موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 2:36 دقيقة • July 8th, 2025
للتحقيق في الاستجابة المناعية لذبابة الفاكهة ضد الميكروبات المسببة للأمراض ، خذ تعليقا لمسببات الأمراض البكتيرية القابلة للحياة. اغمس إبرة معقمة في التعليق ، وجمع كمية صغيرة.
ضع ذبابة مخدرة تحت مجهر التشريح. باستخدام الإبرة المصابة ، قم بوخز الذبابة في الصفيحة القصية الجنبية للصدر. يدخل الوخز البكتيريا إلى الهيموليمف - سائل الدورة الدموية في تجويف الجسم.
ضع الذباب المصاب داخل قارورة تحتوي على طعام الذباب ، واحتفظ بها لفترة كافية.
تستخدم البكتيريا الهيمولمف كمصدر غني بالعناصر الغذائية وتتكاثر - مما يؤدي إلى عدوى جهازية. يحتوي Hemolymph على خلايا دموية ، وخلايا مستجيب مناعية منتشرة.
يرتبط الهيموليمف أيضا بالجسم الدهني ، وهو نسيج متخصص لتخزين الطاقة. تتفاعل مستقبلات التعرف على الأنماط على خلايا الجسم الدهنية مع البكتيريا. يحفز هذا التفاعل الخلايا على إفراز الببتيدات المضادة للميكروبات ، مما يتوسط في قتل البكتيريا.
تتفاعل الخلايا الدموية المنتشرة مع البكتيريا عبر مستقبلات البلعمة ، مما يتسبب في ابتلاعها في البلعمات ويؤدي إلى تدهور البكتيريا.
تتهرب مجموعة فرعية من مسببات الأمراض من الاستجابة المناعية للمضيف ، مما يؤدي إلى موت الذباب.
مراقبة وفيات الذباب وإجراء فحوصات في اتجاه مجرى النهر لتقييم الاستجابة المناعية ضد العامل الممرض.
لتحضير القلم المصاب ، قم بإذابة نهاية طرف ماصة دقيقة سعة 200 ميكرولتر وأدخل دبوس دقيق للحشرات بحجم 0.15 ملم في البلاستيك المصهور. اسمح للبلاستيك بالتصلب بحيث يتم تثبيت الدبوس في مكانه مع 0.5 سم من الدبوس الممتد من البلاستيك.
تخدير الذباب بثاني أكسيد الكربون ، وخز الذباب في الصفيحة الجنبية القصية للصدر بالإبرة مع تجنب مواقع التعلق بالأجنحة والساقين. قم بإزالة الذباب من الدبوس الدقيق باستخدام ملقط ناعم. تأكد من غمس الدبوس في التعليق البكتيري بين وخز كل ذبابة.
ضع الذباب الوخز في ملف جديد مع وسط ذبابة جديد وضع القارورة على جانبها حتى يتعافى كل الذباب من التخدير.