ديسمبر 8, 2012
تعتبر الإدارة الذاتية في الوريد (IVSA) نموذج ليكون المعيار الذهبي في دراسة خصائص يعزز من تعاطيها في القوارض. هذا المخطوط يحدد الإجراءات التجريبية والتقنيات الجراحية اللازمة للحصول على بيانات موثوق بها IVSA. على وجه الخصوص، ويسلط الضوء على غرس قسطرة دقيق والصيانة.
مرحبًا، اسمي إليزابيث كوتيك، وأنا هنا من مختبر الدكتورة كاثرين جيل في وحدة الإدمان بمركز McGill University Health Center الصحي. سأوضح لكم اليوم كيفية إجراء جراحة القسطرة اللازمة لإجراء دراسات الإعطاء الذاتي عن طريق الوريد. سأشرح لكم كيفية إدخال القسطرة بالإضافة إلى بعض النصائح للحفاظ على نفاذية القسطرة.
خلال جلسات الإعطاء الذاتي للنيكوتين عن طريق الوريد، يتم توصيل الحيوانات بأجهزة Tai عبر أنابيب بلاستيكية، ويتم تقديم تسربات النيكوتين بواسطة مضخات التسريب الملحقة. تم شراء صناديق التشغيل الإجرائي من شركة med associates، حيث تم تجهيز كل صندوق برافعتين فائقتي الحساسية للفئران.
هناك بعض الأدوات التي يجب تحضيرها قبل الجراحة من أجل إدخال القثطرة في الوريد. يجب تعديل إبرة قياس 20 gauge لتسهيل انزلاق الأنبوب إلى داخل الوريد. قم ببرد حوالي سنتيمترين من الجزء العلوي لساق الإبرة، لإنشاء قناة تُستخدم لتوجيه أنبوب القثطرة إلى داخل الوريد.
بعد ذلك، قم بتجهيز المحاقن لغسل القسطرة وفحصها. يتم توصيل أنبوب بطول 12 centimeters من أحد طرفيه بإبرة محقنة قياس 26 gauge، بينما يتم تمديد الطرف الآخر فوق إبرة قياس 23 gauge. ولتسهيل تثبيت الأنبوب بكانولا القسطرة، ستحتاج إلى محقنتين مثل هذه، إحداهما مملوءة بمحلول heparinized T carcin، والأخرى بمحلول ملحي.
أخيراً، قم بتجهيز غطاء كانيولا القسطرة. يجب تغطية كانيولا القسطرة لمنع دخول الشوائب. يتم صنع هذه الأغطية عن طريق تمديد أنابيب بلاستيكية فوق إبر قياس 23 gauge.
يتم قطع الأنبوب على بُعد سنتيمتر واحد من طرف الإبرة، ويُصهر الطرف المفتوح لإحكام غلق الأنبوب، ثم يُدفع المحلول الملحي عبر الإبرة للتأكد من عدم وجود تسريبات في السدادات. تم الحصول على قساطر الفئران من شركة Cam Cs في المملكة المتحدة. اقطع الجزء الزائد من أنبوب القسطرة بحيث يتبقى 1.2 سنتيمتر من نهاية بصلة القسطرة.
بعد ذلك، قم بتوصيل المحقنة التي تحتوي على المحلول الملحي بالقنية المعدنية الخارجية للقسطرة وقم بعملية الغسيل لفحص وجود أي تسريبات. يتم تخدير الفئران باستخدام غاز isof fluorine المخلوط بالأكسجين، ويتم الحفاظ على التخدير طوال فترة الجراحة. وباستخدام أنبوب تنفس، يتم ضبط مستويات كل من الأكسجين و isof fluorine بناءً على وزن جسم الحيوان، وتُعدل حسب الحاجة أثناء الجراحة؛ تأكد من تخدير الحيوان بشكل صحيح عن طريق قرص أرجله الخلفية بملقط التشريح، وراقب الفأر طوال العملية للتأكد من عدم وجود ضيق في التنفس ومتابعة عمق التخدير.
نظرًا لأن الجراحة تستغرق ما بين 20 و 30 دقيقة، يتم وضع مرطب للعين في كلتا العينين. يتم حلق الفأر قبل الجراحة. قم بتجهيز مساحة لقاعدة القسطرة على ظهر الحيوان.
اسحب الجلد برفق من ظهر الحيوان وأجرِ شقاً طولياً صغيراً في منتصف منطقة الكتف بطول سنتيمترين تقريباً، على أن يبدأ من منتصف الظهر ويمتد إلى ما دون الرقبة مباشرة. باعد بين الأنسجة الضامة لإفساح مجال لقاعدة القسطرة، ثم ضع المحلول الملحي على الشق.
اسحب الجلد برفق على جانبي الشق لتقريبهما من بعضهما، ثم اقلب الحيوان. سيُلاحظ وجود الوريد التغري الرقبي (right tegular vein) بشكل سطحي تحت جلد الرقبة، ويمكن كشفه عن طريق إجراء شق ضحل. قم بعمل قطع قطري بطول يتراوح بين 1 إلى 2 cm تقريبًا، يمتد من منطقة الترقوة اليمنى صعودًا باتجاه فك الحيوان.
يجب تمرير الأنبوب الواصل من قاعدة القسطرة عبر الشق البطني في الرقبة ليكون متاحاً للإدخال في الوريد. قم بتوجيه الملقط تحت جلد الكتفين واقطع الأنسجة الضامة. وللوصول إلى الشق الظهري، اسحب الأنبوب عبر الجلد وصولاً إلى الفتحة البطنية حول رقبة الحيوان.
أمسِك طرف الأنبوب باستخدام ملاقط الشرايين واتركه مثبتًا بجانب الحيوان الأيمن. ضع المحلول الملحى على الشق الجراحي، ثم اعزل الوريد الوداجي الأيمن. قم بإزالة أي أنسجة ضامة أو دهنية قد تعيق الرؤية بحذر شديد، ثم حدد موقع الوريد.
ارفع الوريد برفق من الأعلى واستخدم الملقط المنحني لتفكيك الأنسجة الدهنية والنسيج الضام المحيط بالوريد وتحته. ضع الملقط المنحني أسفل الوريد وافتحه بيدك الحرة، ثم مرر قضيباً بلاستيكياً معقماً أسفل الوريد.
بمجرد رفع الوريد، قم بإزالة كمية كافية من الدهون فقط لضمان رؤية واضحة وغير محجوبة للوريد. قم بتقطير المحلول الملحي بشكل دوري على الوريد المكشوف للحفاظ على رطوبته. قم بتجهيز عقد الخياطة حول الوريد لتتمكن من تثبيت أنبوب القسطرة في مكانه بمجرد إدخاله في الوريد الوداجي.
يتم وضع الغرز الجراحية أسفل الوريد عند الطرفين، مع عمل عقدة مفتوحة واحدة رخوة جداً عند كل طرف. مرر أنبوب القسطرة عبر العقدة العلوية ولفه فوق خيط الغرزة ثم وجه البقية فوق الكتف الأيمن. ادفع المحلول الملحي عبر القسطرة لزيادة وزن الأنبوب حتى يتم إدخال أنبوب القسطرة في الوريد الوداجي.
تُستخدم الإبرة المعدلة بقياس 20 gauge لثقب الوريد، مع ترطيب كل من الوريد وإبرة الإدخال بمحلول ملحي لتقليل الاحتكاك أثناء الإدخال، ثم اسحب القضيب البلاستيكي للخلف برفق وأدخل الإبرة بالقرب من الجزء السفلي من الوريد. أدخلها لمسافة كافية بحيث يكون نصف سنتيمتر من الإبرة بالداخل، ثم مرر أنبوب القسطرة على طول الإبرة وصولاً إلى داخل الوريد.
يجب ألا تكون هناك أي مقاومة، حيث تشير المقاومة إلى وجودك داخل نسيج ضام. وللتأكد من أنك داخل الوريد، حاول سحب مكبس سرنجة القسطرة لمعرفة ما إذا كنت قادراً على سحب الدم.
بمجرد استقرار الأنبوب في مكانه، قم بإزالة الإبرة وادفع بصلبة القسطرة نحو نقطة الإدخال. اربط العقدة السفلية وتأكد من أن أنبوب القسطرة ملاصق تماماً للقضيب قبل ربط العقدة الثانية فوق الصلبة مباشرةً. سيؤدي ذلك إلى تثبيت القسطرة في مكانها.
قم بإزالة العارضة واربط عقدة ثانية عند كل طرف. أدخل أنابيب القسطرة وخيوط الجراحة تحت الجلد قبل البدء بالخياطة. استخدم ملقط الشرايين لتوجيه إبرة الخياطة عبر الجلد وإغلاق الشق الجراحي.
سيختلف عدد الغرز وفقاً لحجم الشق الجراحي. مع وضع الحيوان على بطنه، قم بتحديد موضع قاعدة القسطرة على ظهر الحيوان. ضع المحلول الملحي على الشق، ثم مرر قاعدة القسطرة تحت الجلد.
تأكد من تقليل الالتواءات في الأنبوب ووضعه أسفل القاعدة لتقليل احتمالية ثقبه. قم بخياطة الجلد حول قاعدة القسطرة، حيث يعتمد عدد الغرز على حجم الشق الجراحي.
عادةً ما تكفي ثلاث إلى أربع غرز. تأكد من إمكانية سحب الدم من القسطرة. وأخيراً، قم بغسل القسطرة بمحلول heparinized tein لمنع حدوث العدوى وتكون الجلطات الدموية.
قم بفك الأنبوب المتصل بكانولا القسطرة. بعد ذلك، قم بإزالة أنبوب المحلول الملحي واستبدله بسرعة بأنبوب من المحقنة التي تحتوي على محلول T Carin المضاف إليه الهيبارين. قم بغسل القسطرة بـ 0.03 إلى 0.05 ccs من المحلول.
مرة أخرى، قم بفك الأنبوب المتصل بالقنية. أمسك غطاء القسطرة باستخدام الملقط، وبحركة واحدة سريعة، قم بإزالة الأنبوب من القنية واستبدله بغطاء القسطرة. يجب تنفيذ هذه الخطوة بسرعة لمنع تدفق الدم إلى الأعلى.
قم بربط غطاء القسطرة الأبيض، مع التأكد من إحكام الغطاء دون ثقب طرف الكانيولا. أعطِ الفأر حقناً تحت الجلد من المسكن والمضاد الحيوي. احقن المسكن ketoprofen في جانب واحد بجرعة 5 mg/kg والمضاد الحيوي amikacin في الجانب الآخر بجرعة 10 mg/kg.
بعد إيقاف التخدير، اترك الفأر ليتعافى في قفص نظيف مع ضمان سهولة وصوله إلى الطعام والماء. يمكن الحصول على بيانات موثوقة للإعطاء الذاتي عن طريق الوريد باتباع التقنيات المعروضة في هذا الفيديو. ومع ذلك، من المهم الحفاظ على نفاذية القسطرة.
ويتم تحقيق ذلك من خلال الوضع الدقيق للقسطرة في الأذين الأيمن، والغسيل اليومي للقسطرة قبل وبعد جلسات الجراحة، والتأكد من أن كانيولا القسطرة مغطاة باستمرار لمنع دخول الشوائب.
تتناول هذه المقالة بالتفصيل نموذج الإدارة الذاتية عن طريق الوريد (IVSA)، وهو طريقة قياسية لدراسة تعزيز تأثير العقاقير في القوارض. وتركز المقالة على التقنيات والإجراءات الجراحية المطلوبة للحصول على بيانات موثوقة لنموذج IVSA، مع التركيز بشكل خاص على زرع القسطرة وصيانتها.
يوفر الإعطاء الذاتي عن طريق الوريد (IVSA) في نماذج الفئران منصة قبل سريرية بالغة الأهمية لتقييم الخصائص التعزيزية للمركبات، مما يتيح التحقق من صحة الأهداف في اكتشاف أدوية الإدمان والاضطرابات النفسية والعصبية. ومن خلال السماح للحيوانات بإعطاء المواد المختبرة لنفسها، تقلل هذه الطريقة من انحياز الباحث وتوفر بيانات كمية حول أنماط تناول الدواء، مما يدعم تقليل المخاطر الآلية وتعزيز الثقة التنبؤية في تقييم الأهداف في المراحل المبكرة. ويسهل هذا النهج الاستمرارية الترجمية من ارتباط الهدف إلى المخرجات السلوكية، مما يوجه قرارات المضي قدماً أو التوقف في تحديد أولويات المحفظة الدوائية لعلاجات الجهاز العصبي المركزي.
يندمج اختبار IVSA في سلسلة عملية الاكتشاف بدءاً من التحقق من الهدف ومروراً بتحديد المركبات الرائدة وصولاً إلى التقييم قبل السريري، حيث يعمل كمقايسة وظيفية لقياس احتمالية التعزيز التي تكمل توصيف الحركية الدوائية في المختبر وفي الجسم الحي.