Name: زراعة كبد في الفئران (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 25 s
Description: تعلم تقنية زراعة الكبد الارتجاعية في الجرذان لتحسين كفاءة الزراعة الجراحية. تقدم هذه الطريقة خطوات مفصلة لربط الأوعية الدموية مع الحفاظ على سلامة الزرع.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وأيد CT من قبل مؤسسة العلوم الوطنية السويسرية (التقييم منحة 3232230-126233). الدراسة كانت مدعومة من قبل مؤسسة Artères، ومؤسسة أوروبا Astellas ومؤسسة Boninchi.

1. الجهات المانحة عملية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران الذكور وزنها 200 ± 20 غراما مع isoflurane على قناع مخروط (3٪ للتحريض، 2٪ خلال هذه العملية، 1 تدفق الهواء لتر / دقيقة، FiO2 70٪). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنفيذ عملية فتح البطن كبير متوسط ​​والعرضي وكوى للسفن شرسوفي على كلا الجانبين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع في الرباط المنجلي، وفصل الوريد اليسار حجابي من suprehepatic الوريد الأجوف. أخيرا، تقسيم الوريد البطني بين اثنين من اربطة الحرير 7-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع مثلثة اليسار والأربطة المعدي الكبدي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقسيم الرباط أمراض الكبد والمريء والشرايين بين 7-0 الحروف المركبة (تجلط الدم هو بديل صالح). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل infrahepatic الوريد الأجوف وصولا الى الوريد الكلوي الأيسر. فصل الوريد الكلوي الأيمن من الأنسجة المحيطة بها وتقسيمها بين 10-0 وضمد 7-0، في أهدافها القريبة والبعيدة، على التوالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يقسم اليمين الوريد الكظري بين 7-0 ligaturوفاق وحرة الكبد من أربطتها الخلفي عن طريق خفض تحت الجر لطيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الوريد المعدي وتقسيمه بين 10-0 وضمد 7-0، في أهدافها القريبة والبعيدة، على التوالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يقسم الشريان الكبدي السليم بين 7-0 العلاقات بين البلدين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الوريد الإثناعشري البنكرياس وتقسيمها بين 10-0 وضمد 7-0، في نهايته القريبة والبعيدة، على التوالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اضافة الى وجود 22G، الدعامة 3.5 ملم في القناة الصفراوية المشتركة من خلال ممارسة شق صغير على مسافة 1 سم من نقير الكبد. تأمين الدعامات في موقف مع ربطة 7-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن 10 واجهة المستخدم للهيبارين، تضعف إلى 1 مل من ملحي عادي، عن طريق الوريد الظهري للقضيب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يقني؛ يدخل القنية في الوريد بورتا (قدر الإمكان من نقير) بإبرة 21G وطرد بلطف الكبد مع 20 مل من اللاكتات المسابقة الباردة (أو الحلول الحفاظ أخرى). في الوقت نفسه، قطع الوريد الأجوف دون الأوردة الكلوية للسماح لoutfl كافآه. وينبغي أن تستمر تروية الكبد الباردة بين واحد ودقيقتين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع بورتا الوريد تحت الوريد الإثناعشري البنكرياس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع القناة الصفراوية المشتركة بشكل أقصى للرباط حول الدعامات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استكمال شق من infrahepatic الوريد الأجوف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع فوق الكبد الوريد الأجوف الخالي من الدسم إلى الحجاب الحاجز وإزالة الكبد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الكبد في حوض مليء اكتات المسابقة الباردة، ووضع حوض على وسادة الجليد. </li></ol> 2. الكسب غير المشروع التحضير <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج بورتا الوريد إلى صفعة لها، ثم يقلب للخارج السفينة حول حافة لفضح البطانية. تأمين قطعة مقلوبة على الكفة مع ربطة 7-0. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر نفس العملية على infrahepatic الوريد الأجوف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع المشبك الصغيرة (4-6 ملم طول) على الجزء القريب من infrahepatic الوريد الأجوف. هذه العملية تجنب فقدان الدم بعد ضخه المدخل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قلب والكبد وإدراج اثنين البرولين 8-0 الغرزفي حواف جانبية الآخر من فوق الكبد الوريد الأجوف، من الخارج إلى الداخل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخزين الكسب غير المشروع (منغمسين في حل اكتات الجرس) في الثلاجة على 0-4 درجة مئوية. </li></ol> 3. المتلقي عملية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران الذكور وزنها 200 ± 20 غراما مع isoflurane على قناع مخروط (3٪ للتحريض، 2٪ خلال هذه العملية، 1 تدفق الهواء لتر / دقيقة، FiO2٪ 70) والحفاظ على وسادة دافئة. من المذكرة، يجب أن تكون مطابقة المتلقية والمانحة الأوزان (± 40 غراما). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن 10 مل من المياه المالحة تحت الجلد الطبيعي و 0.03 غرام من بيبيراسيلين / tazobactam العضلي قبل البطن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنفيذ خط الوسط الرهابة-العانة البطن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عكس عملية الخنجري مع ملقط لصناعة السيارات في ثابت من أجل فضح أفضل الكبد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع الأربطة الأمامية وتقسيم الوريد اليسار حجابي بين 7-0 علاقات البلدين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقسيم الرباط أمراض الكبد والمريء والشرايين بين 7-0 الحروف المركبة (coagulation هو بديل صالح). لا يظهر في شريط الفيديو (مماثلة لعملية المانحة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل infrahepatic الوريد الأجوف وصولا الى الوريد الكلوي الأيمن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يقسم اليمين الوريد الكظري بين 7-0 الحروف المركبة وحرة الكبد من أربطتها الخلفي عن طريق خفض تحت الجر لطيف (لا يظهر في شريط الفيديو (مماثلة لعملية المانحة)). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع رباط 7-0 حول القناة الصفراوية المشتركة، وأقل بقليل من تقسيم لها. وضع رباط آخر ملليمتر واحد دون وقطع بينهما. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عزل الشريان الكبدي في نقير وتقسيمه بين 7-0 الحروف المركبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فصل بلطف فروع بوابة اليسار واليمين. الاهتمام على عدم الاضرار الشريان الكبدي شائع أو الوريد المعدي الطحال. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع حلقة حول الأجوف الوريد الأجوف، cranially إلى الوريد الكلوي الأيمن. ثم تأمين جدار الوعاء الدموي إلى الحلبة عن طريق وضع الأربعة الأساسية 9-0 الغرز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر نفس العملية مع عصابة بوابة على باب الوريد. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن 10 واجهة المستخدم للهيبارين، تضعف إلى 1 مل من ملحي عادي، عن طريق الوريد الظهري للقضيب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين التخدير على 0.25٪ وFiO2 على 100٪. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المشبك infrahepatic الوريد الأجوف فقط فوق الوريد الكلوي حق، المشبك ثم بورتا الوريد فقط فوق الوريد المعدي الطحال. المشبك في نهاية المطاف فوق الكبد الوريد الأجوف يجري التأكد من وتشمل ما لا يقل عن 2 ملم من الحجاب الحاجز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع ختام فوق الكبد الوريد الأجوف في لحمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع اليسار واليمين فروع بوابة وتقسيم الحاجز بينهما. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع ختام infrahepatic الوريد الأجوف في لحمة، مع إيلاء اهتمام ليس إلى شق أي من الغرز وضعه سابقا. إزالة الكبد ووضع الكسب غير المشروع داخل تجويف البطن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء مفاغرة نهاية إلى نهاية بين الوريد الأجوف فوق الكبد من الكسب غير المشروع والمتلقي. تبدأ مع خياطة تشغيل الجدار الخلفي من اليسار إلى اليمين، ثم المضي قدما على الجدار الأمامي من اليمين إلى جنيهقدم حافظ على الخيط الأمامي فضفاض حتى نهاية من أجل السماح لاحمرار سخي من التجويف الداخلي قبل تشديد الغايات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج فرع الذيلية للمقراب في التعامل مع حلقة البوابة، ثم أدخل بورتا الوريد من الكسب غير المشروع في شق فرع الجمجمة من مقراب، مع الكفة بوابة العثور على موقفها في الفتحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق مقراب بينما بيغ المستلم الوريد بورتا مع ملحي عادي، والسماح للالكفة لتضاف الى السفينة. تأمين المستلم الوريد بورتا حول صفعة له بالتعادل 7-0 كفافي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة مقراب. فتح المشبك على الوريد الأجوف فوق الكبد والوريد بورتا في النظام: يتم الآن تدفق بوابة إعادة تأسيس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة خاتم بوابة عبر خفض الحروف المركبة 9-0 مع غرامة خارج مقص. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج فرع الذيلية للمقراب في التعامل مع حلقة الأجوف، ثم أدخل infrahepatic الوريد الأجوف من الكسب غير المشروع في شق من الجمجمة<html> فرع للمقراب، مع الكفة الأجوف إيجاد موقفها في الفتحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق مقراب بينما بيغ المستلم infrahepatic الوريد الأجوف مع ملحي عادي، والسماح للالكفة لتضاف الى السفينة. تأمين المستلم الوريد الأجوف حول صفعة له بالتعادل 7-0 كفافي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة مقراب. فتح microclamps على infrahepatic الوريد الأجوف من الكسب غير المشروع والمتلقي في النظام: يتم الآن اعادة تدفق الوريدي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء شق جزئي من قناة المستلم الصفراوية المشتركة، وتطبيق الجر لطيف نحو رأسه، وإدراج الجانب خالية من دعامات سابقا في القناة الصفراوية من الكسب غير المشروع. تأمين الدعامات بالتعادل 7-0 كفافي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق حيوان من قبل الطبقات 5-0 مع الغرز. تسمح للماء والغذاء المجاني من الإيقاظ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة فعالة للوعي وفقا لبروتوكولات المؤسسية المحلية. ينصح مدة لا تقل عن 24 ساعة. </li></ol>_content &quot;&gt; من ملاحظة: لا يمكن أن يؤديها نهاية إلى نهاية مفاغرة الشريان الكبدي، وعندما يطلبها التصميم التجريبي (غير مطلوب في الشريان عن البقاء على المدى الطويل بعد جرذ زراعة الكبد). 4. ممثل النتائج ويمكن وصف هذه التقنية بنجاح من قبل أتقن فريق العمل لدينا بعد العمليات الجراحية تدريب ما يقرب من 10. سمح لها بنسبة 100٪ على المدى الطويل (&gt; 21 يوما) البقاء على قيد الحياة على 36 على التوالي لويس لويس، وإلى زرع الظلام الأغوطي إلى لويس، وبعد فترة تدريب قصيرة (عدد من المتلقين مسانج الكسب غير المشروع الكبد ظلت على قيد الحياة لأكثر من 12 أشهر من الآن). وأظهرت بعد مسانج زرع يوم اختبارات وظائف الكبد 1 متوسط ​​ناقلة اسبارتاتي (است): 84 U / L (51،7-92،7) ناقلة ألانين وسيطة (البديل): 172،5 يو / لتر (127،5-240،2). كانت المرحلة anhepatic المتوسط ​​(من الوريد بورتا تحامل على الكسب غير المشروع إعادة التروية) 14 ± 2 دقيقة، مع أطول خطوة كونها فوق الكبد الوريد الأجوف مفاغرة (تشغيل قuture) الساعة 9 ± 2 دقيقة. سمح للنظام سريع رابط المواقع من الأصفاد مم الجوف 1.55 في بورتا الوريد و2،40 ملم الجوف الأصفاد في الوريد الأجوف (المستفيدين يبلغ وزنها 200 ± 20 غراما). على النقيض من ذلك، عندما حاولنا زرع باستخدام تقنية Kamada، وأنها لا يمكن أن يتجاوز 1،40 ملم و 2،16 ملم، على التوالي (الفئران مطابقة لسلالة والوزن). كما هو مبين في الشكل 7، فقد تم تصميم سريع رابط حلقات للحفاظ على السفن المستلم على النحو الأمثل وتمتد، والسماح الفرجار الحد الأدنى والهزال طول، والذي ينتج في أقرب إلى الفسيولوجية نتائج الدورة الدموية. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> الشكل 1. خواتم التدابير. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig2.jpg" alt="الشكل 2" /> الشكل 2. Microclamps التدابير. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig3.jpg" alt="الشكل (3)" /> الشكل 3. سريعة رابط عدة. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig4.jpg" alt="الشكل 4" /> الشكل 4. سريعة رابط المسلحة. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig5.jpg" alt="الشكل 5" /> الشكل 5. سريعة رابط مغلقة. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig6.jpg" alt="الشكل (6)" /> الشكل 6. المشبك SHVC. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig7.jpg" alt="الشكل 7" /> الشكل 7. كلاسيك مقابل رابط سريع بمساعدة الكفة-مفاغرة ديناميكا الدم. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig8.jpg" alt="الشكل 8" /> الرقم 8. المانحة وإعداد المستلم شق الجلد و.

<ol><li>Starzl, T. E., Marchioro, T. L., Porter, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+clinical+observation+after+homotransplantation+of+the+whole+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Revue+internationale+d%27hepatologie%22%5BJournal%5D)">Experimental and clinical observation after homotransplantation of the whole liver.</a> Revue internationale d'hepatologie. 15, 1447(1965).</li>
<li>Starzl, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Evolution of liver transplantation.</a> Hepatology. 2, 614S-636S (1982).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47(1979).</li>
<li>Kashfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+proceedings%22%5BJournal%5D)">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation proceedings. 37, 185-188 (2005).</li>
<li>Hori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats%3A+A+surgical+guide%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%3A+WJG%22%5BJournal%5D)">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology: WJG. 16, 3120(2010).</li>
<li>Oldani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system%3A+a+preliminary+result%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li>
<li>Nosaka, T., Bowers, J. L., Cay, O., Clouse, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Today%22%5BJournal%5D)">Biliary complications after orthotopic liver transplantation in rats.</a> Surg. Today. 29, 963-965 (1999).</li>
<li>Li, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+incidence+of+biliary+complications+in+rat+liver+transplantation%3A+can+we+avoid+it%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">High incidence of biliary complications in rat liver transplantation: can we avoid it.</a> World J. Gastroenterol. 17, 3140-3144 (2011).</li>
<li>Peng, Y., Gong, J. P., Yan, L. N., Li, S. B., Li, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+two-cuff+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatobiliary+Pancreat.+Dis.+Int%22%5BJournal%5D)">Improved two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.</a> Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int. 3, 33-37 (2004).</li>
<li>Urata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+survival+in+rat+liver+transplantation+with+extended+cold+preservation%3A+role+of+portal+vein+clamping+time%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clamping time.</a> Hepatology. 28, 366-373 (1998).</li>
</ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

ويمكن للكبد الفئران الحالي نموذج زرع المنشأة بسهولة. في تجربتنا، وهي النقاط الرئيسية القليلة تساعد على الحد من خطر الموت (≤ 20٪). من الوفيات المبكرة، التي تحدث في غضون الساعات الثلاث الأولى من ضخه، هي في معظم الأحيان بسبب وجود احتشاء الأمعاء، نتيجة لمدخل طويل تحامل. ولذلك يوصى للحفاظ على المرحلة anhepatic ضمن الحد المثالي من 15 دقيقة (20 دقيقة مقبول لا يزال). ويمكن تكييف مركزي الانسداد أيضا أن يكون سبب الوفاة المفاجئة وغير إلزامي لطرد جميع الأوردة قبل التفمم. حالة وفاة تحدث بين يوم واحد وثلاثة بعد العملية الجراحية وغالبا ما تكون بسبب فشل الكبد أو تخثر من الوريد الأجوف. ولذلك ينبغي للمرء تجنب أي الكسب غير المشروع العدواني التنظيف قبل explantation في الجهة المانحة (ونحن مع تدفق أكثر من 20 مل ما يقرب من 60 ثانية) وضمان الحفاظ المناسب الباردة (الغمر الكامل في 0-4 درجة مئوية اكتات المسابقة الحل). من مخاطر الجلطةويمكن انخفضت عن طريق التقليل من التلاعب في البطانية والحفاظ على سلامتها. لا نوصي باستخدام منع تخثر الدم بعد عملية جراحية. وغالبا ما ترتبط حالة وفاة بين يوم بعد العملية الجراحية أربعة وتسعة إلى الأقنية الصفراوية البكتيرية 7. بناء على خبرتنا، جرعة واحدة من piperacilline / tazobactam (0.03 ز) نظرا قبل البطن ما يكفي للحد من مخاطر عدوى قناة الصفراوية المشتركة. الموت هو حدث نادر بعد 10 أيام. ولكن نظرا لعدم وجود تدفق شرياني، يمكن ملاحظة بعض المشاكل مع القناة الصفراوية cholastasis 8. قد اعتمادا على احتياجات المحقق أن يعتبر arterialization 9. من الملاحظة، يمكن اعتبار وقت نقص التروية الباردة تصل إلى 24 ساعة إلى 10 مقبول. وقد صممت في الأصل لنظام سريع رابط لأداء زرع الكبد مع anastomoses الكفة ثلاثة (قصيرة جدا المرحلة anhepatic). ومع ذلك، فإن الشركة المصرية للاتصالات لمدة ثلاثة الكفةchnique يتطلب استخدام الفرجار صغيرة جدا لصفعة الوريد فوق الكبد (SHVC) الأجوف، وأنها لم تحظى بقبول واسع نظرا لخطر التعرض لمشاكل في الكبد تدفق 11-14. نؤيد بالتالي سريعة رابط بمساعدة ثلاثة الكفة تقنية فقط عندما يطلب من الأوقات الإسكيمية دافئ أقصر من عشر دقائق. في معظم الدراسات مع ذلك، مراحل زراعة ما يصل الى 15-18 دقيقة ومقبولة، مما يتيح استخدام تقنية ثنائية الكفة، والصرف الصحي أكثر الفسيولوجية SHVC. كما هو مبين في هذه الورقة الفيديو، ونحن نستخدم بشكل روتيني لنظام سريع رابط في الجزء الثاني من غرس فقط. في حين يلزم بعض الوقت الاضافي جراحية لوضع مقابض سريعة رابط، ويرتبط هذا الجزء من الإجراء مع الحد الأدنى من المخاطر، ويسمح لتقصير من شكر anhepatic المرحلة الحرجة إلى الإدراج أسهل الأصفاد. المزايا الأخرى للنظام سريع رابط أفضل محاذاة سفينة الكسب غير المشروع والجهات المستفيدة، واستخدام الأصفاد على نطاق أوسع مع نتائج أفضل مقارنة مع الدورة الدمويةسبق وصفها تقنيات (بما في ذلك واحد التي وصفها Kamada وآخرون.) 6 (الشكل رقم 7).

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> أداة / الكاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج ن. </td><td> تعليق </td></tr><tr><td> بوابة الكفة </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> أو <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">الحدادون medical.com-</a> </td><td> لفائف 01-96-1729 800/100/420 </td><td> الجوف: 1.55mm الجدار: 0.30mm مدة العرض: 3.5 ملم </td></tr><tr><td> صفعة Infrahepatic ضد الأجوف </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> أو <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">الحدادون medical.com-</a> </td><td> لفائف 01-96-1733 800/100/540 </td><td> الجوف: 2.40mm الجدار: 0.30mm <br/&gt; الطول: 3.5 ملم </td></tr><tr><td> مشترك الدعامة القناة الصفراوية </td><td> مشترك 22G venflon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> العلاقات الحرير 7-0 </td><td> <a href="http://georgetiemann.com" target="_blank">georgetiemann.com</a> </td><td> 160-1226-7 / 0 </td><td></td></tr><tr><td> 10-0 البرولين </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 9-0 البرولين </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 8-0 البرولين </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> الملقط الصغير على التوالي </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">S-و-T</a>. صافي </td><td> FRC-15RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> الملقط الصغير المنحني </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">S-و-t.net</a> </td><td> FRS-15-RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> إبرة تشريح حامل </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">S-و-t.net</a> </td><td> B-15-8،2 </td><td></td></tr><tr><td> مفاغرة إبرة حامل </td><td> <a href="http://rumex.net" target="_blank">rumex.net</a> </td><td> 8-021T </td><td></td></tr><tr><td> المشابك الصغيرة </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18055-03 </td><td> 6 × 1MM </td></tr><tr><td> المشابك الصغيرة قضيب </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18057-14 </td><td></td></tr&gt; <tr><td> فوق الكبد ضد الأجوف المشبك </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> 13.349.14 </td><td></td></tr><tr><td> سريع رابط حلقات </td><td> <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchiropody.co.uk</a> </td><td> PAR 10 </td><td> مشرط شفرات تعديل </td></tr><tr><td> سريع رابط مقراب </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> UD-04-275 </td><td> تعديل كوخر forcep </td></tr></tbody></table>

زراعة كبد في الفئران

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

وقد تم إحراز تقدم السريرية في مجال زراعة الكبد بتأييد واسع 1،2 النماذج الحيوانية. منذ نشر أول orthotopic فأر زرع الكبد في عام 1979 من قبل Kamada وآخرون. 3، وظل هذا النموذج معيار الذهب على الرغم من مختلف التقنيات البديلة المقترحة 4. ومع ذلك، ويقتصر استخدام أوسع نطاقا من خلال منحنى التعلم حاد 5. في هذه الورقة الفيديو، وتبين لنا مراجعة بسيطة وسهلة لإنشاء، من تقنية ثنائية الكفة Kamada ل. يتم تنفيذ فوق الكبد الوريد الأجوف مفاغرة يدويا مع الدرز على التوالي، ويتم تنفيذ بورتا الوريد والوريد الأجوف infrahepatic anastomoses الاستفادة من وجود نظام صفعة سريعة رابط 6. تصنيع عدة سريعة رابط ويرد في ورقة منفصلة الفيديو.

نقدم تنقيحا سهلة لوضع هذه التقنية اثنين الكفة الكلاسيكية لزرع الكبد orthotopic في الفئران.

لقد حظي التقدم السريري في مجال زراعة الكبد بدعم كبير من النماذج الحيوانية1,2. ومنذ نشر أول عملية زراعة كبد في الموضع الطبيعي للجرذان...

تُعد عملية زرع الكبد في الموضع الصحيح في الجرذ إجراءً متطلبًا يستلزم تدريبًا في الجراحة المجهرية للرئة لإتقانه بشكل صحيح. وتعتبر الدقة والسرعة، خاصة خلال مرحلة الزرع، هما مفتاحا النجاح. سنكشف في الفيديوهات التالية عن كل خطوة أساسية لعملية زرع ناجحة، ونوضح كيف يمكن لجهاز سريري سريع أن يسهل مرحلة الزرع.استمتع بمشاهدة الفيديوهات. يتم فتح المتبرع عبر شق مستعرض. يتم قطع الرباط المنجلي وتعريض الوريد الأجوف السفلي.يتم فصل الوريد الحجابي الأيسر عن الوريد الأجوف، ثم يُقسم بين ربطتين من الحرير 7-0. يتم قطع الرباط العظمي الغازي، ثم يُقسم الرباط المريئي بين ربطتين. يتم كشف الوريد الأجوف السفلي عن طريق سحب الأمعاء الدقيقة والغليظة برفق.في الجانب الأيسر، يتم فتح الصفاق وتحرير الوريد الأجوف بعناية من الأنسجة المحيطة. يتم عزل الوريد الكظري الأيمن ثم قطعه بين ربطتين من خيوط الربط. يتم سحب الكبد نحو الجانب الأيسر والإبقاء عليه برفق تحت الشد.يتم قطع الأربطة الكبدية الخلفية والمثلثية اليمنى. يتم ربط الوريد الكلوي الأيمن من نهايته القريبة باستخدام رباط نايلون 10 oh. يتم ربط الوريد والشريان الكلوي الأيمن معاً عند نهايتهما البعيدة، ثم يتم تقسيم الوريد الكلوي الأيمن.يظهر هنا عرض عام للوريد الأجوف السفلي المعزول تماماً. عرض عام للتشريح الإقليمي لسرة الكبد والوريد البابي، والشريان الكبدي الخاص، والقناة الصفراوية المشتركة، والوريد الطحالي المعدي. غدة البنكرياس.يتم عزل الوريد المعدي الطحالي وقسمه بين ربطتين من خيوط 10 oh و 7 oh. يتم قطع الشريان الكبدي العلوي بين ربطتين من خيوط 7 oh. وأخيراً، يتم قسم الوريد البنكرياسي.تظهر نظرة عامة على الوريد البابي المعزول. تم فتح القناة الصفراوية المشتركة جزئيًا عند نقطة التقائها بنسيج البنكرياس. تم إدخال دعامة 22 G بقطر 3.5 مليمتر وتثبيتها بإحكام.يتم حقن 10 units من heparin. بعد ذلك، يتم غسل الكبد عبر vena porter باستخدام 20 milliliter من محلول ringer lactate المبرد، بينما يتم شق distal vena cava للسماح بتدفق خارجي كافٍ، ويُقطع vena porter عند طرفه القاصي، ويتم إكمال قسم common bowel duct. ثم يُقطع hepatic vena cava عند طرفه القاصي، بينما يُقطع supra hepatic vena cava وصولاً إلى الحجاب الحاجز الذي يتم إزالته وغمره في محلول ringer lactate عند درجة حرارة 4 °C.يتم إدخال الوريد البابي في وريده الأجوف السفلي، ثم يتم تحويل مساره لتعريض الطبقة الباطنة، وأخيراً يتم تثبيته على الوريد الأجوف السفلي باستخدام رباط 7-0. ويتم تكرار العملية نفسها على الوريد الأجوف السفلي المقابل. ثم يتم وضع مشبك دقيق على الجزء القحفي للغاية من الوريد الأجوف السفلي المقابل.يتم قلب الكبد وتمرير غرزتين من البرولين (ATO prolene) عند الحواف الجانبية المتقابلة للوريد الأجوف السفلي من الخارج إلى الداخل. يُبقى المتلقي تحت تخدير الـ Isof. Fluor على وسادة تدفئة، مع حقن 10 milliliters من المحلول الملحي الفسيولوجي تحت الجلد قبل عملية فتح البطن. يتم إجراء شق في خط المنتصف فوق العانة، ويتم إمالة الرحم للخلف من أجل كشف الكبد بشكل أفضل.يتم تأمين القناة الصفراوية المشتركة برباط 7-0، ثم تُقطع مباشرة قبل تفرعها إلى اليمين واليسار. يتم فصل الفروع البابية بدقة. ثم يوضع حلقة الوريد الأجوف حول الوريد الأجوف تحت مستوى الوريد الكلوي الأيسر.يتم تمرير غرزة أولى من نوع 9-0 عبر جدار الوعاء الدموي عند حافته اليمنى، ثم يتم تثبيتها في الحلقة الوريدية في الموضع المحدد مسبقاً. تُمرر غرزة ثانية عبر الحافة المقابلة ويتم تثبيتها. أما الغرزة الثالثة فيتم تثبيتها في الموضع البطني.وأخيرًا، يتم تثبيت الغرزة الرابعة في الوضع الظهري. وبعد قلب الحلقة على الجانب الأيسر، يتم تمرير الغرزة الأولى عبر الجدار الخلفي عن طريق رفع الوعاء الدموي. ثم يتم وضع حلقة الباب وتثبيت الربطة في فرعها الخلفي.يتم تمرير غرزة ثانية عبر حافة فرع البوابة الأيسر وتثبيتها، ثم تُثبت الغرزة الثالثة في حافة فرع البوابة الأيمن. وأخيراً، تخترق الغرزة الأخيرة الجدار الأمامي للبوابة وتُثبت في موضعها قبل عملية الكبس.يتم إجراء تنظيف أخير للوريد الأجوف السفلي في مسار الوريد الأجوف. يتم وضع مشابك عرضية على الوريد الأجوف والوريد البابي بالتتابع. بعد ذلك، يتم وضع مشبك عرضي على الوريد الأجوف السفلي وعمله شقاً وصولاً إلى النسيج الحشوي. تُقطع الفروع البابية اليمنى واليسرى، ويتم تقسيم الحاجز الفاصل بينهما، ثم يُقطع الوريد الأجوف السفلي وصولاً إلى النسيج الحشوي. أخيراً، يتم استئصال الكبد.يتم الحفاظ على بقاء الوريد الأجوف السفلي والوريد البابي مفتوحين بأمان بواسطة الحلقتين. يُوضع الطعم في التجويف البطني، ويتم تثبيت غرزة NATO في الحافة اليسرى من الوريد الأجوف. ثم تُثبت غرزة ثانية في الحافة اليمنى.يتم إجراء الخياطة الإيرانية للجدار الخلفي من اليسار إلى اليمين، وذلك لتجنب تضمين برنشيمة الكبد في الغرز. ويتم ترك خياطة الجدار الأمامي مرتخية للسماح بعملية غسيل وافية قبل الإغلاق التام. وتساعد هذه المناورة في تجنب حدوث الانصمام الهوائي.يتم إدخال فرع التثبيت في مقبض الحلقة البوابية، ثم يتم إدخال العجل البوابي من خلال الشق الموجود في فرعه القحفي. يتم شطف الوريد البوابي للمستقبل بمحلول ملحي طبيعي أثناء إغلاق المقرّب. ولمساعدة عملية إدخال العجل، يتم تثبيت البواب الخاص بالمستقبل في العجل باستخدام رابط من قياس 7-0.يتم إزالة المقرّب (Approximator) وإعادة تدفق الدم في البوابة عن طريق إزالة مشبك Atic VNA CVA ومشبك البوابة بالتتابع، ثم يتم إزالة حلقة البوابة عن طريق القطع. ومع ذلك، يتم إعادة إنشاء الأربطة النانوية باستخدام نفس تقنية المستلمين. يتم إبقاء القناة الصفراوية الشائعة تحت الشد، ويتم إدخال الدعامة من خلال شق صغير.تثبت رباطة دائرية موضعها. يظهر في (أ) نظرة عامة على الطعم المدمج.

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

زراعة كبد في الفئران هو نموذج تجريبي لا غنى عنه للبحوث الطبية الحيوية. هنا نقدم إجراءاتنا الجراحية لزرع الكبد الفئران مثلي مع إعادة الإعمار كبدي الشرايين باستخدام الكسب غير المشروع 50٪ جزئية.

العمليات الجراحية لنموذج الفئران من الجزئي زرع الكبد orthotopic مع إعادة الإعمار الكبدي الشرياني

نحن تصف تصميم الجهاز "رابط سريع" لتسهيل زرع مثلي كبد الفئران.

أجهزة التصنيع والادوات لتسهيل الجرذ زرع الكبد

يوفر زراعة الكبد مساعد دعم مؤقت في فشل كبدي حاد، وحتى تجديد الكبد بالفشل. زرع منتبذ مساعدة الكبد (سكتة) مع arterialization الوريد البابي (PVA) يجعل وظيفة الكبد كافية. قمنا بتطوير تقنية مشابهة في الفئران، لدراسة تأثير arterialization الوريد البابي على التشكل وظيفة من الكسب غير المشروع.

منتبذ مساعدة الجرذ زراعة الكبد مع تدفق التنظيم الوريد البابي Arterialization في الفشل الكبدي الحاد

ويرد هنا، بروتوكول التي تنطوي على الفئران أرتيرياليزيد إعادة زرع الكبد الجزئي. على وجه التحديد، كان الكبد 70% مستأصل في فيفو باستخدام أسلوب تحديث لظهرت السفينة المنحى. الشريان الكبدي الذي أعيد بطريقة نهاية-إلى-جانب. تعديل أسلوب الكفة لتقصير وقت ملامسة الأجوف فينا إينفراهيباتيك.

أرتيرياليزيد إعادة "زرع الكبد الجزئي الفئران" مع في فيفو المنحى السفينة 70% ظهرت

وتظل إعادة إعمار الأجوف فينا سوبراهيباتيك (شفك) خطوة صعبة في زرع الكبد أورثوتوبيك الفئران. في هذه المقالة، نحن إظهار بروتوكول خطوة بخطوة للتعمير شفك في الفئران باستخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسية.

نموذج الفئران من أورثوتوبيك زرع الكبد استخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسي للتعمير الوريد الأجوف سوبراهيباتيك

الهدف من هذه الدراسة هو تعديل نموذج زرع الكبد العظام الفئران لتمثيل أفضل زرع الكبد البشري وتحسين البقاء على قيد الحياة المتلقي. تعيد الطريقة المعروضة إعادة تأسيس تدفق الشرايين الكبدية عن طريق ربط الشريان الكبدي المشترك للكبد المتبرع بالشريان الكبدي السليم في الكبد.

مضاعفات مخفضة بعد إعادة الاتصال الشرياني في نموذج الجرذ من زرع الكبد العظام

تقدم هذه الورقة وصفاً مفصلاً لكيفية بناء نموذج حيواني للمرحلة الـ"هيبد" (نقص التروية في الكبد) في الفئران لتسهيل البحوث الأساسية في إصابة الإقفار في الدم بعد زرع الكبد.

إصابة الجهاز الإقصاب الإقفاري-Reperfusion عن طريق محاكاة التغيرات الديناميكية الدموية في نموذج زراعة كبد الفئران

في هذا البروتوكول ، نناقش تنفيذ نموذج لزراعة الكبد التقويمية الناجحة (OLT) في الفئران. بالإضافة إلى ذلك ، تتم مناقشة المواد المساعدة لمزيد من تحليل سالكية الطعم الخيفي بعد نجاح OLT في الماوس ، وتحديدا باستخدام فحوصات التصوير المقطعي المحوسب (microCT).

زرع الكبد التقويمي الناجح في الفئران باستخدام تصوير الأوعية المقطعي المحوسب

يوفر بروتوكول زراعة الكبد الإضافي غير المتجانس الموصوف هنا أداة استقصائية عملية لاستكشاف آليات رفض الطعم الخيفي الكبدي. يساعد هذا النموذج في تخفيف العقبات الجراحية والإجهاد الحيواني لزراعة الكبد في الفئران.

نموذج زرع فئران الكبد الكامل المساعد غير المتجانس باستخدام فغر الكبد الخيفي لدراسات رفض الطعم الخيفي

يصف هذا البروتوكول تقنية محسنة لزراعة الرئة اليسرى في الفئران ، مع التركيز على تقليل الصعوبة التشغيلية وتحسين معدلات البقاء على قيد الحياة.

زرع الرئة اليسرى تقويم العظام في الفئران

تعلم تقنية زراعة الكبد الارتجاعية في الجرذان لتحسين كفاءة الزراعة الجراحية. تقدم هذه الطريقة خطوات مفصلة لربط الأوعية الدموية مع الحفاظ على سلامة الزرع.

زراعة كبد في الفئران

استكشف المزيد من الفيديوهات