Name: استخراج خلايا الحمض النووي الريبي من Neuroprecursor باستخدام بيو راد إجمالي RNA كيت (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-31T23:51:30.000+00:00
Duration: 17 min 25 s
Description: تعلم استخراج الحمض النووي الريبي من خلايا السلف العصبية باستخدام مجموعة بيو راد. توفر هذه الطريقة عوائد عالية ونتائج متسقة لدراسات علم الأعصاب والبيولوجيا الجزيئية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ليس لدى المؤلفين أي تعارض مصالح للإفصاح عنه.

استخراج خلايا الحمض النووي الريبي من neuroprecursor باستخدام بيو راد إجمالي rna كيت

RNA Extraction from Neuroprecursor Cells Using the Bio-Rad Total RNA Kit

استخراج خلايا الحمض النووي الريبي من Neuroprecursor باستخدام بيو راد إجمالي RNA كيت

أهلاً بكم، أنا جوش ش، طالب دراسات عليا في مختبر الدكتور إد ماكي بجامعة كاليفورنيا إيرفاين. سأوضح لكم كيفية استخلاص الـ RNA من الخلايا السليفة العصبية باستخدام مجموعة BioRad to RNA mini kit. لقد استخدمت هذه المجموعة لعدة سنوات هنا في هذا المختبر، وكانت تمنحني دائماً نتائج متسقة وبإنتاجية عالية.الخلايا التي نستخدمها هي خلايا عصبية سلفية من جنين فأر في اليوم 14.5، تم تفكيكها بشكل حاد من القشور الدماغية الجنينية، وعادةً ما نقوم بزراعتها في طبق زراعة أنسجة مكون من 24 بئراً ومعالج كيميائياً، بحيث يكون مطلياً بـ PD L واللامينين، وأقوم بزراعتها بكثافة 100,000 خلية لكل بئر. قبل أن أبدأ، يجب أن أخبركم بضرورة العمل على طاولة مخصصة لأعمال الـ RNA. وأول خطوة هي التأكد من نظافة طاولة الـ RNA.الطريقة المناسبة لتنظيف المنضدة هي استخدام RNA zap. فهو يقوم أساساً بالقضاء على أي RNAs، والسبب في ذلك هو أن RA يقوم بتدمير RNAs الخاصة بك. الأمر الآخر هو ضرورة ارتداء القفازات دائماً عند التعامل مع عملية الاستخلاص لأن بشرتك مليئة بهذه الـ RNAs.لذا، فهذا أمر غير مسموح به تماماً. حسناً، ما لدي هنا هو طقم BioRad total RNA mini. لقد أخرجت محتوياته، لذا اسمحوا لي أن أريكم ما هي.أولاً، لدينا محلول PBS المعالج بـ X dep C، ومحلول إيثانول بنسبة 70% المعالج بـ DEP. لدينا محلول ترخيص الـ RNA الكلي الذي تمت إضافة الإيث

rna-extraction-from-neuroprecursor-cells-using-bio-rad-total-rna

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

نقدم طريقة لتوليد [كدنا] من مرنا البيئية. بشكل عام ، يتم تجميعها أولا من مجموع الحمض النووي الريبي والبيئة ، ويتم إزالة بشكل انتقائي الرنا الريباسي ، يتم تضخيمه بشكل انتقائي مرنا ، والتسلسل [كدنا] توليفها من تجمع مرنا المخصب. متواليات يمكن استردادها المشروح باستخدام معيار تقنيات المعلوماتية الحيوية لتحديد الجينات التي أعرب عنها.

تحليل الجينات من المجتمعات الميكروبية البحرية باستخدام Transcriptomics البيئية

نحن تصف العملية باستخدام الليزر التقاط microdissection لعزل واستخلاص الحمض النووي الريبي من السكان خلية واحدة متجانسة ، العصبونات الهرمية ، في الثالث من طبقة التلفيف الصدغي العلوي في العقول بعد الوفاة الإنسان. نحن في وقت لاحق تضخيم خطي (T7 على أساس) مرنا ، ويهجن العينة إلى ميكروأري Affymetrix X3P الإنسان.

الحصول على جودة عالية من الحمض النووي الريبي بالسكان خلية واحدة في الإنسان تشريح أنسجة المخ

نظرا لطبيعة عابرة للمرنا المسبق ، يمكن أن يكون من الصعب عزل...

سريع سرعة عالية طريقة لرسم الخرائط Ribonucleoproteins (RNPs) على مرنا ما قبل الإنسان

نحن في هذه المقالة وصف طريقة بسيطة لحصاد واحد من الخلايا العصبية من ثقافات الجرذان الأولية واللاحقة تحليل transcriptome به آرنا التضخيم. هذا النهج هو تعميم إلى أي نوع من الخلايا.

Transcriptome تحليل خلايا مفردة

A خطوة خطوة لعزل بروتوكول وتحديد مجمعات RNA المرتبطة بها من خلال رقاقة-RIP.

طريقة لعزل وتحديد من microRNAs، وmRNAs ومكونات البروتين من بروتين نووي ريبوزي مجمعات من مقتطفات خلية باستخدام رقاقة RIP

تكمن تفاعلات بروتين الحمض النووي الريبي في صميم العديد من العمليات الخلوية. هنا ، نصف طريقة في الجسم الحي لعزل الحمض النووي الريبي المحدد وتحديد البروتينات الجديدة المرتبطة به. هذا يمكن أن يلقي ضوءا جديدا على كيفية تنظيم الحمض النووي الريبي في الخلية.

رواية عزل-ملزم RNA والبروتينات التي السريع المنهجية

البروتوكولات اثنين مختلفة 3 'التضخيم السريع كدنا الغايات (3' سباق) جعل هنا وصف استخدام اثنين بولمرس الحمض النووي مختلفة لتعيين تسلسل التي تشمل جزءا من الإطار القراءة المفتوحة (ORF) كودون التوقف وأكملها 3 ' UTR من نسخة باستخدام الحمض النووي الريبي الحصول على خطوط خلايا السرطان المختلفة.

تكييف 3 ' التضخيم السريع من كدنا ينتهي إلى خريطة المحاضر في السرطان

يسمح هذا الأسلوب المنسدلة الجيش الملكي النيبالي بتحديد أهداف الجيش الملكي النيبالي رنا الطويل غير الترميز (لنكرنا). استناداً إلى التهجين للصنع، ومصممة بمعنى المضادة الحمض النووي اليغنوكليوتيد تحقيقات محددة لهذا لنكرنا في الأنسجة الثابتة على النحو المناسب أو خط الخلية، فإنه يسمح لكفاءة القبض على جميع أهداف الجيش الملكي النيبالي لنكرنا.

الجيش الملكي النيبالي المنسدلة الإجراء لتحديد أهداف الجيش الملكي النيبالي للجيش الملكي النيبالي منذ فترة طويلة غير الترميز

التعميم RNAs (circRNAs) هي غير الترميز RNAs التي قد يكون لها ادوار في التنظيم عبر المعاقين والتوسط التفاعلات بين البروتينات. بعد تقييم المعلمات المختلفة لبناء مكتبات التسلسل circRNA ، تم تجميع بروتوكول باستخدام مجموع تقطعت بهم السبل الجيش النيبالي اعداد المكتبة مع RNase R ما قبل العلاج ويرد هنا.

تحديد RNAs الدائري باستخدام تسلسل RNA

تسلسل الحمض النووي الريبي الكمي المطلق (AQRNA-seq) هو تقنية تم تطويرها لتحديد المناظر الطبيعية لجميع الحمض النووي الريبي الصغير في الخلائط البيولوجية. هنا ، يتم عرض كل من خطوات إعداد المكتبة ومعالجة البيانات الخاصة ب AQRNA-seq ، وتحديد التغيرات في تجمع الحمض النووي الريبي الناقل (tRNA) في المتفطرة البوفية BCG أثناء السكون الناجم عن الجوع.

AQRNA-seq لقياس كمية الحمض النووي الريبي الصغير

تعلم استخراج الحمض النووي الريبي من خلايا السلف العصبية باستخدام مجموعة بيو راد. توفر هذه الطريقة عوائد عالية ونتائج متسقة لدراسات علم الأعصاب والبيولوجيا الجزيئية.

استخراج خلايا الحمض النووي الريبي من Neuroprecursor باستخدام بيو راد إجمالي RNA كيت

استكشف المزيد من الفيديوهات