نوفمبر 11, 2012
تضخم Neointimal هو السبب الرئيسي للتضيق في شرايين arterialized. نقترح بروتوكول جديد يتم بمقتضاه المطعمة الحق حبل الوريد الخارجية باستخدام تقنية صفعة في الشريان السباتي المشترك من الفئران سبراغ داولي. كان معدل البقاء على قيد الحياة بنسبة 100٪ عند النقطة وقت التضحية.
تُعد فرط تنسج البطانة الداخلية (Neointimal hyperplasia) أحد الأسباب الرئيسية للتضيق في الأوردة التي يتم تحويلها إلى شرايين والمستخدمة في جراحات تحويل مسار الشرايين التاجية، وجراحات تحويل مسار الشرايين الطرفية، وكذلك في طعوم الأوردة للناسور الشرياني الوريدي. وقد تم إجراء عملية وضع طعم بيني في الشريان السباتي المشترك في العديد من المشاريع البحثية لدراسة مسببات فرط تنسج البطانة الداخلية والخيارات العلاجية المتاحة حالياً لمعالجتها. ومع ذلك، فإن التقنيات الجراحية المجهرية التقليدية التي تستخدم نماذج حيوانية صغيرة تتسم بالتعقيد والصعوبة، وتتطلب التضحية بعدد كبير من حيوانات التجارب لتبسيط الإجراء بأكمله.
يوضح هذا الفيديو بروتوكول تشغيل مفصلاً، والذي سيساعد الجراح المبتدئ في تعلم تقنية القطع ووضع طعم الوريد في موضع بيني في الشريان السباتي المشترك. تم تقسيم 21 من جرذان Sprague Dawley الإناث من مربٍ تجاري إلى ثلاث مجموعات متساوية، حيث أجريت لها العمليات الجراحية ثم تم التضحية بها في الأيام 21 و 42 و 84 على التوالي. تم تحريض التخدير العام للحيوانات باستخدام صندوق من البلكسي جلاس متصل بجهاز تخدير تم ضبطه على معدل تدفق أكسجين قدره 1 liter/minute ومبخر isoflurane مع غاز تخدير بنسبة 5%.
في هذا الشكل، يظهر العلماء قبل قطع العضلة القصية الترقوية الخشائية اليمنى. تظهر هنا الوريد الوداجي الخارجي. وهنا يظهر العلماء بعد قطع العضلة القصية الترقوية الخشائية اليمنى حيث يتضح الشريان السباتي المشترك الأيمن والعصب المبهم الأيمن.
خلال العملية التالية، يتم إجراء المفاغرة باستخدام تقنية الكم. يتم صنع هذه الكموم يدوياً من أنبوب بلاستيكي مقطوع بطول 3 mm. وتتكون هذه الكموم من جسم كم أنبوبي، يشمل الحجم الكامل للأنبوب البلاستيكي، ومقبض كم يتكون من نصف حجم الكم.
يتساوى طول كل من جسم الكفة ومقبض الكفة. يتم سحب الكفة فوق الشريان الكيراتيني المشترك. ويمكن ربط الوعاء الدموي ومقبض الكفة معاً بأمان باستخدام مشبك بولدوغ صغير (mini bulldog clamp).
بعد ذلك، يتم إبعاد الوعاء وسحبه فوق الجزء الخارجي من جسم الكم. ثم يتم تثبيته برباط حريري. وبهذه الطريقة، يتم تغطية تجويف الكوب بالبطانة الغشائية.
يمكن تمرير الطعم الوريدي فوق كلا طرفي الشريان السباتي المشترك المفتوحين وتثبيته باستخدام رباط حريري. ولمنع تكون الخثرات، خاصة في المفاغرة القاصية، من الضروري ربط الطعم الوريدي بالقرب الشديد من حافة الغطاء لتجنب ملامسة الدم للرباط الذي يثبت الشريان في مكانه. يتم إجراء شق عنقي وسطي بطول 2.5 سنتيمتر مباشرة فوق القص وإلى الجانب من العضلة القصية الترقوية الخشائية. ويمكن رؤية الوريد الوداجي الخارجي العريض، وهو مفصول تماماً عن الأنسجة المحيطة.
يمكنكم رؤية الوريد الوداجي الخارجي بعد تحريره بالكامل، حيث تم ربط الروافد الوريدية بخيوط حريرية مقاس 7-0. يتم هنا تحضير العضلة القصية الترقوية الخشائية بعد قطع العضلة القصية الترقوية الخشائية. يمكنكم الآن رؤية الشريان السباتي المشترك الأيمن.
يتم تحضير الشريان السباتي المشترك بعناية مع التأكد من عدم الضغط على الشريان أو العصب الحائر، والآن يمكنك رؤية الشريان السباتي المشترك بطوله الكامل. ثم يتم ربطه مرتين في المنتصف باستخدام غرز حريرية مقاس 7-0. بعد ذلك، يتم قطع الشريان السباتي المشترك تماماً بين الربطتين.
يتم بعد ذلك تمرير سوار نايلون يتكون من جسم ومقبض فوق الطرف القاصي للشريان السباتي المشترك، بحيث يقع مقبض السوار خلف الوعاء الدموي. ثم يتم تثبيت الطرف المزود بالسوار من الشريان السباتي المشترك القاصي باستخدام مشبك بولدوغ صغير (mini bulldog clamp) مباشرة فوق مقبض السوار، وذلك لضمان الاستقرار.
بعد ذلك، يتم قطع الشريان مباشرة خلف الرباط بحيث يكون طول الجذع الشرياني الناتج مساوياً لطول جسم الكم. ثم يُشطف لمع الشريان بمحلول ملحي يحتوي على الهيبارين. بعد ذلك، يتم تنحية حلقة الربط جانباً.
مباشرة بعد ذلك، يتم سحب الجذع الشرياني وإدخاله ككم فوق جسم الرباط. لاحقاً، يتم سحب حلقة الربط بإحكام وعقدها لمنع الشريان من الانزلاق خارج كمه. نستخدم حيلة يتم فيها قرص كل من جدار الشريان وخيط الجراحة في آن واحد باستخدام ملقط، بينما يقوم الملقط الأيسر بعقد العقدة.
بعد ذلك، يتم تكرار الإجراء نفسه للجذع الشرياني القريب عن طريق إدخال الكفة فوق الطرف القريب من الشريان السباتي المشترك ذو الكفة، ثم القيام بعمليات الربط، وقطع الشريان، والشطف، ووضع حلقة الربط فوق الجذع الشرياني، وإدخال الجذع الشرياني فوق الكفة، وأخيرًا عقد حلقة الربط. يتم استئصال قطعة بطول 1 cm من الوريد الوداجي الخارجي المربوط. يكون الشريانان ذوا الكفات متباعدين جدًا بحيث لا يمكن للطرف الوريدي البيني أن يقرب المسافة الصحيحة المطلوبة للإجراء.
يتم لف خيط جراحي من نوع Vicryl بمقاس 3-0 حول كل ملقط bulldog صغير، ثم يتم تقاطع الخيطين فوق بعضهما البعض. بعد ذلك، يتم سحب الخيوط في اتجاهين متعاكسين، مما يسمح بالوضع الصحيح للجذوع الشريانية المقوسة. ثم يتم الشطف باستخدام محلول ملحي يحتوي على الهيبارين.
بمجرد لف الغرزة حول الشريان الكهرماني القاصي المقيد، يتم تمرير أحد طرفي قطعة الوريد المقلوبة والمغسولة فوق الشريان الكهرماني القاصي المقيد. بعد ذلك، يتم عقد الغرزة في الموضع الصحيح. ومن المهم هنا التأكد من أن الربط يشمل كامل محيط الرقعة الوريدية.
الآن يتم شطف قطعة الوريد مرة أخرى بمحلول ملحي يحتوي على الهيبارين، ثم يتم تمرير الطرف الآخر من قطعة الوريد فوق جذع الشريان الكيراتيني القريب. بعد ذلك، يتم إتمام الربط. يمكنك هنا رؤية طعم التداخل الوريدي المكتمل.
بعد ذلك، يتم إزالة ملقطي البولدوج الصغيرين؛ أولاً الملقط القاصي ثم الملقط الداني. وفي النهاية، يصبح طعم التداخل الوريدي للشريان في موضعه.
يمكن ملاحظة النبض في الشريان السباتي المشترك والطعم الوريدي. بعد إزالة الملاقط المستخدمة لإغلاق الجرح، يتم إجراء غرزة تحت جلدية مستمرة باستخدام خيط Vicryl 4-0، بينما تُستخدم غرزة Vicryl 3-0 للخياطة الجلدية المستمرة. استعادت الحيوانات عافيتها على فراش ورقي مسطح تحت مصباح تدفئة يعمل بالأشعة تحت الحمراء.
حُقنت الحيوانات بعد الجراحة بمحلول ملحي يحتوي على النورفين بتركيز يتراوح بين 0.03 إلى 0.05 مليغرام لكل كيلوغرام من وزن الجسم عن طريق الحقن تحت الجلد كل ثماني إلى 12 ساعة لمدة يومين، وبقيت جميع الحيوانات على قيد الحياة بنسبة 100% حتى وقت التضحية. علاوة على ذلك، بلغت نسبة نفاذية الطعم 60% لأول 10 حيوانات خضعت للعملية و82% للحيوانات الـ 11 المتبقية. وكان تدفق الدم في وقت التضحية ثمانية زائد أو ناقص ثلاثة ملي لتر في الدقيقة.
باستخدام تقنية الغمد (cuff technique)، يمكن إجراء مفاغرة للأوعية ذات الأقطار اللمعية المختلفة. ومن المهم ربط المحيط الكامل للأوعية المغممدة وأوعية TED لتجنب حدوث نزيف بعد إعادة التروية. ولمنع تشكل الخثرة، خاصة في المفاغرة القاصية، من الضروري تثبيت رباط الطعم الوريدي بالقرب الشديد من حافة الغمد لتجنب ملامسة الدم للرباط الذي يثبت الشريان في مكانه.
يعد هذا النموذج مناسباً جداً لمحاكاة الديناميكا الدموية التي تتميز بسرعة تدفق دم عالية وإجهاد قص منخفض، ولدراسة الآليات التي تؤثر على تطور فرط تنسج البطانة الداخلية. وبخلاف الإجراء الذي يستخدم الوريد الأجوف كطعم، فإن عملية الزرع الذاتي هذه باستخدام الوريد الوداجي الخارجي كطعم تقلل من عدد الحيوانات التجريبية المطلوبة إلى النصف. وفي الختام، فإن تداخل طعم من الوريد الوداجي الخارجي في الشريان السباتي المشترك يمثل تقنية جراحية مجهرية متطورة.
يساعد هذا الفيديو جراح Sonata على إتقان هذه العملية في أقل وقت ممكن مع تقليل هدر الحيوانات التجريبية. ويعد هذا النموذج وسيلة ممتازة للجراحين المبتدئين لممارسة تقنية cuff المستخدمة حالياً في زراعة الأعضاء الصلبة في الحيوانات الصغيرة.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تقدم هذه الدراسة بروتوكولاً جديداً لتطعيم الوريد الوداجي الخارجي الأيمن باستخدام تقنية الكم (cuff technique) في الشريان السباتي المشترك لجرذان Sprague Dawley. يهدف هذا النهج إلى تبسيط الإجراء الجراحي وتحسين النتائج المتعلقة بتضخم البطانة الجديدة، وهو سبب رئيسي للتضيق في الأوردة التي يتم تحويلها إلى شرايين.
يتناول هذا البروتوكول للجراحة المجهرية تحدياً رئيسياً في أبحاث الأوعية الدموية: وهو نمذجة فرط تنسج البطانة الداخلية (neointimal hyperplasia) في الطعوم الوريدية التي تحولت إلى شرايين، وهي سبب رئيسي للتضيق في جراحات المجازة التاجية والمحيطية والناسور الشرياني الوريدي. ومن خلال تبسيط عملية وضع الوريد الوداجي الخارجي البيني في الشريان السباتي للجرذ باستخدام تقنية الغمد (cuff technique)، تساهم هذه الطريقة في تقليل عدد الحيوانات المستخدمة وتحسين توحيد الإجراءات. وهذا يدعم التحقق من الأهداف قبل السريرية وتقليل المخاطر الميكانيكية في تطوير العلاجات القلبية الوعائية.
تندرج هذه الطريقة ضمن تسلسل مراحل الاكتشاف وصولاً إلى المرحلة ما قبل السريرية، وذلك من خلال توفير نظام ذي صلة بالمرض لتقييم آليات فرط تنسج البطانة الداخلية، مما يتيح تحديد المركبات الرائدة عبر التحقق الوظيفي من الطعوم الوعائية، ويدعم تحسين النماذج ما قبل السريرية من خلال التنفيذ الجراحي الموحد.