Name: الليزر Microdissection القبض على أنسجة الثدييات (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 34 s
Description: تعلم تقنية الليزر Microdissection لعزل دقيق لأنسجة الثدييات باستخدام مجهر Leica A-S-L-M-D. تُمكّن هذه الطريقة الباحثين من دراسة التركيب الخلوي بدقة عالية في الأبحاث البيولوجية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.

الليزر microdissection القبض على أنسجة الثدييات

Laser Capture Microdissection of Mammalian Tissue

الليزر التقاط المجهري ، والمعروف أيضا باسم microdissection الليزر (LMD) ، تمكن المستخدم من عزل أعداد صغيرة من الخلايا أو الأنسجة من المجمدة أو الفورمالين الثابتة والمقاطع البارافين جزءا لا يتجزأ من النسيج. تقنيات LMD تعتمد على غشاء عطوب الحرارية وضعت إما في أعلى أو أسفل ، وقسم الأنسجة. في أسلوب واحد ، يتم استخدام طاقة الليزر مركزة لإذابة غشاء الخلايا على الكامنة ، التي يمكن بعد ذلك رفع للخروج من الباب الأنسجة. في الآخر ، وطاقة الليزر يبخر احباط على طول المسار &quot;رسمها&quot; على الأنسجة ، مما يسمح للخلايا محددة للوقوع في جهاز التحصيل. كل أسلوب يسمح للاختيار من الخلايا مع الحد الادنى من القرار ميكرون عدة. قد تكون معزولة DNA ، RNA والبروتين والدهون والعينات وتحليلها من تشريح عينات صغيرة. في هذا الفيديو ، ونحن لشرح استخدام لايكا AS - LMD صك microdissection الليزر في سبع فئات ، بما في ذلك مقدمة لمبادئ LMD ، تهيئة أداة للاستخدام ، والاعتبارات العامة لإعداد العينات ، وتركيب العينة ووضع أنابيب التقاط والتوفيق بين المجهر ، وتعديل الضوابط الطبيعية ، والاستيلاء على عينات الأنسجة. الليزر التقاط الجزئي تشريح تمكن المحقق من عزل عينات من السكان الخلية نقية صغيرة مثل الخلية مكافئات قليلة. هذا يسمح تحليل خلايا الفائدة التي تكون خالية من الملوثات المجاورة ، الأمر الذي قد يشوش النتائج التجريبية.

الليزر Microdissection القبض على أنسجة الثدييات

يتيح مجهر الالتقاط بالليزر، والمعروف أيضاً باسم التشريح الدقيق بالليزر (LMD)، للمستخدم عزل أعداد صغيرة من الخلايا أو الأنسجة من عينات مجمدة أو...

مرحباً، اسمي روب إدواردز. أنا مدير مرفق مجهر الالتقاط بالليزر في جامعة كاليفورنيا إيرفين. سأقوم بشرح كيفية استخدام مجهر الالتقاط بالليزر المتوفر لدينا هنا.جهازنا هو Leica A-S-L-M-D، والذي اشتريناه منذ ثلاث سنوات تقريباً. هناك نوعان مختلفان من أنظمة الالتقاط بالليزر؛ أحدهما يشبه آلة لحام البقع، حيث توضع قطعة من النسيج على شريحة زجاجية فوق غشاء بلاستيكي يغطي النسيج.يُستخدم بعد ذلك مصدر ليزر لصهر الغشاء، مما يؤدي فعلياً إلى لحام النسيج بالنقطة على الغشاء، ومن ثم يتم إزالة ذلك الغشاء، ساحباً معه النسيج الملتقط. حسناً، لبدء تشغيل نظام LCM، نقوم بتشغيل عدد من الأجهزة بالتتابع هنا. سنبدأ بصندوق تحكم A-S-L-M-D، الذي يتم تشغيله من هنا.نقوم بعد ذلك بتشغيل الكمبيوتر ببساطة. وإذا كانت لديك عينة تتطلب بصريات فلورية لتحديد الخلايا المراد التقاطها، فستقوم بتشغيل مصباح الزئبق للإضاءة الفلورية. لن نستخدم ذلك في هذا العرض التوضيحي.إذا كنت ترغب في التقاط صور عالية الجودة للعينات قبل وبعد المعالجة، يمكن تشغيل كاميرا البقعة (spot camera) بشكل منفصل هنا بعد تشغيل صندوق المنطق والحاسوب، ثم يتم بعد ذلك تشغيل وحدة التحكم في طاقة الليزر الموجودة هنا، والتي يتم تشغيلها في الواقع بواسطة مفتاح موجود في الجزء السفلي من الجهاز. وأخيراً، يتم تشغيل شاشة الحاسوب. هناك عدد من أدوات التحكم الموجودة على الشاشة التي ست

laser-capture-microdissection-of-mammalian-tissue

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

يصف الفيديو تشريح الليزر لنموذج الزراعة العضوية المشتركة ثلاثي الأبعاد بدقة على مستوى الميكرون. في النماذج العضوية ثلاثية الأبعاد ، يتم زراعة المكونات اللحمية مثل الخلايا الليفية ثلاثية الأبعاد مع الخلايا الظهارية السرطانية. يعمل النموذج ثلاثي الأبعاد كأداة تجريبية تمكن من دراسة الغزو وتفاعلات السرطان والسدى في ظروف شبه فسيولوجية.

التشريح المجهري بالليزر: تقنية لعزل خلايا سرطان القولون والمستقيم الغازية من نموذج ثقافة النمط العضوي ثلاثي الأبعاد

وقد استخدمت على نطاق واسع تسليخ مجهري لفحص الحمض النووي، والجيش الملكي النيبالي، والبروتينات داخل الأنسجة. القبض على الليزر المجهري (LCM) هو الأسلوب الأكثر شيوعا، ولكن تقنية الطحن الجديدة، mesodissection، وهو متاح في الآونة الأخيرة. ونحن لشرح استخراج الحمض النووي الريبي من mesodissected الفورمالين الثابتة البارافين جزءا لا يتجزأ من النسيج الشرائح حبيبية المتفطرة السلية.

مقاربة الرواية تسليخ مجهري ليتعافى<em&gt; السل المتفطرة</em&gt; نصوص محددة من الفورمالين الثابتة جزءا لا يتجزأ من البارافين الرئة أورام حبيبية

ويتجلى في عزل الخلايا العصبية الدوبامين الفردية أو المنطقة الجوفية السقيفية مع المناعية مباشرة أو غير مباشرة باستخدام ملقط ليزر. وتناقش المعلمات لعزل الأنسجة من شريحة زجاجية باستخدام الليزر تحت الحمراء والشرائح من الغشاء باستخدام مزيج من ليزر الأشعة تحت الحمراء وفوق البنفسجية.

الليزر التقاط تسليخ مجهري - تظاهرة لعزل الخلايا العصبية الدوبامين الفردية ومنطقة بطني السقيفية بكل

الهدف من هذا البروتوكول هو استخدام التشريح الدقيق بالليزر كطريقة فعالة لعزل مجموعات نقية من أنواع الخلايا من أنسجة البروستاتا غير المتجانسة لتحليل الحمض النووي الريبي النهائي.

الليزر التقاط تسليخ مجهري من الإنسان البروستات الظهارة لتحليل الحمض النووي الريبي

هنا، نحن وصف بروتوكول ميكروديسيكشن التقاط ليزر استنساخه (LCM) لعزل trabecular ميشوورك (TM) لتحليل الحمض النووي الريبي المتلقين للمعلومات. القدرة على تحليل التغيرات في التعبير الجيني في TM سوف تساعد في فهم الآليات الجزيئية الكامنة لأمراض العين المتعلقة بالخرائط المواضيعية.

ليزر التقاط ميكروديسيكشن من ميشوورك ترابيكولار نقية جداً من عيون الماوس لتحليل التعبير الجيني

تم تطوير بروتوكول احتجاز الليزر microdissection (LCM) للحصول على كمية كافية من الحمض النووي الريبي عالي الجودة لتحليل التعبير الجيني في خلايا العظام. وتركز الدراسة الحالية على أقسام عظم الفخذ الماوس. ومع ذلك، يمكن استخدام بروتوكول LCM المبلغ عنه هنا لدراسة التعبير الجيني في الخلايا من أي أنسجة صلبة.

بروتوكول إزالة الميكروسيرس من الليزر الذي ينتج RNA عالي الجودة من عظام الماوس الطازجة المجمدة

يصف هذا البروتوكول التشريح المجهري للتقاط الليزر لعزل الغضروف والعظم من الأجزاء المجمدة الطازجة من جنين الفاره. الغضروف والعظم يمكن تصورها بسرعة بواسطة تلطيخ البنفسج كريريل وجمعت علي وجه التحديد لإنتاج الحمض الريبي النيبالي عاليه الجودة للتحليل الناسخ.

الليزر التقاط ميكروتشريح الغضروف الجنيني الماوس والعظام لتحليل التعبير الجيني

الليزر المجهري (LMD) هو تقنية حساسة وقابلة للاستنساخ للغاية التي يمكن استخدامها للكشف عن المسارات التي تتوسط عدم تجانس الورم الدبقي والغزو. هنا، نحن نصف بروتوكول الأمثل لعزل المناطق المنفصلة من أنسجة الورم الدبقي باستخدام الليزر LMD تليها تحليل النسخ.

الليزر التقاط Microdissection من المناطق دون الإقليمية ديوموما للتوصيف المكاني والجزيئي للتغاير داخل الورم، Oncostreams، والغزو

يتم وصف بروتوكول يستخدم التشريح المجهري بالليزر لعزل أنسجة الديدان الخيطية الفردية لتسلسل الحمض النووي الريبي. لا يتطلب البروتوكول مجموعات أدوات وراثية خاصة بالأنواع ، مما يسمح بمقارنة ملامح التعبير الجيني بين الأنواع المختلفة على مستوى عينات الأنسجة المفردة.

التشريح المجهري بالليزر لتطبيقات الأنسجة الأحادية التي لا تعرف الأنواع

يصف هذا البروتوكول سير عمل عالي الإنتاجية للتجزئة القائمة على الذكاء الاصطناعي للمناطق ذات الأهمية المؤكدة من قبل علم الأمراض من صور قسم الأنسجة الرقيقة الملطخة لإثراء مجموعات الخلايا التي تم حلها بواسطة علم الأنسجة باستخدام التشريح المجهري بالليزر. تتضمن هذه الاستراتيجية خوارزمية جديدة تمكن من نقل الحدود التي تشير إلى مجموعات الخلايا ذات الأهمية المباشرة إلى المجاهر الليزرية.

التشريح المجهري بالليزر الصناعي الموجه بالذكاء الاصطناعي للتحليل البروتيني المجهري للبيئة الدقيقة للورم

يصف هذا البروتوكول طريقة لعزل الحمض النووي الريبي من المناطق النسيجية المحددة في نسيج كبد الفئران المدمج مع مركب القطع المثالي المثبت بدرجة حرارة القطع المثلى باستخدام التشريح الدقيق بالليزر، مما يتيح تحليل التعبير الجيني المستهدف في المراحل اللاحقة.

التشريح الدقيق بالليزر لنسيج كبد الفئران المثبت بالبارافورمالديهايد لتحليل الحمض النووي الريبي

تعلم تقنية الليزر Microdissection لعزل دقيق لأنسجة الثدييات باستخدام مجهر Leica A-S-L-M-D. تُمكّن هذه الطريقة الباحثين من دراسة التركيب الخلوي بدقة عالية في الأبحاث البيولوجية.

الليزر Microdissection القبض على أنسجة الثدييات

استكشف المزيد من الفيديوهات