الحقن المجهري لجنين البعوض: تقنية لتوصيل الحمض النووي الخارجي إلى صفار الجنين من Anopheles Gambiae لتوليد طفرات السلالة الجرثومية
موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 3:12 دقيقة • July 8th, 2025
لحقن الحمض النووي الخارجي في جنين الأنوفيليس ، خذ العدد المطلوب من بيض البعوض الذي تم حصاده حديثا ، قبل الأريمة الأريمة. في هذه المرحلة المبكرة من النمو ، تحتوي البويضة على نوى دون تكوين هياكل خلوية.
ضع البيض على شكل قارب على محيط ورق نشاف رطب موجود على سطح شريحة زجاجية. تضمن هذه الخطوة ترطيبا كافيا للجنين لسهولة الحقن في الخطوات اللاحقة. قم بمحاذاة البويضات المجاورة لبعضها البعض مع تعرض سطحها البطني للخارج.
الآن ، خذ إبرة حقن مجهرية ضيقة التجويف تحتوي على محلول البلازميد المطلوب. استخدم مجهر تشريح لوضع الإبرة بالقرب من القطب الخلفي للبويضة - وهو موقع لسلائف الخلايا الجرثومية. أدخل الإبرة بزاوية مناسبة تخترق الإجبار الخارجي - الطبقة الخارجية - والداخلية - طبقة داخلية من قشر البيض - تصل في النهاية إلى الجنين.
حقن مزيج البلازميد في صفار الجنين. اسحب الإبرة برفق واترك البيض ينمو في ظل ظروف مناسبة. مع نمو البويضة ، تهاجر بعض النوى إلى القطب الخلفي ، حيث يمكنها دمج الحمض النووي المحقون بالدقيقة. تصبح هذه النوى فيما بعد الأمشاج - الخلايا الجنسية التي يمكن أن تؤدي إلى طفرات جرثومية وراثية.
تصور البعوض البالغ للنمط الظاهري المتحول - الخصائص التي يمكن ملاحظتها في الأجيال اللاحقة التي تؤكد نجاح الحقن المجهري.
استخدم طرف محمل دقيق لملء الإبر بميكرولتر من خليط الحمض النووي. أدخل الإبرة في حامل
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية