Name: الفسيولوجية والمورفولوجية وتوصيف الكيميائية العصبية من الخلايا العصبية عن طريق التضمين الحركة (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-21T11:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 4 s
Description: اكتشف تقنية تسجيل الاستجابة الفسيولوجية للخلايا العصبية أثناء الحركة مع الحفاظ على الاتصالات العصبية والمدخلات المشبكية. تُمكّن هذه الطريقة من دراسة العلاقة بين النشاط العصبي والبنية التشريحية في الثدييات.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

أشكر انتوني تايلور لتدريب أولي في داخل الخلايا الحية في تسجيل وماكسويل وبراون وديفيد للمساعدة في التطوير الأولي للتقنية تلوين داخل الخلايا. أشكر السيد فضة للمساعدة في الماكرو collocalization. كثير من العلماء الذين تعاونت أنا قدمت رؤية في تطوير هذه التقنية بما في ذلك دونجا R. ، Moritani M. ، P. لوه ، Ambalavanar ر. وقد تم تطوير هذه التقنية مع دعم كبير من المعاهد الوطنية للصحة DE10132 المنح ، وDE15386 RR017971.

<ol><li>Cuellar, C. A., Tapia, J. A., Juarez, V., Quevedo, J., Linares, P., Marinez, L., Manjarrez, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propagation+of+sinusoidal+electrical+waves+along+the+spinal+cord+during+a+fictive+motor+task%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Propagation of sinusoidal electrical waves along the spinal cord during a fictive motor task.</a> J. Neurosci. 29, 798-810 (2010).</li>
<li>Frigon, A., Gossard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+specialized+rhythm-generating+mechanisms+in+the+adult+mammalian+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Evidence for specialized rhythm-generating mechanisms in the adult mammalian spinal cord.</a> J. Neurosci. 30, 7061-7071 (2010).</li>
<li>Wang, W., Chan, S. S., Heldman, D. A., Moran, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+cortical+representation+of+hand+translation+and+rotation+during+reaching%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Motor cortical representation of hand translation and rotation during reaching.</a> J. Neurosci. 30, 958-962 (2010).</li>
<li>Ma, C., He, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+investigating+cortical+control+of+stand+and+squat+in+conscious+behavioral+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Meth%22%5BJournal%5D)">A method for investigating cortical control of stand and squat in conscious behavioral monkeys.</a> J. Neurosci. Meth. 192, 1-6 (2010).</li>
<li>Dessem, D., Donga, R., Luo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary-+and+secondary-like+jaw-muscle+spindle+afferents+have+characteristic+topographic+distributions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Primary- and secondary-like jaw-muscle spindle afferents have characteristic topographic distributions.</a> J. Neurophysiol. 77, 2925-2944 (1997).</li>
<li>Dessem, D., Moritaini, A., Ambalavanar, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nociceptive+craniofacial+muscle+primary+afferent+neurons+synapse+in+both+the+rostral+and+caudal+brain+stem%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Nociceptive craniofacial muscle primary afferent neurons synapse in both the rostral and caudal brain stem.</a> J. Neurophysiol. 98, 214-223 (2007).</li>
<li>Luo, P., Dessem, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inputs+from+identified+jaw-muscle+spindle+afferents+to+trigeminothalamic+neurons+in+the+rat%3A+a+double-labeling+study+using+retrograde+HRP+and+intracellular%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Inputs from identified jaw-muscle spindle afferents to trigeminothalamic neurons in the rat: a double-labeling study using retrograde HRP and intracellular.</a> J. Comp. Neurol. 353, 50-66 (1995).</li>
<li>Dessem, D., Luo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Jaw-muscle+spindle+afferent+feedback+to+the+cervical+spinal+cord+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Jaw-muscle spindle afferent feedback to the cervical spinal cord in the rat.</a> J. Comp. Neurol. 128, 451-459 (1999).</li>
<li>Luo, P., Wong, R., Dessem, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Projection+of+jaw-muscle+spindle+afferents+to+the+caudal+brainstem+in+rats+demonstrated+using+intracellular+biotinamide%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Projection of jaw-muscle spindle afferents to the caudal brainstem in rats demonstrated using intracellular biotinamide.</a> J. Comp. Neurol. 358, 63-78 (1995).</li>
<li>Luo, P., Dessem, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructural+anatomy+of+physiologically+identified+jaw-muscle+spindle+afferent+terminations+onto+retrogradely+labeled+jaw-elevator+motoneurons+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Ultrastructural anatomy of physiologically identified jaw-muscle spindle afferent terminations onto retrogradely labeled jaw-elevator motoneurons in the rat.</a> J. Comp. Neurol. 406, 384-401 (1999).</li>
<li>Hassani, O. K., Henny, P., Lee, M. G., Jones, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GABAergic+neurons+intermingled+with+orexin+and+MCH+neurons+in+the+lateral+hypothalamus+discharge+maximally+during+sleep%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">GABAergic neurons intermingled with orexin and MCH neurons in the lateral hypothalamus discharge maximally during sleep.</a> Eur. J. Neurosci. 32, 448-457 (2010).</li>
<li>Inokawa, H., Yamada, H., Matsumoto, N., Muranishi, M., Kimura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Juxtacellular+labeling+of+tonically+active+neurons+and+phasically+active+neurons+in+the+rat+striatum%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Juxtacellular labeling of tonically active neurons and phasically active neurons in the rat striatum.</a> Neuroscience. 168, 395-404 (2010).</li>
</ol>

وقد أجريت تجارب على الحيوانات وفقا للإرشادات والتنظيم المنصوص عليها في دليل لرعاية واستخدام حيوانات المختبرات (NIH المنشور رقم 86-23 ، منقحة 1985) وجامعة ميريلاند رعاية الحيوان واستخدام اللجنة.

يتضح الأسلوب هنا هو أسلوب القوية التي توفر نظرة متبصرة في وظيفة الخلايا العصبية واحد ، وكيف أن استجابة الخلايا العصبية الفردية يساهم في الدوائر العصبية 9 هذه المعرفة أمر أساسي لفهم الوظيفة الحسية. أعظم قوة هذا الأسلوب هو أن يسمح بتحديد عدد كبير من المعلمات حول الخلايا العصبية بما في ذلك علم وظائف الأعضاء ، والتشكل مورفولوجيا متشابك والتوزيع. عند دمجها مع تقنيات أخرى مثل وضع العلامات العصبية الوراء معلومات إضافية مثل الدارات العصبية يمكن وصفها. 7،8 وهناك ميزة ...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم كاشف أو المعدات </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th><th> تعليقات </th></tr><tr><td> الكهرومغناطيسية هزاز </td><td> لينغ الديناميكية نظم </td><td> V101 </td><td></td></tr><tr><td> إشارة مولد </td><td> نظم التغذية المرتدة </td><td> PFG605 </td><td> قادرة على انتاج رباعي إشارة الخرج </td></tr><tr><td> زجاج كهربائي </td><td> سوتر الآلات </td><td> AF100 - 68-10 </td><td> مع خيوط </td></tr><tr><td> القطب مجتذب </td><td> سوتر الآلات </td><td> طراز P - 2000 أو P - 80 </td><td></td></tr><tr><td> biotinamide </td><td> ناقلات مختبرات </td><td> SP - 1120 </td><td> المخزنة في 4 درجات مئوية </td></tr><tr><td> تكساس الأحمر أفيدين DCS </td><td> ناقلات مختبرات </td><td> A - 2016 </td><td></td></tr><tr><td> tetramethlyrhodamine </td><td> المسابر الجزيئية </td><td> D - 3308 </td><td> 3000 الوزن الجزيئي ، ليسين يمكن حلها </td></tr><tr><td> الماوس المضادة للأجسام المضادة synaptophysin </td><td> Chemicon </td><td> MAB5258 </td><td></td></tr><tr><td> الفلورسنت وصمة عار نيسل </td><td> Neurotrace ، المسابر الجزيئية </td><td> N - 21480 </td><td></td></tr><tr><td> فاحص كهربائي </td><td> ونستون إلكترونيات </td><td> BL - 1000 - B </td><td> لقياس المعاوقة الكهربائي </td></tr><tr><td> المكهار أداة </td><td> محوار الآلات </td><td> Axoprobe 1A ، 2B Axoclamp </td><td></td></tr></tbody></table>

الفسيولوجية والمورفولوجية وتوصيف الكيميائية العصبية من الخلايا العصبية عن طريق التضمين الحركة

Physiological, Morphological and Neurochemical Characterization of Neurons Modulated by Movement

دور الخلايا العصبية الفردية وظيفتها في الدوائر العصبية أمر أساسي لفهم الآليات العصبية من الوظائف الحسية والحركية. معظم التحقيقات آليات الحسية تعتمد على الفحص إما من الخلايا العصبية في حين أن الحيوان هو 1،2 ثابتة أو تسجيل نشاط الخلايا العصبية خارج الخلية أثناء الحركة. 3،4 في حين أن هذه الدراسات قد وفرت الخلفية الأساسية لوظيفة الحسية ، لأنها إما لا تقييم المعلومات الفنية والذي يحدث أثناء الحركة أو محدودة في قدرتها على تميز تماما النمط الظاهري التشريح والفيزيولوجيا والكيميائية العصبية من الخلايا العصبية. ويظهر هنا وهناك تقنية التي تسمح توصيف واسعة من الخلايا العصبية الفردية في الحركة خلال الجسم الحي. ويمكن استخدام هذه التقنية ليس فقط لدراسة الخلايا العصبية الأولية وارد ولكن أيضا لتوصيف العصبونات الحركية والحسية interneurons. في البداية يتم تسجيل رد فعل عصبون واحد باستخدام أساليب الكهربية خلال تحركات مختلفة من الفك السفلي يليها تحديد الحقل تقبلا للعصبون. ثم يتم حقن الخلايا العصبية والتتبع intracellularly في الخلايا العصبية ، ومعالجة الدماغ العصبية بحيث يمكن تصور مع المجهر الضوئي ، والإلكترون أو مبائر (الشكل 1). ومن ثم أعيد بناؤها في التشكل مفصل للعصبون تتميز بحيث يمكن ربط مورفولوجيا الخلايا العصبية مع الاستجابة الفسيولوجية للخلية عصبية (الشكلان 2،3). في هذه الاتصالات هي مفتاح تقدم تفاصيل مهمة ونصائح للتنفيذ الناجح لهذه التقنية. ويمكن تحديد قيمة للحصول على معلومات إضافية من الخلايا العصبية قيد الدراسة من خلال الجمع بين هذه الطريقة مع غيرها من التقنيات. ويمكن استخدام العلامات العصبية الوراء لتحديد الخلايا العصبية التي نهايات الخلايا العصبية المسماة ؛ تقرير مفصل وبالتالي السماح للدوائر العصبية. ويمكن الجمع بين كيمياء سيتولوجية مناعية مع هذا الأسلوب لفحص الناقلات العصبية داخل الخلايا العصبية المسماة وتحديد الظواهر الكيميائية من الخلايا العصبية مع نهايات الخلايا العصبية التي وصفت. ويمكن أيضا أن تكون الخلايا العصبية المسماة المجهزة للالمجهر الإلكتروني لتحديد ملامح التركيبية والدارات الدقيقة من الخلايا العصبية المسماة. عموما هذه التقنية هي وسيلة قوية لتوصيف دقيق خلال الخلايا العصبية في الجسم الحي الحركة مما يتيح رؤية جوهرية في دور الخلايا العصبية في الوظيفة الحسية.

يوصف تقنية لقياس استجابة فسيولوجية الجسم الحي من الخلايا العصبية في الثدييات أثناء التنقل والربط بين علم وظائف الأعضاء من الخلايا العصبية مع مورفولوجيا الخلايا العصبية ، والنمط الظاهري الكيميائية العصبية الدارات الدقيقة متشابك.

يعد دور العصبونات الفردية ووظيفتها ضمن الدوائر العصبية أمراً أساسياً لفهم الآليات العصبية للحواس والحركة...

الهدف العام من هذا الإجراء هو تسجيل الاستجابة الفسيولوجية للعصبونات المفردة أثناء الحركة، ومزيد من التوصيف للمورفولوجيا والكيمياء العصبية لهذه العصبونات. يتم تحقيق ذلك من خلال تخدير الحيوان وتحضيره جراحياً أولاً، تليها خطوة التسجيل الفيزيولوجي الكهربائي للاستجابة داخل الخلوية للعصبونات المفردة أثناء الحركة.بعد تروية الحيوان ومعالجة الدماغ، تتمثل الخطوة النهائية في تصور وتحليل الاستجابة الفسيولوجية ومورفولوجيا الخلايا العصبية. وفي النهاية، تجمع تقنيات التسجيل العصبي داخل الخلايا والكيمياء المناعية والتحليل لإظهار التعديلات في جهد الغشاء للخلايا العصبية المنفردة أثناء الحركة. وتتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية مثل زراعة الخلايا في الحفاظ على الاتصالات العصبية والمدخلات التشابكية، وعدم فصل الخلايا العصبية ذاتياً أو وضعها في أوساط اصطناعية. وفي اليوم السابق للتجربة، يتم حقن مقتفي عصبي، مثل horse radish peroxidase، في المناطق الطرفية المستهدفة لوسم الخلايا العصبية الحركية تراجعيًا.في اليوم التالي، يتم تخدير الجرذ ووضعه على وسادة تدفئة، ثم تُحلق البشرة التي تغطي الجزء الخلفي من الجمجمة باستخدام مقصات حلاقة الحيوانات مع اتباع تقنية التعقيم. يتم إجراء شق جراحي على طول الفخذ الداخلي، وإدخال كانيولا في الوريد الفخذي لإعطاء جرعات إضافية من التخدير. كما يتم إدخال كانيولا أخرى في الشريان الفخذي لمراقبة ضغط الدم.أخيراً، أدخل كانيولا في الرغامي. بعد ذلك، ضع الجرذ في إطار تجسيمي. قم بإجراء عملية فتح جمجمة للكشف عن المخيخ، مع الحرص على تجنب الجيب الوريدي الكبير الموجود مباشرة تحت الوصلة بين العظم الجداري والعظم بين الجداريين.بعد ذلك، غطِّ سطح الدماغ بزيت معدني دافئ. ثم قم بلصق الفك السفلي بقضيب متصل بهزاز كهرومغناطيسي. يتم التحكم في حركة الفك السفلي عن طريق إشارات تحكم تُرسل إلى الهزاز من مولد إشارات.ضع بعد ذلك قطب تأريض تحت الجلد بجوار فتحة القحف. وللتحضير للأقطاب الكهربائية داخل الخلوية، املأ الأقطاب الكهربائية الدقيقة بمحلول صبغة IDE أو tetraethyl rod Domine. تتراوح مقاومة هذه الأقطاب من 60 إلى 80 mega ohms للمحاور العصبية كبيرة القطر، ومن 80 إلى 150 mega ohms للمحاور الواردة الصغيرة والعصبونات البينية.بعد ذلك، ضع القطب الكهربائي الدقيق (micro electrode) في مرحلة الرأس الخاصة بمقياس الكهرومتر باستخدام تلسكوب صغير مثبت في موقعه خلف رأس الحيوان. قم بمعاينة القطب الكهربائي الدقيق عبر عدسة التلسكوب الحمراء المدمجة بقوة تكبير 20x. تقع المنطقة المستهدفة على بعد حوالي 0.5 millimeters من الحدود السفلية للأكيمة السفلية (inferior colliculus).قم الآن بعمل فتحة صغيرة في الأم الجافية للسماح بتحديد موقع سطح الدماغ بدقة. قم بزيادة تعويض تغذية السعة المرتدة بحيث يتم إنتاج إشارة تغذية مرتدة عند ملامسة القطب للدماغ. قم بدفع القطب إلى الأمام حتى يدخل في الدماغ.الخطوة التالية هي تفعيل الإزاحة المتكررة للفك السفلي. ثم، وباستخدام محرك خطوي، قم بدفع القطب الكهربائي داخل الدماغ. وعندما يشير اختراق عصبوني إلى انخفاض مفاجئ في جهد dc ونشاط مشبكي مستمر، توقف عن دفع القطب الكهربائي.عندما يُعتبر الاختراق مستقراً، ابدأ حركات الفك من نوع التدرج والتثبيت (ramp and hold) والحركات الجيبية (sinusoidal). سجل الاستجابة العصبية وقم بتصنيف العصبون بناءً على استجابته. بعد ذلك، ولرسم خريطة للمجال الاستقبالي للعصبون، استخدم مسباراً غير حاد لاستكشاف الجلد حول الرأس والتجويف داخل الفم.استكشف استجابة العصبون لمحفزات أخرى مثل انقباض العضلات أو المحفزات الضارة. عند اكتمال التسجيلات، احقن تيارًا مستمرًا (DC) يتراوح بين 1 إلى 4 nano amp، بحيث يكون إجمالي الحقن من 15 إلى 70 nano amp minutes. راقب اختراق القطب الكهربائي ثم أوقف حقن التيار.إذا أصبح جهد الغشاء أكثر إيجابية من 30- ملي فولت، فإن الخطوة التالية هي تقطيع نسيج الدماغ. بعد القتل الرحيم للحيوان وإجراء التروية، قم بإزالة الدماغ. ثم قم بقص مقاطع يتراوح سمكها بين 50 إلى 100 ميكرون في المستوى الجبهي أو السهمي أو الأفقي.لتصوير العلاقة بين العصبون الحسي المسمى ومجموعة متنوعة من العصبونات الحركية، يتم معالجة النسيج باستخدام H-R-P-D-A-B أو Texas red، وذلك حسب نوع النسيج، كما يمكن إجراء تحليلات إضافية باستخدام مجهر فلوري أو مجهر كونفوكال أو باستخدام برنامج كمي لتحليل التوضع المشترك. ويمكن، حسب الرغبة، إجراء معالجة كيميائية مناعية لبروتين synaptophysin لتحديد مواقع التشابكات العصبية بدقة داخل العصبونات المسمى. يوضح هذا الشكل عصبوناً في جذع الدماغ تم حقنه بـ IDE بعد التوصيف الفيزيولوجي الكهربائي.بناءً على الاستجابة العصبونية أثناء الحركة، يمكن تحديد هذه العصبونة على أنها عصبونة واردة ثانوية للمغازل العضلية. يشير الإطار البني إلى موقع نواة العصب ثلاثي التوائم الحركية. يوضح هذا الشكل الاستجابة الفسيولوجية لعصبونة حسية أثناء إزاحة الفك.يتم تمثيل استجابة العصبون كتردد إطلاق فوري. لاحظ أن الاستجابة تحاكي بدقة إزاحة الفك السفلي، مما يشير إلى أن هذا العصبون المحدد يوفر تغذية راجعة حسية مرتبطة بوضعية الفك السفلي. يوضح هذا الشكل عصبوناً حسياً استجاب أثناء سبر العضلات.صُبغت العصبونة بـ ide بعد المعالجة المناعية الكيميائية. تظهر العصي التشابكية على شكل تورمات حمراء متمركزة في نفس الموقع مع synaptophysin الأصفر. أما اللون الأخضر فهو صبغة فلورية.يمثل هذا الشكل رسماً متحركاً لمحور عصبي من عصبون وارد أولي للمغزل العضلي. وقد استُخدمت مقاطع بصرية متعددة للعصبون المسمى لإنشاء هذا الرسوم المتحركة. وبناءً على هذا الإجراء، يمكن تنفيذ طرق أخرى مثل المجهر الإلكتروني، والمجهر البؤري، والوسم العصبي الأمامي أو التراجعي للإجابة على أسئلة إضافية حول الخصائص التركيبية الدقيقة للعصبون، والتوطين المشترك للنواقل العصبية مع النهايات التشابكية، والاتصال العصبي.

physiological-morphological-neurochemical-characterization-neurons

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

نصف في هذا البروتوكول طريقة تتيح تصوير الميتوكوندريا في العصبونات الحية عبر المجهر الفلوري لفترات طويلة. ويتم تحقيق التصوير لفترات ممتدة من خلال التعبير عن بروتين فلوري مستهدف للميتوكوندريا بوساطة الفيروس البطيء (lentivirus)، وباستخدام حاضنة اقتصادية توضع فوق منصة المجهر تم تصميمها وبناؤها في مختبرنا.

تعديل العمليات العصبية والنقل الميتوكوندريا : تصوير مباشر في الخلايا العصبية الحصين خلال فترات طويلة

وقد حددت الدراسات التي أجريت مؤخرا العديد من الطفرات في البروتينات المرتبطة متشابك أمراض الدماغ. الابتدائية العصبونات القشرية مثقف توفر مرونة كبيرة في دراسة الآثار المترتبة على هذه البروتينات المرتبطة بمرض في العمود الفقري شجيري التشكل والحركة.

تحليل الصرف العمود الفقري شجيري الخلايا العصبية في الجهاز العصبي المركزي لؤلؤ

التشكل العصبية والهجرة هي الأحداث الحاسمة الكامنة وراء نمو الدماغ السليم. هنا، نحن تصف أساليب التلاعب وراثيا مثقف الخلايا العصبية الحبيبية للدماغ والمخيخ النامية لتقييم التشكل وخصائص المهاجرة من الخلايا العصبية.

التلاعب الجيني للمخيخي الحبيبة الخلايا العصبية<em&gt; في المختبر</em&gt; و<em&gt; في فيفو</em&gt; لدراسة مورفولوجيا الخلايا العصبية والهجرة

هذا البروتوكول يستخدم تقنيات التصوير والتحليل (3D) ثلاثي الأبعاد لتصور وتحديد حجم الميتوكوندريا العصب على حدة. التقنيات قابلة للتطبيق على حالات أخرى حيث يتم استخدام إشارة الفلورسنت واحدة لعزل مجموعة فرعية بيانات من آخر إشارة الفلورسنت.

تصوير ثلاثي الأبعاد وتحليل الميتوكوندريا داخل الألياف العصبية إينترايبيديرمال البشرية

التحقيق في الاتجار بالغشاء أمر بالغ الأهمية لفهم وظائف الخلايا العصبية. هنا، ونحن نقدم طريقة لقياس الحركة الحويصلة في الخلايا العصبية. هذا هو وسيلة مريحة التي يمكن أن تتكيف مع القياس الكمي للاتجار الغشاء في الجهاز العصبي.

كمي من إندوسوم و ليسوسوم التحركات في الخلايا العصبية المستزرعة باستخدام تحقيقات الفلورسنت

يقدم هذا البروتوكول رقمنة أجزاء من المهام السريرية التقليدية التي تستخدم عادة لقياس الإدراك والتحكم الحركي في مرض باركنسون. يتم رقمنة المهام السريرية في حين يتم تسجيل الإيقاعات البيوفيزيائية بشكل مشترك من مستويات وظيفية مختلفة من الجهاز العصبي، تتراوح بين الطوعية، عفوية، التلقائي إلى اللاإرادي.

المؤشرات الحيوية الرقمية الديناميكية للوظائف الحركية والمعرفية في مرض باركنسون

ويشارك ضعف نقل الميتوكوندريا ومورفولوجيا في مختلف الأمراض العصبية التنكسية. يستخدم البروتوكول المقدم الخلايا العصبية الجذعية المشتقة من الخلايا الجذعية المستحثة لتقييم نقل الميتوكوندريا والمورفولوجيا في الشلل النصفي التشنجي الوراثي. يسمح هذا البروتوكول بتوصيف الاتجار بالميتوكوندريا على طول المحاور وتحليل مورفولوجيا ها ، مما سيسهل دراسة الأمراض العصبية.

تحليل نقل الميتوكوندريا ومورفولوجيا في الخلايا العصبية الجذعية المستحثة البشرية متعددة القدرات المشتقة من الخلايا الجذعية في الشلل النصفي التشنجي الوراثي

العين رصد حركة (أو تتبع العين) حيث يكشف في الفضاء أعين إغلاقه ، متى وإلى متى. هنا ، علينا أن نظهر كيف يمكن استخدام تتبع العين للتحقيق في سلامة السكان المشاركين في ذاكرة متعددة ، دون الحاجة إلى تقارير شفهية ، صريحة أو خلاف ذلك.

رصد حركة العين من الذاكرة

تأثير انعدام الوزن والجاذبية المفرطة في كلتا العمليتين الدورة الدموية والكهربية في الدماغ ستكون اتباعها أثناء الرحلة مكافئ بواسطة تقنيات EEG وتقرير الجرد الوطني. دراسة جدوى لتجربة أكثر تعقيدا ، وهو ما خططت للقيام بها خلال الرحلة الفضائية المتوسطة والطويلة الأجل.

الترابط بين وظائف الدماغ القشرية وأداء عصبي خلال تغيير شروط الجاذبية

نصف هنا إجراءً سريعاً وموثوقاً وبسيطاً لتحديد أدنى درجة حرارة تظهر عندها الجرذان أو الفئران سلوكاً دفاعياً ضد الألم، أي أنَّ الـ عتبة استقبال الألم الحراري (TNT). وتعتمد هذه الطريقة على تطبيق محفز حراري يتزايد ببطء، مما يسمح بتقدير عتبات سحب الذيل بدقة وقابلية للتكرار، مع الحد الأدنى من الإجهاد الذي قد تتعرض له الحيوانات، إن وجد.

سريع تحديد العتبة Nociceptive الحرارية في الفئران المصابة بمرض السكر

اكتشف تقنية تسجيل الاستجابة الفسيولوجية للخلايا العصبية أثناء الحركة مع الحفاظ على الاتصالات العصبية والمدخلات المشبكية. تُمكّن هذه الطريقة من دراسة العلاقة بين النشاط العصبي والبنية التشريحية في الثدييات.

الفسيولوجية والمورفولوجية وتوصيف الكيميائية العصبية من الخلايا العصبية عن طريق التضمين الحركة

استكشف المزيد من الفيديوهات