تلطيخ الحمض الدوري أو PAS: طريقة لتقييم التشوهات الهيكلية للكبيبات

الكبيبة عبارة عن شبكة معقدة من الشعيرات الدموية داخل الكلى تقوم بتصفية الفضلات وإزالة السوائل الزائدة من الدم. يعتمد معدل الترشيح الكلوي على هذا الهيكل المتخصص ، والذي يمكن فحصه باستخدام صبغة Periodic Acid Schiff أو PAS.

للبدء ، خذ قسما من قشرة الكلى البارافين على شريحة زجاجية. عالج الشريحة مع الزيلين. تعمل جزيئات الزيلين على إذابة شمع البارافين من قسم الأنسجة. بعد ذلك ، قم بتعريض العينة لتركيزات متناقصة من الكحول. يزيل الكحول آثار الزيلين أثناء إعادة ترطيب قسم الأنسجة لربط البقعة لاحقا.

الآن ، أضف الحمض الدوري إلى العينة. يحول الحمض الدوري الديولات الموجودة في السكريات الأنسجية ، مثل الجليكوجين أو الميوسين ، إلى ألدهيدات. تتفاعل هذه الألدهيدات مع كاشف شيف ، وهو مزيج من حمض الفوشين والكبريت ، ويشكل صبغة أرجوانية اللون تلطخ قسم الأنسجة. اشطف الشريحة لإزالة البقع الزائدة.

بعد الشطف ، أضف الحديد الهيماتوكسيلين ، وهو بقعة نواوية مرتبطة بالحمض النووي وتلطخه باللون الأرجواني. يغسل لإزالة البقع الزائدة. أخيرا ، قم بتجفيف العينة بقوة متزايدة من الكحول متبوعا بالزيلين ، الذي يعمل كعامل تطهير. تساعد هذه الخطوة على تحسين تباين قسم الأنسجة للفحص المجهري.

يمكن تصور المرض الكبيبي على أنه سماكة الغشاء القاعدي ، والشعيرات الدموية المتغيرة ، والخلايا غير الطبيعية التي تتعلق بضعف وظائف الكلى.

للتصور التفصيلي للخلايا الكبيبية والمصفوفة المتوسطة ، جفف عينات قشرة الكلى الثابتة المضمنة في البارافين عند 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة ، متبوعا بإزالة البارافين مع غمر الزيلين المتتالي والإيثانول التنازلي. أعد ترطيب العينات في الماء المقطر لمدة 5 دقائق واحتضان الشرائح في محلول الحمض الدوري في خزانة الدخان.

بعد 5 دقائق ، اشطف الشرائح بثلاث غسلات لمدة 5 دقائق في 100 مل من الماء المقطر ، تليها حضانة لمدة 15 دقيقة في كاشف شيف. في نهاية الحضانة ، اغسل الشرائح في ماء الصنبور الجاري لمدة 5 دقائق وقم بمضاد البقع باستخدام الهيماتوكسيلين لمدة 3 ثوان قبل شطفها جيدا في ماء الصنبور الجاري لمدة 15 دقيقة أخرى.

بعد ذلك ، قم بتجفيف الشرائح بغمر الإيثانول التصاعدي وغمرين متتاليين من الزيلين لمدة 3 دقائق. بعد تجفيف الهواء ، يمكن تركيب الشرائح بوسيط تركيب قائم على الزيلين لتقييم هيكلها الكبيبي على مجهر ضوئي بتكبير 400X.

• Periodic Acid Schiff Stain - Method used to visualize glomerular cells and the mesangial matrix.
• PAS Stain Glomerulus - Specific application of PAS stain in kidney cortex study.
• Acid Schiff Staining - Another name for the PAS staining process.
• Periodic Acid Structure - Part of PAS stain, involved in revealing cellular structure in staining.
• Glomerular Tuft - Structure in kidney cortex, analyzed using PAS stain.

• Periodic Acid Schiff Stain - Define and contextualize (e.g., periodic acid schiff stain).
• Key Concepts - Summarize principles (e.g., staining theory).
• Underlying Mechanisms - Short description of PAS staining process.
• Connect to Experiment - Brief rationale linking periodic acid and schiff reagent to kidney cortex sample study.

• What is the Periodic Acid Schiff Stain method and how it contributes to kidney cortex research?
• How does the PAS staining process work?
• What is the role of the Glomerular Tuft in PAS staining?

• Describe Practical Applications - PAS stain used for analyzing kidney structures (e.g., medical diagnosis).
• Industry Impact - Benefits healthcare, particularly nephrology.
• Societal Importance - Enables better understanding of kidney diseases (e.g., education).
• Link to Scientific Advancements - Short description of innovations in staining techniques.