October 1st, 2007
وقد سمح لسهولة الوصول لجنين لاجراء تجارب على خارطة مصائر الخلايا باستخدام أساليب عدة ، بما في ذلك فرخ السمان الوهم والتنسيق العلامات صباغة. في هذه المقالة أسلوب واحد نبدي استعدادا البيض الذي تم الأمثل لأوقات طويلة البقاء على قيد الحياة.
مرحبا بكم في مختبر كرامر. أنا مات كورن ، قسم علم الأعصاب والسلوك في جامعة كاليفورنيا إيرفين. سأوضح لك اليوم كيفية تحضير بيض الدجاج لمجموعة متنوعة من التلاعب ، بما في ذلك وضع الخرز أو حقن الأصباغ أو استكشاف البيضا.
لذلك دون مزيد من اللغط ، دعنا نبدأ. حسنا ، سنمضي قدما وننظف البيضة. السبب هو أن هناك الكثير من الأشياء التي يمكن وضعها في الحاضنة.
سنقوم بإغلاق هذا بشريط لاصق. لا نريد أي أجزاء صغيرة تتجول في المكان الذي ستحصل فيه النافذة على البويضة وتزيد من فرصة موت الجنين بحلول الوقت الذي نريد إخراجه. لذلك إذا رأيت من الحاضنة ، فإن البيض يجلس مع الجانب الكبير متجها لأعلى.
لذا ما سنفعله هو أننا سنمضي قدما ونأخذ البيضة ونحولها إلى الجانب. وهذا سيفعل شيئين. أولا، نافذتنا ستكون هنا، وثانيا، يجب أن يطفو الجنين إلى الأعلى حتى نتمكن من إجراء أي نوع من التلاعب.
لذلك سأقوم بوضع القليل هنا من الرف الذي كان في الحاضنة إلى حامل بيض من الورق المقوى. هذه هي في الواقع القطعة التي تأتي في الصندوق عند تسليم البيض. لذلك لهذا اليوم ، سنمضي قدما ونستخدمها فقط لحمل البيض.
الآن الترتيب متروك لك. أحب أن أفعل ذلك بهذه الطريقة لأنه يمكنني الوصول إلى جميع البيض في أي وقت ولا يلمس أي منهم بعضهم البعض. في حال وجدت واحدة فضفاضة بها صدع وكنت سأسقطها ، فلديهم جميعا مساحة صغيرة من بعضهم البعض.
لذلك سأمضي قدما وآخذ شاشي هنا وأخرج كومة لطيفة مثل هذه وأقسمها إلى قسمين. سأتناول 70٪ من الكحول هنا وسأملأه حتى أشعر بنوع من رطوبة القاع. وهذا لأنني سأستخدم هذه المكدس بأكمله لمسح كل البيض.
لذا سأقوم بعد ذلك بإخراج زوجين من الأعلى ، والمضي قدما والقيام بالجزء العلوي حقا ولكن في الواقع تقريبا الالتفاف حول البيضة بأكملها هنا. وبعد الانتهاء من ذلك ، يجف الكحول بسرعة كبيرة وبعد ذلك يمكننا المضي قدما ووضع شريط لاصق عليه. سوف يلتصق الشريط بشكل جيد وبحلول الوقت الذي أنتهي فيه من المجموعة ، عادة ما يكون الشريط الأول جافا ويمكننا المتابعة إلى الخطوة التالية في تحضير البيض.
لذا مرة أخرى ، ضع ذلك مرة أخرى في سلة المهملات ونحن على استعداد للذهاب إلى الخطوة التالية. حسنا ، والآن بعد أن تم مسح كل بيضنا بالكحول ، يمكننا المضي قدما وعمل فتحة تصريف على الجانب الكبير من البيضة ، قاعدة البيضة. وهذا سيسمح لنا بالدخول واستخراج بعض الألبومين لأنه إذا لم نستخرج الألبومين ، فلن يجلس الجنين بشكل صحيح.
لا يمكننا إجراء أي تلاعب. لذلك هذا ينطوي فقط على أخذ شفرة وأخذ هذا الشريط البلاستيكي. إنه قليل من المرونة ، وهو أمر رائع.
لا يسمح لنا فقط بالتمدد فوق حفرة إذا كانت أكبر قليلا مما نرغب ، ولكن عندما نغطي البيضة بأكملها ، سنحتاج إلى تمديد هذا. لذا فإن المنطقة التي ستكون فيها النافذة مغطاة بالكامل. لذلك سأمضي قدما وأقطع القطعة بهذه الطريقة ثم أقوم بعمل شريط ملليمتر تقريبا.
ومن هذا يمكنني أن أصنع حوالي ملليمتر مربع من الشريط. وبعد ذلك ، سأمضي قدما وأضعه فوق يسار التاريخ مباشرة. فقط ضعه هناك ويمكنك رؤيته.
إنه ملتصق بشكل جيد للغاية. ثم يمكنني العودة إلى الشريط الذي صنعته بالفعل ، وقطع قطعة أخرى من الشريط اللاصق. ومرة أخرى ، ضعه على يسار الرقم هناك ، وهو في الواقع الجزء العلوي من البيضة.
الآن بعد أن قلبناها جانبا ، فهي إلى اليمين. وقطعة أخرى هنا. الآن أنا لا أرتدي قفازات لأن ارتداء القفازات سيجعل هذا الشريط يلتصق بالقفازات وقد غسلت يدي.
لست قلقا حقا بشأن أي شيء آخر يلوث النشط في هذه المرحلة. لذلك سأمضي قدما وآخذ مقصا مع النقطة الحادة. سأذهب إلى وسط المكان الذي وضعت فيه الشريط وسأقوم فقط بتدويره في حركة عكس اتجاه عقارب الساعة حتى أملأه قليلا
وسترى أن هناك ثقبا صغيرا هناك. الآن لا يجب أن يكون الثقب كبيرا جدا لأنه بمجرد أن نحصل على هذه المحقنة هناك ، ستجعل الثقب كبيرا بما يكفي. لكن هذا حتى لا نذهب مباشرة بإبرة ونحاول كسر البيضة بذلك لأنه في كثير من الأحيان سيؤدي ذلك إلى تفكك الجانب الكامل من البيضة.
ثم لا يمكننا استخدام البيضة بعد الآن. حسنا ، الآن سأمضي قدما وأجف البيضة. لدينا هذا الثقب الصغير اللطيف على الجانب وسأستخدم هذه المحقنة سعة 10 ملليلتر وإبرة قياس كبيرة إلى حد ما للمضي قدما واستخراج الألبومين.
الآن أريد حوالي ثلاثة أو أربعة ملليلترات ، بالتأكيد أكثر من ثلاثة ، وليس أكثر من أربعة ونصف أو خمسة. سيسمح ذلك لجنينا الذي يجلس الآن في الأعلى بالسقوط بعيدا قليلا عن القشرة. وبعد ذلك سنكون قادرين على القيام بعمليات التلاعب الخاصة بنا.
لذلك بالدخول بزاوية 45 درجة ، أكون تحت صفار البيض. وبعد ذلك أريد فقط أن أديرها قليلا إلى يميني فقط للتسلل إلى هناك ويمكنك أن تشعر نوعا ما بطرف الإبرة وهو يلامس قاع البيضة. وسأمضي قدما وأستخرج حوالي ثلاثة أو أربعة فقط ويخرج بشكل جيد جدا.
سأمضي قدما وأضع هذا الألبومين في دلو الخصر هنا والآن يمكنني الاستمرار في تناول البيض الآخر. حسنا ، سأمضي قدما وأستمر. وسترى هنا أن الثقب الذي قمت بإنشائه للتصريف أكبر قليلا مما أريد ، لكن اتضح أن هذا على ما يرام.
ما أريد أن أقلق بشأنه هو أنني عندما ألصق الإبرة في ذلك لم أعد أكسرها. لذلك سأمضي قدما وأفعل ذلك. حسنا ، أستطيع أن أرى بالفعل أن البيضة بها القليل من الكراك.
الآن الشقوق الصغيرة على ما يرام ، لكن عليك أن تقلق عندما تمتد إلى مستوى آخر من البيضة. وفي هذه الحالة يفعل ذلك. يمكنك أن ترى ذلك من الحفرة.
يمتد إلى حد كبير إلى الأعلى. وفي الواقع ، هذا هو المكان الذي ستجلس فيه نافذتنا. لذا لسوء الحظ بالنسبة لهذه البيضة ، سنضطر إلى التخلص من هذه البيضة.
ولا يوجد شيء مميز في التخلص منه. لست بحاجة إلى كتابة بروتوكول معين أو أي شيء. فقط سأمضي قدما وأضعها في دلو النفايات.
نستخدم علب القمامة السوداء هذه لتصنيفها على أنها نفايات حيوانية ، ولكن بخلاف ذلك ، فقد تم الاعتناء بها بالفعل. يمكننا الانتقال إلى البيضة التالية. حسنا ، الآن بعد أن قمنا بتصريف كل بيضنا ، يمكننا المضي قدما وتغطية فتحة التصريف.
الآن هذا مهم لأنه إذا لم نقم بداخل الحاضنة ، يمكننا الحصول على تبخر هائل لكل ما تبقى من الألبومين. ثم البيضة الجافة هي بيضة ميتة. لذلك سنمضي قدما ونأخذ نفس حجم الشريط تقريبا ونضعه فوق الحفرة ولا داعي للقلق بشأن الدخول إلى هذه الحفرة مرة أخرى.
في بعض الحالات ، إذا قررت أنك ترغب في محاولة تصريف المزيد من الألبومين من البيضة ، فبمجرد فتحها ، يعمل هذا الثقب كمنطقة محكمة الغلق يمكنك بعد ذلك إدخال إبرة فيها ولن تفقد الكثير من الألبومين. حسنا ، أليس كذلك؟ حسنا ، سنمضي قدما الآن ونغطي البيض بقطعة رقيقة من الشريط اللاصق.
وأنا أشبه هذا نوعا ما بوضع قطعة من الشريط اللاصق على بالون قبل وضع دبوس صغير فيه. الشيء الرائع هو أن البالون لا ينفجر وفي هذه الحالة شريط صغير فوق البيضة. لا تتشقق البيضة في أماكن متعددة ومن ثم يمكن إغلاق النافذة ثم عندما تغلق النافذة ، لأننا استخدمناها لشريط لاصق ، فإنها تخلق نوعا ما ختما صغيرا لطيفا ولا داعي للقلق بشأن أي تبخر.
لذلك يمكنك أن ترى حجم الشريط ، ربما يكون أكبر ما قمت بقصه حتى الآن ، ولكن حتى ذلك الحين سأمضي قدما وأمده قليلا وأسحبه حقا ، قليلا من التوتر هناك وأضعه فوق البيضة. وسأقوم بالالتفاف حول الخلف هنا وأمده بحذر شديد فوق البيضة حتى لا تكون هناك تجاعيد فوق المكان الذي ستكون فيه نافذتي. ويمكنك إعادة ضبط الشريط قليلا.
إنه لا يلتصق كثيرا بدرجة ما يجب أن تقلق بشأنه. بمجرد أن يعلق ، فإنه عالق. ويمكنك أن ترى هذه المنطقة العامة هنا حيث سأمضي قدما وأقطع النافذة.
حسنا، والآن بعد أن أصبح لدينا شريط لاصق على كل البيض، يمكننا المضي قدما وقطع نافذة في الأعلى. قد يكون هذا هو الجزء الأصعب وغالبا ما يكون هذا هو المكان الذي ستفقد فيه غالبية بويضاتك. لذلك سأمضي قدما وأمسح جيدا مقصي بشاش يحتوي على كحول ثم أمضي قدما وأجففه فقط.
يجف الكحول إلى حد كبير من تلقاء نفسه ، لكنك لا تريد أن يدخل الكحول مباشرة إلى البيضة. لذا سأذهب إلى منتصف مكان الشريط ومرة أخرى ، استخدم حركة عقارب الساعة عكس اتجاه عقارب الساعة حتى أسمعها تتصدع قليلا. وبعد ذلك أعرف أن نصلي في الداخل.
وبعد ذلك أريد نوعا ما تحريك مقصي للخارج بحيث يكون مسطحا تقريبا على سطح البيضة. ثم قم بعمل قصاصات صغيرة حتى أتمكن من الحصول على قطعة المقص بأكملها هناك. وسأعود في الاتجاه الآخر بمجرد أن أجعلها حوالي نصف دائرة ولا أريد إكمال الدائرة لأنني أريد نافذة ، ولكن بعد ذلك يمكنني المضي قدما وفتح البيضة.
والآن يبدو أن هناك حوالي العمر الذي كنت أتوقعه ، ليس لديهم الكثير من الأوعية الدموية ، ولكن هناك القليل من الدم حول المكان الذي يجلس فيه الجنين بشكل أساسي من منطقة الوهم التي بدأ فيها الدم الآن واختفت ضربات القلب. لذلك سأغلق ذلك فقط ، فقط اتركه يجلس في الأعلى هكذا ويأتي مرة أخرى وسأمضي قدما وأغلق النوافذ. ومرة أخرى ، فقط ، فقط مسطحة على السطح والعودة في الاتجاه الآخر.
حسنا ، لدينا فقاعتان هنا واتضح أن الجنين بعيد عن الجانب. الآن هناك شيئان يمكننا القيام بهما الآن. إذا كان لدينا الكثير من البيض ولم نكن قلقين بشأن استخدام كل واحدة ، فيمكننا المضي قدما ورمي هذا.
أو ما يمكننا فعله هو أن نغلق النافذة ونضبطها بحيث يطفو الجنين نوعا ما إلى الأعلى حيث نريدها مرة أخرى. وبحلول الوقت الذي نصل فيه إلى ذلك في تلاعبنا ، قد يكون المكان الذي نريده فيه. إذا لم يكن الأمر كذلك ، فيمكننا التخلص منه في ذلك الوقت.
لذا ما فعلته هنا هو ضبطه بزاوية. سيكون لديك القليل من جريان الألبومين ، لكنه سيساعد هذا الجنين على العودة إلى حيث يجب أن يكون. حسنا ، والآن بعد أن أصبح لدينا كل هذه النوافذ ، نحتاج إلى التأكد من أنها مغلقة ونريدها فقط إغلاقها قبل إجراء أي تلاعب.
وبعد ذلك يمكننا المضي قدما وإعادة إغلاق البيضة. ولكن إذا كانت لدينا نافذة مفتوحة ، فقد ينزلق النير في بعض الأحيان. إذا كنت تعرف أن البيضة تميل قليلا عندما تمشي من غرفة إلى أخرى ، فأنت لا تريد أن يسقط كل شيء.
لذا كل ما أفعله هو قطع ملليمتر آخر بطول ، أو آسف ، بعرض ملليمتر ، ربما حوالي ثلاثة أو ملليمترين أو ثلاثة ملم وطول قطعة من الشريط البلاستيكي. وأود نوعا ما أن أضعها هناك في المنتصف. وإذا كان بإمكاني سحبها لأسفل أمام البيضة ، فهذا يجعلها مشدودة نوعا ما.
ويمكنك أن ترى أين تناسبها النافذة، حيث كان الشريط الآخر، حيث قمنا بقص النافذة وجعلها مغلقة جدا لهذا الوقت. أعني ، سنمضي قدما ونقوم ببعض التلاعب في دقيقة واحدة فقط ، لذلك لا يلزم أن يكون محكم الإغلاق تماما. هذه هي الطريقة التي تحضر بها بيضك وتنظفه.
حظا سعيدا في تجاربك.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
تتناول هذه المقالة طريقة لتحضير بيض الدجاج لعمليات معالجة مختلفة في التجارب البيولوجية العصبية. تم تحسين التقنية لأوقات بقاء طويلة، مما يسهل الدراسات حول رسم خرائط مصير الخلايا.
This method enables reliable access to chicken embryos for developmental studies, supporting target validation in neurobiology research. By optimizing survival times through a simple windowing technique, it reduces experimental variability and improves data consistency for mechanistic studies. The approach facilitates early-stage hypothesis testing in a disease-relevant system, enhancing predictive confidence in target engagement and pathway modulation.
The method fits within the early discovery continuum, supporting hypothesis generation and mechanistic exploration before lead identification. It enables reproducible preparation of embryos for downstream applications in screening and validation workflows.