استعمال قياس المثانة في القوارض الصغيرة: دراسة في Chemosensation المثانة

الهدف من هذا الإجراء هو تحديد تأثير المركبات الكيميائية على وظائف التخزين والإفراغ في المثانة. يتم تحقيق ذلك عن طريق زرع قسطرة أولا في المثانة. بعد فترة نقاهة قصيرة ، يتم حقن محلول التحكم عبر القسطرة لمدة 30 دقيقة.

نظرا لتسجيل الضغط داخل المثانة والحجم الباطل على مدى 30 دقيقة أخرى ، يتم غرس بمركب ذي أهمية. في النهاية ، يمكن أن تظهر النتائج كيف أن المواد الكيميائية المهيجة أيضا نمط الإفراغ من خلال تحليل تردد الإفراغ. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية ، مثل تسجيل انقباض المثانة المعزولة ، هي أنه يمكن دراسة وظيفة هذا العضو في ظروف فسيولوجية أكثر.

على سبيل المثال ، يتم الحفاظ على الإجراءات التنظيمية للجهاز العصبي المركزي. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية حيث يصعب تعلم خطوات الجراحة نظرا لوجود عدد من التفاصيل الفنية والمناورات التي يجب مراعاتها لضمان نجاح التجربة. لتحضير الأنبوب الذي تريد زرعه في المثانة أولا ، قم بقص أنبوب PE 50 بالطول المطلوب وضع قطعة بيضاء صغيرة من قسطرة قياس 18 فوق القسطرة الرئيسية.

ثم قم بإنشاء صفعة صغيرة في النهاية عن طريق إشعال أحد طرفي الأنبوب وغسلها بمحلول ملحي لإفراغ أي هواء. الآن قم بتحفيز التخدير في أنثى فأر عمرها من 10 إلى 12 أسبوعا مع إيسوف فلور. بعد تحفيز التخدير ، اضبط مستوى صيانة الفلور.

ضع في ظهره وضع قناع تخدير صغير مصنوع من حقنة 10 سم مكعب. بعد حلق البطن وتطهير الأدمة ، تابع الجراحة. يتم إجراء الجراحة التالية على كل من الفئران والفئران بنفس الطريقة.

ابدأ بإجراء شق البطن السفلي لكشف المثانة. بعد ذلك يبدأ الجزء الأكثر أهمية من الجراحة. تحت المجهر الجراحي ، ضع خياطة خيط محفظة في قبة المثانة باستخدام خيوط أحادية غير قابلة للامتصاص ستة خياطة صفرية.

بعد ذلك ، باستخدام إبرة ، قم بإجراء فغر المثانة الصغير داخل سلسلة المحفظة. أدخل قسطرة PE 50 ذات الأصفاد من خلال هذه الفتحة. يمكن أن تتمتع أنابيب القسطرة الرقيقة مثل PE 10 بمقاومة أعلى وأكثر تنوعا ، لذا لا ينصح بها.

قم بتأمين خيط المحفظة حول الأنبوب باستخدام عقدة الجراح. ثم اسحب القسطرة برفق للخارج حتى يصبح الطرف المسند أسفل الخيط مباشرة. يتم دفع قطعة القسطرة قياس 18 نحو الخيط لمنع التسرب.

تحقق من وجود تسرب بين القسطرة والمثانة. مع ضخ لطيف من المحلول الملحي. شد أي تسرب باستخدام خيوط إضافية.

الآن ، أغلق عضلات البطن باستخدام خيوط أحادية الشعيرات ، مع ترك ممر للقسطرة في الجزء العلوي من الشق. قم بحفر القسطرة في المنطقة بين الكتف باستخدام قضيب معدني مجوف ، وبالتالي منع من عض الأنبوب. بعد الجراحة ، يجب وضع القضيب المعدني تحت الجلد وفوق عضلات البطن والظهر.

ادفع القضيب عبر تحت الجلد إلى المنطقة بين الكتف. أكمل الجراحة عن طريق إغلاق عضلات البطن والجلد بخيوط أحادية غير قابلة للامتصاص. من المهم الآن التحقق من نفاذية واستقرار القسطرة المزروعة عن طريق غسلها بالمحلول الملحي.

يجب أن يخرج محلول التسريب من المثانة ، ويحرق مجرى البول. بعد توصيل المسكن تحت الجلد ، أغلق الطرف الخارجي للقسطرة بغشاء بلاستيكي وقم بتثبيت القسطرة على جلد الجزء السفلي من ظهر الفئران. أخيرا ، اسمح للحيوان بالتعافي لمدة 30 دقيقة.

قبل البدء في القياس الخلوي ، تأكد من معايرة الأدوات بشكل صحيح. ضع الجرذ في قفص استقلابي فوق وعاء يحتوي على زيت يرتكز على ميزان رقمي. الخطوة التالية هي توصيل القسطرة المزروعة بصنبور ثلاثي الاتجاهات عبر كعب إغراء.

يجب توصيل الصنبور بمحول الضغط ومضخة التسريب. يتم توصيل محول الضغط بشكل أكبر عبر مكبر للصوت بنظام الحصول على البيانات ، ويبدأ الكمبيوتر الذي يستخدم البرامج المتاحة للجمهور في قياسات التحكم عن طريق بدء تشغيل مضخة التسريب لغرس المحلول الملحي في المثانة. على مدى 30 دقيقة ، يتم تعليق القفص الأيضي فوق ميزان رقمي ، والذي يستخدم لتقدير حجم الفئران المفرغ.

يتم تسجيل الضغط داخل الحويصلي عندما تمتلئ المثانة وتفرغ. في الخطوة التالية ، يمكن إعطاء الأدوية بشكل منهجي أو داخل المثانة على مدار 30 دقيقة أخرى من جمع البيانات. عند اكتمال التجربة ، يجب التضحية بالحيوان.

يظهر تتبع الضغط النموذجي من الفئران أنه أثناء ضخ السوائل ، يكون هناك تراكم بطيء للضغط في المثانة حتى يتم الوصول إلى عتبة معينة. ثم تنقبض المثانة وتفتح العضلة العاصرة البولية مما يسمح بمرور المحلول المغرس عبر مجرى البول. على هذا النحو ، يتم إفراغ المثانة.

سيتوقف الانكماش وسينخفض الضغط مرة أخرى إلى المستوى الأساسي. تحتوي البيانات التي تم جمعها من الماوس على نفس الميزات. تم استخدام القياس الخلوي لتحديد الأهداف الجزيئية لزيت الخردل أو mo هو مركب عالي التفاعل يستخدم منذ فترة طويلة في النماذج التجريبية للالتهاب وفرط الألم في الأعضاء الحشوية مثل المثانة البولية.

كما هو متوقع ، أدى التسريب داخل المثانة ل 10 مللي مولار MO إلى انخفاض قوي في الفاصل الزمني الانقباضي في الفئران البرية. من الغريب أن الفئران التي تعاني من نقص في مستقبلات MO T RPA A كان لها نتيجة مشابهة للأنواع البرية في ظل نفس الظروف. في المقابل ، تسبب MO في تغيير أضعف بكثير في المعلمات النظامية في ماوس TRP V بالضربة القاضية مقارنة بالضربة القاضية المزدوجة للفأر من النوع البري لكل من TRPA one و TRP V one كانت غير مستجيبة تقريبا لجرعة M mo.

تشير البيانات إلى أن TRP V قد يلعب دورا رئيسيا في التهيج الحشوي الناجم عن mo. يدعم متوسط تردد الإفراغ اللحظي قبل وأثناء التسريب داخل المثانة MO هذه البيانات. متوسط التردد مرتبط بالتسريب الملحي.

أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم التأكد من بقاء القسطرة متصلة بإحكام بالمثانة حتى لا يكون هناك تسرب لمحلول الحقن في البطن. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية قياس الضغط داخل المثانة ، والذي يستلزم زرع قسطرة في المثانة ووضع المستيقظة أو المخدرة في مرحلة القياس الخلوي تحت وفرة المثانة الخاضعة للرقابة.