موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 2:27 دقيقة • May 29th, 2025
ابدأ بفأر مخدر مصاب بالتهاب الدماغ والنخاع المناعي الذاتي التجريبي أو EAE. تسبب هذه الحالة التهابا في العينين والدماغ.
ضع الماوس في جهاز تصوير ، وقم بمحاذاة الجزء العلوي من الظهر في المنتصف.
قم بتغطية الجزء السفلي من الماوس بقطعة قماش سوداء لمنع تداخل الإشارة من هذه المنطقة.
استخدم برنامج التصوير لتسجيل موضع الماوس.
خذ حقنة مملوءة بكاشف يحتوي على الركيزة المضيئة بيولوجيا وحقنها داخل الصفاق في الفأر.
يدور الكاشف ويدخل موقع الالتهاب ، حيث تتفاعل الركيزة مع الإنزيمات الخاصة بالالتهاب.
ينتج عن تفاعل الركيزة الإنزيمية إشارة إضاءة حيوية.
التقط الصور على فترات زمنية منتظمة لمراقبة هذه الإشارة.
يقع العصب البصري بالقرب من السطح ، مما يجعل التلألؤ البيولوجي حول العينين بارزا. في المقابل ، تكون الإشارات من الدماغ ضعيفة حيث تمتص الجمجمة الضوء المنبعث.
في الصورة ، يشير اللون الأزرق إلى التهاب خفيف ، ويشير اللون الأحمر إلى التهاب شديد.
لإجراء التصوير في الجسم الحي ، حافظ على تخدير الفئران أقل من 2 إلى 2.5٪ من تخدير الأيزوفلوران أثناء جميع إجراءات التصوير. ضع فأرين بجانب بعضهما البعض في الجهاز ، وضع العمود الفقري العلوي للفئران في المنتصف.
بعد ذلك ، قم بحماية موقع التحصين بقطعة قماش سوداء. افتح البرنامج لالتقاط الصور وتهيئة الكاميرا. بعد ذلك ، التقط صورة أساسية لتقييم الوضع الصحيح للفئران.
بعد ذلك ، استخدم التركيز B بمسافة 6.5 سم من الكاميرا لالتقاط جميع الصور. بعد ذلك ، امزج الكاشف الكيميائي الجاهز للاستخدام بسعر 40 ملليغرام لكل مليلتر قبل ملء المحقنة. بعد ذلك ، قم بحقن 100 ميكرولتر منه في الفئران داخل الصفاق والتقط صور التلألؤ البيولوجي بعد 5 و 10 و 15 دقيقة من الحقن.