الرحلان الكهربائي الشعري لتقارب تحول الحركة: طريقة لتحليل تفاعلات العينة والترابط اعتمادا على الهجرة التفاضلية لمجمعات البروتين والترابط

ترتبط الروابط ، مثل أيونات المعادن ، بشكل غير تساهمي ببروتين معين ، وتشكل مركبا أيونيا من البروتين والمعدن. يغير هذا الارتباط الشحنة الإجمالية للبروتين ، مما يسمح بتوصيف هذه المجمعات باستخدام الرحلان الكهربائي الشعري للتقارب.

للبدء ، خذ شعيرات دموية زجاجية رقيقة ومكيفة مسبقا مع مجموعات سيلانول مشحونة على السطح الداخلي. اشطف الشعيرات الدموية بمحلول EDTA. EDTA هو عامل مخلب يزيل أي شوائب أيونية معدنية. الآن ، قم بحقن محلول العينة الذي يحتوي على البروتين المطلوب في الشعيرات الدموية من نهايته الموجبة أو الأنود.

قم بتطبيق جهد عال لإنشاء تدفق كهربائي تناضحي ، مما يجبر البروتينات في شكلها الأصلي مع الشحنات الكامنة على التحرك داخل الشعيرات الدموية باتجاه الكاثود. سجل نمط هجرة البروتينات غير المرتبطة من الشعيرات الدموية.

بعد ذلك ، أدخل محلول ربط محدد في الشعيرات الدموية مع عينات البروتين ، وقم بتطبيق نفس الجهد. داخل الشعيرات الدموية ، ترتبط جزيئات الترابط بشكل غير تساهمي بالبروتين المستهدف ، وتشكل مجمعات.

يؤدي هذا إلى تغيير توافقي في البروتينات ، مما يؤدي إلى تغيير في شحناتها المتأصلة ، مما يؤثر على نسبة الشحنة إلى الحجم. تعدل هذه التغييرات تفاعلاتها مع السطح المشحون للشعيرات الدموية ، مما يؤدي إلى تدفقها بشكل مختلف مقارنة بالبروتين غير المرتبط.

سجل هذه التغييرات في الحركة الكهربية ، والتي ت