي المتباين الطور الذي يحتوي على شبكة حافة ونستخدم أيضا صبغة تسمى الرحلة والأزرق. والصبغة مفيدة لأنها يمكن أن تفرق بين الخلايا الحية والميتة.

تمتص الخلايا الميتة أو المحتضرة هذه الصبغة وتظهر باللون الأزرق. عندما تنظر إلى الخلايا الموجودة في الدم، فإن مقياس الخلايا الخلوية والخلايا الحية قادرة على استبعاد هذه الصبغة وهم لا يظهرون باللون الأزرق. وبهذه الطريقة يمكنك تحديد جدوى الخلايا الخاصة بك لإعداد حل رحلة والأزرق والوسائط.

سأضيف 20 ميكرولترا من المصيدة والمحلول الأزرق إلى أنبوب epi سعة 0.5 مل. ثم سأضيف 25 ميكرولترا من الوسائط. بهذه الطريقة لدي الآن 45 ميكرولترا من محلول المصيدة الأزرق والوسائط بحيث عندما أضيف خمسة ميكرولترات من تعليق الخلية ، سأحصل على تخفيف من واحد إلى 10.

والآن سأضيف خمسة ميكرولترات من معلق الخلية. أولا سأتأكد من تعليق الخلايا جيدا عن طريق دوامة الأصابع. لذا أريد الآن التأكد من أن هذا الحل مختلط جيدا.

لذلك سأضع السرير لأعلى ولأسفل عدة مرات. وأخيرا سأقوم بتحميل حوالي 12 ميكرولترا من معلق الخلية هذا في مقياس الخلوي الدموي. يحتوي على منفذين ويمكنك استخدام أي منهما.

لذلك كل ما عليك فعله هو تقديم الحل في هذا المنفذ وسيتم امتصاص السائل من خلال عمل شعري. والآن أنا مستعد للعد. فيما يلي نظرة على مقياس الخلوي الدموي عند 10 x وهنا لدينا ربع يحتوي على 16 مربعا.

وكما ترون ، يمكننا أن نلاحظ هنا الخلايا الحية والميتة. هنا لدينا خلايا حية مثل هذه وهذه وهذه. ولدينا أيضا بعض الخلايا الميتة مثل هذه.

إذا لاحظت ، تظهر الخلية الميتة زرقاء داكنة ، في حين أن الخلايا الحية بها نوع من البرد حولها. لذا سأقوم الآن بحساب جميع الخلايا الحية. لذلك سأذهب من اليسار إلى اليمين ومن أعلى إلى أسفل.

1 ، 2 ، 3 ، 4 ، 5 ، 6 ، 33 ، 1 32 ، 33 ، 34 ، 3 5 ، 3 6. إذن، لدينا ثلاث خلايا ستية في هذا الربع. لذلك عندما أرى الخلايا الموجودة على الخط الحدودي للربع ، مثل هذا الخط هنا ، لكي تكون متسقة ، أحسب الخلايا الموجودة على الحد الأيسر وعلى الحد العلوي.

وأنا أحسب باستمرار الخلايا على تلك الحدود لجميع الأرباع الموجودة على مقياس الخلوي الدموي. والآن سنحسب عدد الخلايا التي لدينا لكل ميكرولتر. وللقيام بذلك سآخذ متوسط الخلايا لكل رباع، وهو 38 واضربه في 10، وهو عامل تحدده أبعاد الحجرة.

وسنضرب أيضا في 10، وهو عامل التخفيف في هذه الحالة. وفي النهاية، سنحصل على عدد الخلايا لكل ميكرولتر. في هذه الحالة لدينا 3،800 خلية لكل ميكرولتر.

وبما أننا قمنا بتعليق منصة الخلية الخاصة بنا في 500 ميكرولتر من المحلول ، يمكنك حساب عدد الخلايا الإجمالية لديك. ونحن جميعا جاهزون.