تطوير النزلات الشعبية مسد في نموذج الفئران من زرع الرئة Orthotopic

الهدف العام من هذا الإجراء هو إنشاء نموذج التهاب القصيبات الحرفي في عكس زراعة الرئة التقويمية. يتم تحقيق ذلك عن طريق حصاد رئة المتبرع أولا من فأر C 57 BL 10. الخطوة الثانية هي تحضير الكفة للشريان الرئوي القصبي والوريد للمفاغرة.

بعد ذلك ، يتم زرع الرئة المتبرعة المعدة في المتلقي C خمسة سبعة BL ستة فأر. الخطوة الأخيرة هي مراقبة الفأر المزروع لمدة 21 أو 28 يوما بعد الزرع. في النهاية ، يتم استخدام التحليل النسيجي لإظهار آفات التهاب القصيبات في الرئة المزروعة.

الميزة الرئيسية لهذا النموذج مقارنة بنموذج زرع مجرى الهواء غير المتجانس هو أن النموذج الحالي يحاكي حالة الإنسان. بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة لأن الهياكل العليا في الفئران حساسة للغاية وأكثر عرضة للإصابة لأن الكتل لا تتجاوز 10 كتلة الفئران ضع الفأر المتبرع في غرفة احتجاز محكمة الغلق وقم بالتخدير بنسبة 5٪ من الفلور. بعد ذلك ، استخدم القسطرة الوريدية قياس 20 لتنبيب الفأر أو Trae ، ثم ضعها على جهاز التنفس الصناعي للقوارض.

الحفاظ على التخدير مع واحد إلى 2٪ من الفلور. بعد التأكد من تخدير الماوس تماما عن طريق عدم الاستجابة لنفض الغبار وقرص إصبع القدم ، ضعه في وضع ضعيف وقم بإعداد البطن بنسبة 70٪ كحول. الآن ، قم بقطع الجلد الذي يغطي البطن بمقص وفضح عضلات البطن.

بعد ذلك ، قم بإجراء بضع القص الحضاري عن طريق عمل شق خط الوسط أولا عبر جدار البطن ، ثم عن طريق القطع بشكل عرضي عبر القص ، وحرك الأمعاء بعيدا وحدد موقع الوريد الأجوف السفلي ، الموجود أسفل الكبد مباشرة. حقن الهيبارين بمعدل 100 ميكرولتر لكل كيلوغرام في IVC. بعد ذلك ، اسحب الرباط المنجلي للكبد لأسفل وقطع الحجاب الحاجز على طول الملحق السببي البطني باتجاه العمود الفقري.

قطع جانبي جدار الصدر إلى الرقبة لفضح التجويف الصدري. اقطع القفص الصدري بشكل ثنائي مع حماية الرئة وإزالة الغدة الصعترية. بعد ذلك ، قم بقطع IVC داخل الصدر على مستوى الحجاب

الآن حدد موقع القلب واستئصال الزائدة الأذينية اليمنى. ثم قم بعمل شق عرضي في جذر جذع الشريان الرئوي واستخدم الشق لغسل الرئتين بملليلترين من الرنين المرضع المبرد و 0.1 مل من الهيبارين. كشف القصبة الهوائية ثم اقطعها مع المريء.

الآن أوقف التهوية عند ثلثي نهاية تضخم المد والجزر. استئصال كتلة القلب الطويلة وتخزينها على الثلج. ضع الشاش على الرئة المستقوصة لحمايتها من الضوء.

شق الرباط الرئوي حتى الوريد الرئوي أو الوريد الكهروضوئي. قم بإزالة المريء والشريان الأورطي لتحديد موقع النقير. ابحث عن الشريان الرئوي أو pa ، والذي يقع في معظم جوانب الجمجمة من النقير والشعب الهوائية الرئيسية المرفقة.

قم بتشريح الشريان الرئوي بعناية بعيدا عن الشعب الهوائية. الآن ، اصنع صفعة PA من قسطرة IV عيار 24 عن طريق قطعها إلى 0.5 ملم في الطول مع امتداد 0.7 ملم. سطح الكفة مضفر AB.

من أجل توفير سطح للمفاغرة ، قم بعمل صفعة للقصبات الهوائية باستخدام مادة مماثلة لكفة PA فقط باستخدام قسطرة قياس 20 مقطوعة بطول ملليمتر واحد مع امتداد 0.7 ملليمتر. يختلف حجم الكفة الكهروضوئية باختلاف وزن الفأر المتبرع. للفئران التي تزن 24 إلى 27 جراما.

حجم الكفة 22 مقياسا بطول 0.7 ملم وامتداد 0.7 ملم للفئران التي تزن 27 إلى 32 جراما. الأطوال هي نفسها ، ولكن يتم استخدام قسطرة قياس 20. الآن ، أدخل الأصفاد في العدسة البعيدة للوريد الرئوي للشريان الرئوي والشعب الهوائية لتأمين كل منها بخياطة حريرية تسعة أوه.

إرفاق جميع الأصفاد بشكل صحيح. لف الرئة المتبرعة المحضرة في شاش منقوع بالرنين المرضعين ، وضعه على الثلج حتى الزرع. لتحضير الفأر المتلقي ، يحفز التخدير ويوضع على التهوية الميكانيكية بنفس الطريقة التي تم استخدامها للمتبرع.

احلق جدار الصدر الأيسر واحضره بنسبة 70٪ كحول. ابدأ بعمل شق بضع الصدر في الفضاء الوربي الثالث الأيسر. مد الشق ظهريا بالقرب من العمود الفقري.

تأكد من لف المجال الجراحي بطريقة معقمة ووضع مشبك الأوعية الدقيقة على الأوعية الرئوية اليسرى والشعب الهوائية المجاورة للقلب. يمكن تصور الشريان الرئوي في الجانب الجمجمي ، والوريد الرئوي في نهاية المنير والشعب الهوائية بينهما. بعد ذلك ، استخدم الجر اللطيف على الإرقاء لإحداث توتر خفيف على السلطة الفلسطينية والكهروضوئية والشعب الهوائية.

اترك الهياكل المقدسة مثبتة وقم باستئصال الرئة اليسرى بعناية. اعزل الشريان الرئوي والوريد الرئوي والشعب الهوائية ، ثم ضع خياطة أوه بشكل فضفاض حول كل بنية. قم بتشريح PA بالكامل من غمده العرضي ، ثم قم بعمل شق عرضي صغير يبلغ حوالي ربع محيط الوعاء الدموي في الجدار الأمامي.

أثناء ترك استمرار الجزء الظهري من الشريان سليما ، احصل على رئة المتبرع ، الملفوفة بشاش قطني مبلل بالجرعات الباردة ، وضعها في التجويف الصدري. بعد ذلك ، أدخل الأصفاد في المتلقي pa و PV و bonchus لإنشاء مفاغرة وربطها بخياطة نانوية. بعد ذلك ، قم بإزالة الرئة المتلقية.

ثم قم بإزالة المشبك المتقاطع للهيلر ، والذي يسمح بإعادة التروية والتهوية. ضع الرئة المزروعة مرة أخرى في الصدر المتلقي وأغلق شق بضع الصدر باستخدام خياطة خمسة أوه ، يجب أن يتعافى الفأر الآن من التخدير. يمكن إعطاء البوبرينورفين لتخفيف الآلام بعد أن يستعيد الفأر وعيه.

يوضح هذا الجدول الدرجات النسيجية للرفض الحاد وانتشار التهاب القصيبات الأدبي أو OB. يشار إلى تسجيل ما بعد الزرع للرفض الحاد باسم درجة A. تظهر مجموعات الطعم الخيفي أمراض رفض أكثر حدة أو مزمنة عند مقارنتها بطعم ISO. بالإضافة إلى ذلك ، كان انتشار التهاب القصيبات الحرفي أعلى بكثير في مجموعات الطعم الخيفي منه في الكسب غير المشروع ISO في اليوم 21 و 28 بعد الزرع.

هنا النتائج الكلية وعلم الأنسجة المرضية بعد 28 يوما من زراعة الرئة. تمثل هذه الصور النتائج الكلية والرئة المطعمة ISO الملطخة ب H و E والرئة الساذجة اليمنى. تمثل هذه الصور h و e و masen trireme الملون BL 10 الطعم الخيفي الخيفي المزروع في متلقي الفئران BL ستة ، والذي طور OB وغير OB على التوالي.

يحدد السهم الأبيض في B آفات OB. تظهر هذه اللوحة BL ستة طعم خيفي للرئة تم زرعها في متلقي الفأر BL 10 بمجرد إتقانها. يمكن إجراء هذه التقنية في نصف ساعة تقريبا إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.

تتمثل فائدة هذه التقنية في أنه يمكن استخدامها للإجابة على الأسئلة الميكانيكية المتعلقة بالخلل الوظيفي الأولي في الكسب غير المشروع ، والرفض الحاد ، والتهاب القصيبات الاستئصالي بعد زرع الرئة.