موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:02 دقيقة • April 30th, 2023
لتفريغ وغسل المثانة البولية للفأر ، ابدأ بأخذ أنثى فأرة مخدرة في وضع الاستلقاء. بعد ذلك ، احصل على قسطرة بحجم مناسب. قم بتليين طرف القسطرة لتقليل الاحتكاك وضمان إدخال مجرى البول بسلاسة. بعد ذلك ، أدخل القسطرة المشحمة ببطء وبلطف ، ومررها عبر فتحة مجرى البول ، في المثانة.
عند نجاح القسطرة ، يبدأ البول في التصريف من المثانة إلى القسطرة. الآن ، أفرغ القسطرة المملوءة بالبول. باستخدام ماصة، أضف محلول ملحي مناسب إلى الطرف الخارجي للقسطرة بينما يكون طرفها المقابل داخل المثانة. إلى الطرف الخارجي للقسطرة ، ثم قم بتوصيل حقنة. ادفع المحقنة برفق لتوصيل المحلول الملحي إلى المثانة.
الآن ، قم بإزالة المحقنة. اسمح للمحلول الملحي ، جنبا إلى جنب مع البول المتبقي ، بالتصريف من المثانة من خلال القسطرة. بعد ذلك ، قم بإخلاء البول المتبقي الممزوج بالمحلول الملحي من القسطرة. كرر غسل المثانة بالمحلول الملحي مرتين لضمان الإزالة الكاملة للبول من المثانة. أصبح الماوس الجاهز جاهزا أخيرا لمزيد من الإجراءات التجريبية.
لبدء هذا الإجراء ، قم بالتعقيم لجميع الأدوات الجراحية وتعقيم مساحة العمل بنسبة 70٪ من الإيثانول. رش الأدوات الجراحية والقفازات بنسبة 70٪ من الإيثانول بشكل متكرر عند إجراء الإجراءات اللاحقة للحفاظ على الظروف المعقمة.
للبدء ، قم بتخدير الفأر وحلق منطقة الجراحة. لاستنفاد البول ، ضع مادة التشحيم على القسطرة وتأكد من تغطية سطحها الخارجي بالكامل. بعد ذلك ، أدخل القسطرة في فتحة مجرى البول للفأر وادفعها ببطء حتى تصل إلى المثانة. اضغط برفق على البطن للمساعدة في استنفاد البول.
بعد ذلك ، تخلص من البول بماصة في دورق نفايات. بعد ذلك، قم بإدخال 80 ميكرولترا من PBS في الطرف الخارجي للقسطرة مع بقاء الطرف الآخر في المثانة. بعد ذلك ، قم بتوصيل حقنة سعة 1 مليلتر بعناية بالقسطرة. ادفع المحقنة برفق لحقن PBS في المثانة.
اترك بعض PBS في القسطرة لتجنب تكوين فقاعات هواء في المثانة. بعد ذلك ، قم بإزالة المحقنة وانتظر حتى يتم تصريف PBS من المثانة. اضغط برفق على البطن لإخلاء PBS. بعد ذلك ، تخلص من PBS في القسطرة مع الماصة في دورق النفايات. كرر غسل PBS مرتين أخريين.