توقف القلب والإنعاش القلبي Normothermic : نموذج الفأر من نقص التروية ، إعادة إشباع الخلايا الإصابات

الهدف العام من هذا الإجراء هو نمذجة إعادة تروية نقص التروية العالمية المعيارية الموضوعية لتقييم تأثير التدخلات على هذه الحالة المرضية المهمة والشائعة. أولا ، يتم تحضير فأر مخدر للسكتة القلبية والإنعاش أو الإنعاش القلبي الرئوي. بعد ذلك يتم إحداث السكتة القلبية.

ثم يتم إنعاش الفأر من السكتة القلبية باستخدام ضغطات الصدر والإبينفرين. في النهاية ، يمكن إجراء المقايسات الوظيفية مثل اليوريا في الدم والنيتروجين والكرياتينين في الدم وآلان ترانسفيراز والأسبارتات إلى التحويلات الطفيفة والأنسجة لتقييم الضرر الكبير للأعضاء. يمكن أيضا قياس وجود المؤشرات الحيوية المبكرة مثل جيلاتين العدلات المرتبطة ب lipo callin.

أخيرا ، يتم تقييم نتيجة الإنعاش هنا ، والتي يتم إثباتها على أنها تمارين القلب المتحولة على مدار 24 ساعة ، والتروية وحصاد الكلى. الميزة الرئيسية لهذا النموذج على أساليبنا الأخرى ، مثل النماذج الحيوانية الكبيرة للسكتة القلبية والإنعاش القلبي الرئوي ، هي أن فئران المختبر منخفضة التكلفة ومنتشرة في كل مكان ومتوفرة في العديد من السلالات المعدلة وراثيا. للبدء ، قم بتليين عيون الفأر المخدر وضع في وضع ضعيف على وسادة تدفئة.

ثم قم بتثبيت أطراف باستخدام شريط لاصق ، ووضع المسام الخلفية في وضع محايد ، ولكن قم بتأمين المسام الأربعة بالقرب من جدار الصدر قدر الإمكان للسماح برحلة كاملة لجدار الصدر أثناء ضغطات الصدر. بعد ذلك ، قم بتليين ووضع مسبار درجة حرارة المستقيم. قم بتنبيب القصبة الهوائية باستخدام قسطرة تفلون عيار 22 ومدخل بزاوية.

يمكن تأكيد وضع الأنبوب الرغامي باستخدام الضغط الإيجابي أو السلبي. باستخدام الضغط الإيجابي ، يتم دفع كمية صغيرة من الهواء إلى الأنبوب. إذا كان الأنبوب في القصبة الهوائية بدلا من وضع المريء ، يرتفع الصدر بشكل متماثل باستخدام الضغط السلبي.

يتم وضع كمية صغيرة من السائل في أنبوب شفاف متصل بالأنبوب الرغامي. ينقل الجهد التنفسي التلقائي بواسطة الفأر السائل داخل الأنبوب. قم بتأمين القسطرة الرغامية بحلقة من الأسلاك في القاطع ، مع الحفاظ على شد طفيف على القاطع لإبقاء الرأس ثابتا أثناء ضغط الصدر.

قم بتهوية الماوس ميكانيكيا باستخدام جهاز التنفس الصناعي للقوارض على 140 ميكرولتر 150 نفسا في الدقيقة. باستخدام تقنية معقمة ومجهر تشغيلي ، ضع قسطرة PE 10 مسبقة التنظيف في الوريد الوداجي. قم بتثبيت قسطرة PE 10 في إغلاق الجلد باستخدام مادة لاصقة جراحية سيانواكريلات.

ضع ثلاثة أقطاب كهربائية لتخطيط كهربية القلب تحت الجلد ، واحدة بالقرب من كل محور ، وواحدة في الربع السفلي الأيسر من البطن. تأكد من أن جميع الأسلاك آمنة على سطح التشغيل. قلل من تقاطعات الإشارة وتقليل العوازل داخل مسار الإشارة.

بمجرد الاتصال ، قم بتحسين إشارة مخطط كهربية القلب على الشاشة. تأكد من أن الماوس هو موضوعي معياري. قم بإدارة 40 ميكرولترا من درجة حرارة الغرفة ، و 0.5 مولار كلوريد البوتاسيوم عن طريق الوريد ، وراقب التتبع متساوي الكهرباء على مخطط كهربية القلب.

ابدأ مؤقت الاعتقال. بعد ذلك ، افصل جهاز التنفس الصناعي وتوقف عن بخار التخدير. قم بإيقاف تشغيل وسادة التدفئة وأي معدات أخرى تنتج ضوضاء إلكترونية وقد تتداخل مع مراقبة مخطط كهربية القلب.

ضع بطانية عازلة فوق الماوس. سجل درجة الحرارة كل دقيقة أثناء السكتة القلبية. إذا لزم الأمر ، استخدم مصباح تسخين لرفع درجة الحرارة الأساسية إلى النطاق الطبيعي للموضوع.

بعد سبع دقائق و 30 ثانية من السكتة القلبية ، أعد توصيل جهاز التنفس الصناعي وقم بزيادة المعدل إلى 180 نفسا في الدقيقة. يعد إجراء ضغطات الصدر لإعادة الدورة الدموية العفوية هو أصعب جزء في هذا النموذج. الماوس صغير جدا ، لذا فإن تحديد المواقع والضغط أمران بالغان الأهمية.

سيؤدي الضغط المفرط إلى إصابة الرئة والكبد وتقليل البقاء على قيد الحياة. سيقلل الضغط القليل جدا من احتمالية عودة الدورة الدموية التلقائية. يجب ضغط الصدر من ثلث إلى نصف صف ANA.

يجب السماح بالمسافة الخلفية والارتداد الكامل بين الضغطات. يرجع الفشل في تحقيق البقاء على قيد الحياة في هذا النموذج دائما إلى الإنعاش القلبي الرئوي دون المستوى الأمثل في ثماني دقائق. ابدأ ضغطات الصدر بمعدل 300 نبضة في الدقيقة.

يجب أن يتم ضغط الصدر بإصبع السبابة. خمسة ملليمترات فوق عملية خنجري وقليلا إلى يسار خط الوسط تثير. 0.5 ملليلتر من الأدرينالين مخفف إلى 15 ميكروغرام لكل ملليلتر.

في أول 30 ثانية من الإنعاش القلبي الرئوي ، راقب بعناية مخطط كهربية القلب لعودة الدورة الدموية التلقائية أو ROSC ، لوحظت تقلصات البطين المبكرة المتكررة والتغيرات في محور مخطط كهربية القلب في أول دقيقتين. ROSC ودائما ما يتم حلها في عدم انتظام دقات القلب الجيبي الثابت. في دقيقتين، سجل الوقت الإجمالي للإنعاش وجرعة الأدرينالين.

سجل درجة الحرارة كل دقيقة لمدة 10 دقائق. بعد R-O-S-C-E-K-G يمكن إزالة خيوط عندما يبدأ التنفس التلقائي ، عادة في غضون 12 إلى 50 دقيقة بعد ROSC ، قم بإزالة القسطرة الوداجية واستخدم ضغطا مباشرا للحصول على الإرقاء ، قم بإخراج القصبة الهوائية عندما يكون معدل التنفس التلقائي أكبر من 60 في الدقيقة. أخيرا ، ضع الفأر في قفص إنعاش على سطح يتم التحكم في درجة حرارته على 37 درجة مئوية لأول ساعتين بعد الإجراء أو أكثر إذا لزم الأمر للشفاء التام من التخدير ، يمكن نقل القفص إلى ظروف السكن القياسية بعد الجراحة بعد 24 ساعة من تخدير الفأر وإجراء تروية القلب المتحولة أولا بالمحلول الملحي ثم بالفورمالين بعد التثبيت ، يتم إجراء شق البطن للتحقق من كفاية التثبيت الكلوي.

تبييض الكلى بشكل كاف والثابتة بشكل جيد. تؤدي السكتة القلبية إلى فقدان فوري للتروية. يمثل الضغط هنا كمتوسط ضغط شرياني أو خريطة.

فقدان ضغط التروية هذا إلى توقف شبه كامل لتدفق الدم القشري الكلوي الإقليمي أو RR CBF طوال فترة السكتة القلبية في المنطقة المظللة. كما هو موضح هنا ، فإن الإنعاش بضغطات الصدر والإبينفرين يعيد الخريطة إلى وضعها الطبيعي ويرتفع RR CBF بشكل مطرد في فترة ما بعد الإنعاش. في هذا الشكل ، يمكن ملاحظة كيف أن نيتروجين اليوريا في الدم أو الكرياتينين في الدم ب BUN بعد 24 ساعة من الإجراء ، ومدى موت الخلايا الأنبوبية كلها مرتفعة بشكل كبير في التي خضعت للإنعاش القلبي الرئوي مقارنة بالحيوانات التي عولجت بإجراء زائف ، فإن الإنعاش القلبي الرئوي يحفز إهانة إقفارية كائن حي هنا ، والدليل على ذلك من خلال الارتفاع الهائل لإنزيمات وظائف الكبد ، Alan Transferases أو LT و aspartate إلى minoro transferase أو ST في كاليفورنيا ، CPR الفئران مقارنة بالحيوانات المعالجة الوهيم.

هنا ، تم إجراء لطخة غربية باستخدام جسم مضاد متعدد النسيلة لقلة الليبو الجيلاتينية المرتبطة بالعدلات أو نهاية غال. يظهر مؤشر حساس للإصابة الإقفارية الكلوية. تم الحصول على عينات البول مباشرة قبل وبعد 24 ساعة من C-A-C-P-R في أربعة حيوانات ممثلة على أنها A و B و C و D.يوضح هذا الشكل أن N gal يتم تنظيمه بشكل كبير في بول الفأر بعد C-A-C-P-R.

يوضح هذا الشكل بقعة هيمات ، توين ، وإيوين لقسم قصير من الأنسجة الكلوية بعد 24 ساعة من الإنعاش القلبي الرئوي غير المكتمل ، ولكن يمكن رؤية تلف واضح في الأنابيب النخاعية والقشرة القشرية مع انسداد أنبوبي بقعة اليشم الفلوري B من نفس المنطقة في نفس. يمكن رؤية 24 ساعة بعد C-A-C-P-R في هذا الشكل ، يلطخ اليشم الفلوري B الخلايا النخرية باللون الأخضر الفاتح ، مما يظهر نخر التوبولين النخاعي غير المكتمل في الكورتيكو. تشبه هذه النتائج إلى حد كبير نتائج خزعة الكلى من البشر الذين يصابون بإصابة حادة في الكلى أو KI وعلى عكس تلك التي تنتجها نماذج حيوانية أخرى من KI ، أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر وضع الفأر بعناية قبل الراحة لتقليل ضوضاء إشارة مخطط كهربية القلب ، وتقديم ضغطات على الصدر بضغط مثالي.