استهداف الجسيمات النانوية الوظيفية لسرطان المبيض: تقنية لتسهيل امتصاص عامل تباين الجسيمات النانوية المترافق بحمض الفوليك بواسطة خلايا سرطان المبيض

مستقبلات حمض الفوليك هي بروتينات سكرية مرتبطة بالغشاء تعبر عنها غالبية خلايا سرطان المبيض. يسمح استغلال هذه المستقبلات بالتوصيل المستهدف للجسيمات النانوية التشخيصية إلى الخلايا السرطانية.

ابدأ بتعليق عامل تباين الجسيمات النانوية المغطى بحمض الفوليك المطلوب. أضف تعليق الجسيمات النانوية هذا إلى ثقافة ملتصقة لخلايا سرطان المبيض. احتضان الثقافة للفترة الزمنية المطلوبة.

حمض الفوليك الذي يعمل على الجسيمات النانوية في التعرف على مستقبلات حمض الفوليك المعبر عنها في الخلايا السرطانية ، مما يعزز الارتباط الانتقائي لاقتران الجسيمات النانوية مع الخلايا. بعد ذلك ، يغزو غشاء البلازما ، مما يسهل الامتصاص الخلوي وتراكم الجسيمات النانوية.

حصاد الخلايا السرطانية. بعد ذلك ، جهاز الطرد المركزي لفصل الخلايا عن المادة الطافية التي تحتوي على أي جسيمات نانوية غير مرتبطة. تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الخلايا الحاملة للجسيمات النانوية في مخزن مؤقت مناسب للتطبيقات النهائية.

أولا ، قم بخلط جزيئات كبريتيد النحاس النانوية المغطاة بحمض الفوليك بالتركيز المناسب في وسائط RPMI الطازجة. أضف محلول الجسيمات النانوية هذا إلى كل بئر من الصفيحة المحضرة المكونة من 24 بئرا والتي تحتوي على خلايا SKOV-3 بتركيز 400 ميكروغرام لكل ملليلتر. احتضان عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون لمدة ساعتين.

بعد ذلك ، قم بتربسين الخلايا باستخدام 0.5 مل من 0.25٪ تريبسين و EDTA. لتحييد التربسين ، أضف ما لا يقل عن 1 ملليلتر من وسائط النمو الكاملة الخالية من حمض الفوليك RPMI 1640 وقم بالطرد المركزي للخلايا عند 123 × جم لمدة ست دقائق. لغسل الخلايا ، قم بإزالة المادة الطافية.

أعد تعليق الخلايا في 2 مل من PBS وأجهزة الطرد المركزي عند 123 × جم لمدة ست دقائق. كرر خطوة الغسيل هذه مرتين لإزالة أي جزيئات نانوية غير مرتبطة.

بعد ذلك ، أعد تعليق الخلايا ب 1 إلى 2 ملليلتر من محلول توين بنسبة 2٪ في PBS. عد الخلايا باستخدام مقياس كثافة الدم و Trypan Blue. تمييع الخلايا في محلول 2٪ توين و PBS إلى التركيز المختار للكشف.

• Nanoparticle Targeting - The specific delivery of nanoparticles to diseased cells (e.g., cancer cells).
• Ovarian Cancer - A cancer type with a high number of folate receptor cells.
• Folate Receptors - Overexpressed on the surface of cancer cells and attract folic acid conjugates.
• Folic Acid Nanoformulations - Diagnostic nanoparticles functionalized with folic acid to target cancer cells.
• F2442-500ML - Nanoparticle suspension for cancer cell research and detection.

• Introduce Nanoparticle Targeting - Specific application in the detection and treatment of ovarian cancer (e.g., using folic acid conjugates).
• Key Concepts - Folate receptors on ovarian cancer cells bind to folic acid nanoformulations (e.g., theory of selective cell targeting).
• Underlying Mechanisms - Cancer cell membranes invaginate after nanoparticle binding, facilitating cellular uptake.
• Connect to Experiment - After incubation and centrifugation, targeted nanoparticles remain in the cells, ready for analysis.

• What is nanoparticle targeting and how is it used in ovarian cancer detection?
• What is the role of folate receptors in targeting nanoparticles to cancer cells?
• How does the process of invagination contribute to the uptake of nanoparticles by cancer cells?

• Describe Practical Applications - Targeted nanoparticle use in diagnostic and therapeutic oncology (e.g., ovarian cancer detection).
• Industry Impact - Advances in medical diagnostics and targeted therapeutics (e.g., in the healthcare sector).
• Societal Importance - Improved early detection and treatment options for cancer patients (e.g., enhanced patient care).
• Link to Scientific Advancements - The development of more efficient and precise cancer detection and treatment methods.