Name: ذبابة الفاكهة الكبار الشم صدمة التعلم (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-07T19:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
Description: تعلم قياس الذاكرة التواصلية في ذباب الفاكهة البالغة باستخدام اختبار الصدمة الشمية. تساعد هذه الطريقة الباحثين على دراسة آليات التعلم والذاكرة في النظم العصبية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

نعترف مراكز الأسهم بلومينغتون لسلالة الطاير. وأيد هذا العمل من خلال منحة بحثية من BBSRC (BB / G008973 / 1).

1. يطير التحضير <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تهجين جميع المسوخ، GAL4 / UAS وخطوط أخرى مع سلالة wildtype، مثل CSw-، لمدة ستة أجيال على الأقل قبل التجارب السلوكية للسيطرة على الخلفية الوراثية 26. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنمو الذباب على معيار دقيق الذرة والخميرة والعسل الاسود الحمية الغذائية تحت دائرة الضوء المظلم 00:12 ساعة عند 25 درجة مئوية ما لم تتطلب معالجات معينة ودرجة حرارة مختلفة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتحديد آثار التحوير التعبير: استخدام 18 ° C لمنع التعبير عن الجينات المحورة في GAL4 Gal80 TS (نظام الهدف) من خلال تطوير وثم نقل الذباب إلى 30 درجة مئوية الحاضنة قبل 1-2 أيام من التجربة السلوكية. إجراء التجربة في 30 ° C لتحديد آثار التحوير التعبير 3،4،6،7،14. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإجراء التجارب باستخدام قنوات TRPA1 تنشيط الحرارة لتحفيز الخلايا العصبية: رفع الذباب عند 23 درجة مئوية، وهي درجة حرارة معروفةللحفاظ على قناة غير نشطة، ثم تحول إلى غرفة السلوك عند 30 درجة مئوية لتفعيل TRPA1 معربا عن الخلايا العصبية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإجراء التجارب باستخدام درجة حرارة Shibire الحساسة لمنع انتاج متشابك 11، 14،24: جر الذباب في 18 ° C وإجراء الاختبار عند 30 درجة مئوية. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع الذباب 1-2 أيام قبل التجربة والاعتماد عليها في مجموعات من حوالي 25 تحت ضوء CO 2 التخدير. تخزين الذباب على الأقل O / N في قارورة الغذاء (بدون خميرة) في 25 ° C (ما لم تتطلب معالجات محددة درجة حرارة مختلفة) والرطوبة النسبية 70٪ في غرفة التحكم للبيئة مع ضوء 00:12 ساعة: الظروف المظلمة حتى وقت التجربة. ملاحظة: هذا التخزين يسمح الذباب إلى التأقلم على المحك التعلم اللاحقة التي أجريت في غرفة التحكم بيئيا، والتي كان لها الظروف المثلى للتعلم ذبابة الفاكهة، والأهم، ويزيل أي ENVI اليوميةronmental الاختلافات التي قد أثرت على النمط الظاهري السلوكية. </li></ol> 2. إعداد قبل التجربة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء التجارب في صنع العرف البرسبيكس T-متاهة (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحقق بانتظام الأنبوب المناسب لضمان أن يتم الحصول على ختم محكم أثناء التجربة. إذا لزم الأمر، تغيير O-الحلقات التي ختم المقصورات الداخلية للT-المتاهة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع شبكات مصنوعة خصيصا النحاس داخل أنابيب التدريب. فحص وتنظيف هذه الشبكات بصورة منتظمة، واستبدالها إذا أكسدة. إرفاق شبكات الأسلاك النحاسية لعن طريق مقاطع التمساح التي تعمل على مربع التبديل متصلة مشجعا الكهربائية. استخدام الفولتميتر للتأكد من أن الجهاز هو تقديم الصدمة المطلوبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ز استخدام المشابك لعقد متاهة بإحكام لتفادي أي تسرب الهواء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إرفاق T-المتاهة للأنابيب التي تمتد إلى مضخة الهواء، للسماح الروائح التي يمكن استخلاصها عبر الذباب وإزالتها في وقت لاحق من T-المتاهة. الحفاظ على الهواء معتدلتدفق في ~ 2 لتر / دقيقة </li></ol> 3. رائحة التخفيفات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام اثنين من الروائح المختلفة بتركيزات مثل الذباب وتبين أن تفضيل متساوية لكلا الروائح. استخدام 4 methylcyclohexanol (1:67) و 3-الأوكتانول (1: 100) المخفف في الزيوت المعدنية 7،13. ملاحظة: تحديد بعناية هذه التركيزات، والتي سوف تختلف من مختبر. على سبيل المثال للآخرين استخدامه لكلا 01:10 الروائح 24. وتشمل غيرها من الروائح التي يشيع استخدامها خلات الإيثيل وخلات الأميل ايزو. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة 30 ميكرولتر من رائحة المخفف إلى رائحة فنجان حسب الطلب وضعت في كتلة رائحة بواسطة أنبوب بلاستيكي مغطاة أعلى مثقبة تسمح الهواء التي يمكن استخلاصها على رائحة في كوب، وبالتالي تعريض الذباب إلى عمود رائحة. </li></ol> 4. بروتوكول التدريب (الشكلان 1 و 2) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للبالغين تكييف صدمة حاسة الشم، أداء جميع التجارب تحت ضوء أحمر خافت (أي.، أحمر LED)، والذي يسمح للباحث أن يرى ولكن يمنع فلوريداذ من رؤية، وبالتالي السماح للذباب للتركيز على الشم بدلا من المدخلات البصرية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدخال الذباب في أنبوب التدريب ومن ثم نعلق على T-متاهة والسماح لهم للتكيف مع أنبوب وتدفق الهواء لمدة 90 ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقديم الرائحة الأولى (4 methylcyclohexanol، صحة الأم والطفل) مع صدمة 60-V (تتألف من اثني عشر نبضات 1.25 ثانية مع 3.75 ثانية فترات بين النبض) لمدة إجمالية قدرها 60 ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتبع صدمة مع فترة راحة 30 ثانية من دون رائحة أو صدمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقديم الرائحة الثانية (3-الأوكتانول، أكتوبر) لمدة 60 ثانية دون صدمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتبع صدمة مع فترة راحة 30 ثانية من دون رائحة أو صدمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الذباب من غرفة الى غرفة التدريب المركزية للT-متاهة من خلال تحويل T-متاهة على جانبها وضجيجا أسفل T-المتاهة على سطح ناعم بلطف مثل حصيرة الماوس القديمة. الحفاظ على الذباب في الغرفة المركزية لمدة 90 ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تناسب أنابيب الاختيار في بوttom الجهاز لتشكيل T-المتاهة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لقياس التعلم، ونقل الذباب إلى نقطة خيار T-المتاهة، حيث تعرضوا في وقت واحد إلى كل من الروائح والتحرك نحو واحد. إجراء فترة اختبار لمدة 120 ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مصيدة الذباب في أنابيب الاختيار عن طريق تحريك الغرفة المركزية يصل بذلك حظر نهايات الأنابيب الاختيار. جمع الذباب في كل ذراع من T-متاهة وفي المقصورة المركزية في قارورة الغذاء والعد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لقياس الذاكرة، وجمع الذباب بعد التدريب (4.6) ونقلها من T-المتاهة للقارورة الغذاء دون الخميرة. متجر الذباب في الظلام عند 25 درجة مئوية والرطوبة 70٪ للمرة المتبقية الضروري تحديد المرحلة الذاكرة الفائدة (انظر المقدمة). إعادة تقديم الذباب إلى T-متاهة كما هو الحال في المرحلة 4.7. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عن الذاكرة طويلة الأمد، واستخدام متاهة عرف بني الذي يسمح عدة دفعات من الذباب لتدريبهم في وقت واحد. 5 دورات إدارة التدريب مع 15 دقيقة الفاصلة بين دورة (سباCED) أو دون فاصل بين دورة (حشدت). الحفاظ على الذباب في 18 درجة مئوية والرطوبة 70٪ في الظلام حتى الاختبار. قبل الاختبار، نقل الذباب إلى 25 درجة مئوية والسماح لهم التأقلم على الأقل 1 ساعة. تقييم الذاكرة طويلة الأجل 24 ساعة بعد التدريب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد التجارب السلوكية، وتنظيف الأكواب مع رائحة الماء الساخن والمنظفات عديم الرائحة. بعد التجفيف، ومعطف الكؤوس مع 10 ميكرولتر sigmacote. تجفيف sigmacote عن طريق التسخين في فرن الميكروويف. أحيانا تنظيف T-متاهة أنابيب المقوى وكتل رائحة بالماء الساخن والمنظفات عديم الرائحة. </li></ol> 5. حساب مؤشر الأداء: مقياس ذاكرة الذباب &quot; <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب مؤشر الأداء (PI) لكل حالة حيث وصل عدد الذباب تجنب رائحة تقرن صدمة (CS -) ناقص عدد من الذباب اختيار رائحة تقرن صدمة (CS +) مقسوما على العدد الكلي للذباب (CS - CS + +) 1. PEمؤشر rformance (PI) = (# CS - الذباب - # CS + الذباب) / (# مجموع الذباب) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب PI النهائي للتجربة عن طريق حساب متوسط ​​PI التجربة التي كانت في صحة الأم والطفل ورائحة تقرن صدمة واحدة في أكتوبر التي كانت رائحة-تقرن صدمة. هذا يزيل أي تحيز من الذباب وجود تفضيل العالي للرائحة واحدة. </li></ol> 6. الضوابط حسي حركي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء رائحة حدة عن طريق إدخال ~ 40-50 الذباب في T-متاهة 6،7،17. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 90 ثانية، نقل الذباب إلى نقطة الاختيار، والسماح لهم 2 دقيقة للاختيار بين الروائح والهواء النقي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع والاعتماد الذباب. حساب النسبة المئوية تجنب بقسمة مجموع عدد الذباب الذي اختار رائحة من تلك التي شاركت في الاختبار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من الصدمة التفاعل 6،7،17، وإدخال الذباب في حجرة الصدمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 90 ثانية من الراحة، إدارة صدمة كهربائية 60-V DC، والتي من الذباب يمكن الهروب إلى مماثلةأنبوب دون صدمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سماح 2 دقيقة لاختيار الذباب. جمع والاعتماد الذباب. حساب النسبة المئوية صدمة تجنب بقسمة عدد من الذباب الذي تجنب صدمة الهروب بواسطة أنبوب صدمة من قبل عدد من الذباب في التجربة. تشمل الذباب التي تبقى في غرفة مركزية في مجموعه تلك التي نجت من الصدمات الكهربائية. </li></ol>

<ol><li>Tully, T., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classical+conditioning+and+retention+in+normal+and+mutant+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology+A%22%5BJournal%5D)">Classical conditioning and retention in normal and mutant Drosophila melanogaster.</a> Journal of Comparative Physiology A. 157, 263-277 (1985).</li>
<li>Bolduc, F. V., Tully, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fruit+flies+and+intellectual+disability%5BTitle%5D)+AND+%22Fly+%28Austin%29%22%5BJournal%5D)">Fruit flies and intellectual disability.</a> Fly (Austin). 3, 91-104 (2009).</li>
<li>McGuire, S. E., Deshazer, M., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thirty+years+of+olfactory+learning+and+memory+research+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Thirty years of olfactory learning and memory research in Drosophila melanogaster.</a> Prog Neurobiol. 76, 328-347 (2005).</li>
<li>Keene, A. C., Waddell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+olfactory+memory%3A+single+genes+to+complex+neural+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Drosophila olfactory memory: single genes to complex neural circuits.</a> Nat Rev Neurosci. 8, 341-354 (2007).</li>
<li>Chiang, H. C., Wang, L., Xie, Z., Yau, A., Zhong, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PI3+kinase+signaling+is+involved+in+Abeta-induced+memory+loss+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">PI3 kinase signaling is involved in Abeta-induced memory loss in Drosophila.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 107, 7060-7065 (2010).</li>
<li>Kanellopoulos, A. K., Semelidou, O., Kotini, A. G., Anezaki, M., Skoulakis, E. M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+and+memory+deficits+consequent+to+reduction+of+the+Fragile+X+mental+retardation+protein+result+from+metabotropic+glutamate-mediated+inhibition+of+cAMP+signalling+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Learning and memory deficits consequent to reduction of the Fragile X mental retardation protein result from metabotropic glutamate-mediated inhibition of cAMP signalling in Drosophila.</a> J Neurosci. 32, 13111-13124 (2012).</li>
<li>Malik, B. R., Gillespie, J. M., Hodge, J. J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CASK+and+CaMKII+function+in+the+mushroom+body+a%E2%80%99%2F%C3%9F%E2%80%99+neurons+during+Drosophila+memory+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neural+Circuits%22%5BJournal%5D)">CASK and CaMKII function in the mushroom body a’/ß’ neurons during Drosophila memory formation.</a> Front Neural Circuits. 7, 52(2013).</li>
<li>Gerber, B., Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+larva+as+a+model+for+studying+chemosensation+and+chemosensory+learning%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">The Drosophila larva as a model for studying chemosensation and chemosensory learning: a review.</a> Chem Senses. 32, 65-89 (2007).</li>
<li>Gillespie, J. M., Hodge, J. J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CASK+regulates+CaMKII+autophosphorylation+in+control+of+synaptic+growth+and+appetitive+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Molecular+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">CASK regulates CaMKII autophosphorylation in control of synaptic growth and appetitive learning.</a> Front Molecular Neuroscience. 6, 27(2013).</li>
<li>Apostolopoulou, A. A., Widmann, A., Rohwedder, A., Pfitzenmaier, J. E., Thum, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetitive+associative+olfactory+learning+in+Drosophila+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Appetitive associative olfactory learning in Drosophila larvae.</a> J Vis Exp. (72), e4334(2013).</li>
<li>Tonoki, A., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+impairs+intermediate-term+behavioral+memory+by+disrupting+the+dorsal+paired+medial+neuron+memory+trace%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Aging impairs intermediate-term behavioral memory by disrupting the dorsal paired medial neuron memory trace.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 109, 6319-6324 (2012).</li>
<li>Yamazaki, D., Horiuchi, J., Nagano, S., Tamura, T., Saitoe, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+DCO+mutation+suppresses+age-related+memory+impairment+without+affecting+lifespan%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The Drosophila DCO mutation suppresses age-related memory impairment without affecting lifespan.</a> Nat Neurosci. 10, 478-484 (2007).</li>
<li>Cavaliere, S., Malik, B. R., Hodge, J. J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((KCNQ+channels+regulate+age-related+memory+impairment%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">KCNQ channels regulate age-related memory impairment.</a> PLoS One. 8, e62445(2013).</li>
<li>Venken, K. J., Simpson, J. H., Bellen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+manipulation+of+genes+and+cells+in+the+nervous+system+of+the+fruit+fly%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Genetic manipulation of genes and cells in the nervous system of the fruit fly.</a> Neuron. 72, 202-230 (2011).</li>
<li>Isabel, G., Pascual, A., Preat, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exclusive+consolidated+memory+phases+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Exclusive consolidated memory phases in Drosophila.</a> Science. 304, 1024-1027 (2004).</li>
<li>Perisse, E., Burke, C., Huetteroth, W., Waddell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shocking+revelations+and+saccharin+sweetness+in+the+study+of+Drosophila+olfactory+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Shocking revelations and saccharin sweetness in the study of Drosophila olfactory memory.</a> Curr Biol. 23, R752-R763 (2013).</li>
<li>Tully, T., Preat, T., Bonyton, S. C., Del Vecchio, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+dissection+of+consolidated+memory+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Genetic dissection of consolidated memory in Drosophila.</a> Cell. 79, 35-47 (1994).</li>
<li>Lyons, L. C., Roman, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+modulation+of+short-term+memory+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Learning+and+memory%22%5BJournal%5D)">Circadian modulation of short-term memory in Drosophila.</a> Learning and memory. 16, 19-27 (2009).</li>
<li>Le Glou, E., Seugnet, L., Shaw, P. J., Preat, T., Gouguel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+modulation+of+consolidated+memory+retrieval+following+sleep+deprivation+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Circadian modulation of consolidated memory retrieval following sleep deprivation in Drosophila.</a> Sleep. 35 (10), 1377-1384 (2012).</li>
<li>Placais, P. Y., Preat, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((To+favour+survival+under+food+shortage%2C+the+brain+disables+costly+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">To favour survival under food shortage, the brain disables costly memory.</a> Science. 339, 440-442 (2012).</li>
<li>Hirano, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fasting+launches+CRTC+to+faciltate+long-term+memory+formation+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Fasting launches CRTC to faciltate long-term memory formation in Drosophila.</a> Science. 339, 443-446 (2012).</li>
<li>Schroll, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-induced+activation+of+distinct+modulatory+neurons+triggers+appetitive+or+aversive+learning+in+Drosophila+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Light-induced activation of distinct modulatory neurons triggers appetitive or aversive learning in Drosophila larvae.</a> Curr Biol. 16, 1741-1747 (2006).</li>
<li>Claridge-Chang, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Writing+memories+with+light-addressable+reinforcement+circuitry%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Writing memories with light-addressable reinforcement circuitry.</a> Cell. 139, 405-415 (2009).</li>
<li>Aso, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three+dopamine+pathways+induce+aversive+odor+memories+with+different+stability%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genetics%22%5BJournal%5D)">Three dopamine pathways induce aversive odor memories with different stability.</a> PLoS Genetics. 8, e1002768(2012).</li>
<li>Connolly, J. B., Tully, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aConnolly%2C+JB+%22Drosophila%3A+a+Practical+Approach%22">Drosophila: a Practical Approach</a>. Roberts, D. B. , Oxford University Press. 265-319 (1998).</li>
<li>Connolly, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+learning+disrupted+by+impaired+Gs+signaling+in+Drosophila+mushroom+bodies%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Associative learning disrupted by impaired Gs signaling in Drosophila mushroom bodies.</a> Science. 274, 2104-2107 (1996).</li>
<li>Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traces+of+Drosophila+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Traces of Drosophila memory.</a> Neuron. 70, 8-19 (2011).</li>
<li>Gu, H., O'Dowd, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholinergic+synaptic+transmission+in+adult+Drosophila+kenyon+cells+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cholinergic synaptic transmission in adult Drosophila kenyon cells in situ.</a> J Neurosci. 26, 265-272 (2006).</li>
<li>Young, J. M., Wessnitzer, J., Armstrong, J. D., Webb, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elemental+and+non-elemental+olfactory+learning+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Elemental and non-elemental olfactory learning in Drosophila.</a> Neurobiol Learn Mem. 96, 339-353 (2011).</li>
<li>Kaun, K. R., Azanchi, R., Maung, Z., Hirsh, J., Heberlein, U. .A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+model+for+alcohol+reward%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Drosophila model for alcohol reward.</a> Nat Neurosci. 14, 612-619 (2011).</li>
<li>Waddell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+reveals+neural+circuit+mechanisms+of+fly+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Dopamine reveals neural circuit mechanisms of fly memory.</a> Trends Neurosci. 33, 457-464 (2010).</li>
</ol>

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

صدمة فحص حاسة الشم تعلم الكبار ذبابة الفاكهة المعروضة هنا يسمح تحليل الآليات الجزيئية الكامنة مراحل مختلفة من الذاكرة، بما في ذلك الذاكرة طويلة المدى 15-17. وكذلك تحديد تأثير ايقاعات كل يوم 18، والنوم 19، والنظام الغذائي 20،21، 11-13 الشيخوخة وأمراض الاعصاب 5 والعلاجات المخدرات 5،6،19 على الذاكرة. وقد وضعت العديد من المناهج القوية مؤخرا للتصوير وظيفي من الدوائر العصبية التي تتوسط ذاكرة الشم في الذباب 3،4،7،11،16،27. هذه التقنيات optogenetic تستخدم ذخيرة واسعة من مختلف المروجين متاحة في ذبابة الفاكهة 14،16. وتستخدم هذه المروجين للتعبير عن صحفيين الكالسيوم ومخيم المشفرة وراثيا في الخلايا العصبية الذاكرة 16،27 لدراسة تأثير الطفرات الجينية المحددة على آثار الذاكرة. عشراستخدام البريد المروجين مشروط والطفرات في البالغين يسمح دراسة دور بعد التنموي للمنتج الجين في الذاكرة 3،4،6،7،13،14. التصوير والنهج السلوكية يمكن دمجها مع قنوات الخفيفة وتنشيط الحرارة لتحفيز أو تثبيط الخلايا العصبية المختلفة في الدائرة الذاكرة 11،14،16،22-24 لزيادة توضيح وظيفتها. وعلاوة على ذلك، الجسم الفطر الخلايا العصبية الذاكرة يمكن الوصول إلى كامل الخلية التسجيلات المشبك التصحيح 28، وتقنيات رياضية وحسابية تستخدم لنمذجة ذبابة الفاكهة ذاكرة الشم 29. هذه التطورات التجريبية، جنبا إلى جنب مع أشكال مختلفة من البروتوكولات الذاكرة الترابطية قدم هنا، ذبابة الفاكهة تسمح لاستخدامها لنمذجة التغيرات الجزيئي وعلى مستوى الدائرة في الذاكرة الترابطية التي تحدث في استجابة لمكافأة والعقاب، والدافع، والإدمان، والشيخوخة والمرض 5،6،11-13،16،30-31.

الطريقة المعروضة هنا هو أن وصفها تالي وكوين مع بعض التعديلات الصغيرة 1. يتم تنفيذ التجربة على مرحلتين: يتم تدريب الذباب في المرحلة الأولى، ويتم اختبار الذباب تدريبهم في المرحلة الثانية. خلال التدريب، ويتعرض مجموعة من الذباب في الوقت نفسه إلى رائحة 1 (CS +) والصدمات الكهربائية (US) في أنبوب التدريب. الذباب ثم يتلقى رائحة 2 (CS -) دون حدوث صدمة كهربائية. ويسمى هذا الاقتران واحد من رائحة معينة مع صدمة التدريب 1 دورة، والروائح التي تستخدم في معظم الأحيان هم 4 methylcyclohexanol (صحة الأم والطفل) و 3-الأوكتانول (أكتوبر). التدريب دورة واحدة يؤدي إلى تشكيل لمرحلة عطوب الذاكرة التي يمكن الكشف عنها لمدة تصل إلى 7 ساعات. ومع ذلك، يتم عادة اختبار الذاكرة على الفور لتحديد ما يطلق عليه التعلم، واكتساب أو 2 دقيقة الذاكرة. يشار الذاكرة قياسها 30 دقيقة أو 1 ساعة إلى والذاكرة على المدى القصير، في حينيشار 3 ساعة إلى الذاكرة كذاكرة منتصف المدة. تعرض الذباب لدورات تدريبية متكررة مع الفجوات بين دورات التدريب (تدريب متباعدة) يؤدي إلى شكل موحد من الذاكرة طويلة الأمد التي هي CREB النسخ وتعتمد تستغرق ما يصل إلى أسبوع. التدريب دون ثغرات (التدريب حشدت) يؤدي إلى تشكيل الذاكرة مقاومة للتخدير (ARM)، والتي تشبه إلى الذاكرة طويلة المدى، وعادة ما تقاس 24 ساعة بعد 5 دورات التدريب 7،13،15-17،20،21. مع هذا النهج، يمكن تحديد تأثير مختلف طفرات الجينات على هذه المراحل المختلفة من الذاكرة. التعبير يحركها المروج من الجينات المحورة أو ضوئية حساسة للحرارة لتنشيط أو منع النشاط العصبي للخلايا العصبية محددة يسمح احد لتحقيق الخلايا العصبية التي تكون مطلوبة من أجل اكتساب الذاكرة، وتوطيد واسترجاع 3،4،11،15،16،20، 22-24. عادة يتم قياس الذاكرة في 1 ساعة عند دراسة ضعف الذاكرة المرتبط بالعمر لأن هذا ويبدو أن مكتب إدارة السجلات من الذاكرة عرضة بصفة خاصة لآثار الشيخوخة 11-13. يتم إجراء مجموعة كاملة من الضوابط السلوكية والوراثية وبين التجارب الذاكرة، على سبيل المثال، لتحديد ما إذا كان عيب الأداء هو بسبب عيب الذاكرة المركزي أو خلل الحسي المحيطي الذي يمنع الطيران من الاستشعار صدمة أو جديلة حاسة الشم 5 -7، 1 7، 25،26.

<table><tbody><tr><td>3-أوكتانول</td><td>سيجما</td><td>218405</td><td></td></tr><tr><td>4-ميثيل سيكلوهكسانول</td><td>سيجما</td><td>15309-5</td><td></td></tr><tr><td>بنزالديهايد</td><td>سيجما</td><td>418099</td><td></td></tr><tr><td>زيت معدني</td><td>فلوكا</td><td>BP2629-1</td><td></td></tr><tr><td>هيكسيل أسيتات</td><td>سيجما</td><td>108154</td><td></td></tr><tr><td>فركتوز</td><td>سيجما</td><td>F0127</td><td></td></tr><tr><td>أغاروز</td><td>بيولين</td><td>BIO-41025</td><td></td></tr></tbody></table>

ذبابة الفاكهة الكبار الشم صدمة التعلم

Drosophila Adult Olfactory Shock Learning

وقد استخدمت ذبابة الفاكهة في التجارب تكييف الكلاسيكية لأكثر من 40 عاما، مما يسهل إلى حد كبير فهمنا من الذاكرة، بما في ذلك توضيح الآليات الجزيئية المشاركة في الأمراض المعرفية 1-7. التعلم والذاكرة يمكن أن يعاير في اليرقات لدراسة تأثير الجينات العصبية النمائية 8-10 والذباب لقياس مساهمة الجينات اللدونة الكبار 1-7. وعلاوة على ذلك، عمر قصير من ذبابة الفاكهة يسهل تحليل الجينات التوسط المرتبطة بالعمر ضعف الذاكرة 5،11-13. توافر العديد من المروجين محرض أن تقسيم الجهاز العصبي ذبابة الفاكهة يجعل من الممكن تحديد متى وأين مطلوب الجينات التي تهم الذاكرة العادية وكذلك التتابع مختلف جوانب التعزيز إشارة 3،4،14،16. دراسة الذاكرة في ذبابة الفاكهة الكبار يسمح لتحليل مفصل للالسلوك والدوائر المعنية وقياس الذاكرة طويلة المدى 15 -17. طول مرحلة الكبار يستوعب التلاعب الوراثية والسلوكية والغذائية والدوائية على المدى الطويل من الذاكرة، بالإضافة إلى تحديد تأثير الشيخوخة والأمراض العصبية التنكسية على الذاكرة 3-6،11-13،15-21. وبفعل الإشراط الكلاسيكي من العرض المتزامن لجديلة محايدة رائحة (التحفيز مكيفة، CS +) والتحفيز التعزيز، على سبيل المثال، صدمة كهربائية أو السكروز، (المثير غير الشرطي، الولايات المتحدة)، التي أصبحت مرتبطة مع بعضها البعض بواسطة الحيوان 1،16. وتقدم بعد ذلك دون الولايات المتحدة - والتحفيز مكيفة الثانية (CS). خلال مرحلة الاختبار، يتم عرض ذبابة الفاكهة في وقت واحد مع CS + والروائح CS-. بعد يتم توفير الوقت لذبابة الفاكهة الاختيار بين الروائح، يتم تسجيل توزيع الحيوانات. هذا الإجراء اللهأدنى النقابي تكييف مكره أو مشهي إلى أن تقاس بشكل موثوق دون تحيز التي أدخلها التفضيل الفطري لأي من المحفزات مكيفة. يتم إجراء التجارب التحكم المختلفة أيضا لاختبار ما إذا كانت جميع الأنماط الجينية تستجيب عادة للرائحة والتعزيز وحده.

مؤشر الأداء (PI) بمثابة مقياس للذاكرة. ويوضح الجدول 1 حساب تمثيلي من PI. <table border="1" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> يقترن صحة الأم والطفل مع صدمة </td><td> يقترن 3-OCT مع صدمة </td></tr><tr><td> الذباب تجنب صحة الأم والطفل (في أنبوب أكتوبر) = 80 الذباب مفضلا صحة الأم والطفل (صحة الأم والطفل في أنبوب) = 20 PI 1 - (80-20) / 80 + 20) = 0.6 </td><td> الذباب تجنب أكتوبر (في أنبوب صحة الأم والطفل) = 75 الذباب مفضلا أكتوبر (في أنبوب أكتوبر) = 25 PI 2 = (75-25) / (75 + 25) = 0.5 </td></tr><tr><td> PI التجربة = (0،6 + 0،5) /2=0.55 </td><td></td></tr></tbody></table> الجدول 1. حساب تمثيلي مؤشر الأداء باستخدام بيانات توضيحية. مؤشرات الأداء لتجارب مختلفة يمكن مقارنة لتوضيح آثار الذاكرة. مرة واحدة مثلتظهر المقارنة في الشكل 3، والذي يحتوي على نتائج سلسلة من التجارب أجريت مع كانتون S wildtype الذباب الكبار (WT) وغبي تعلم الكبار الذباب متحولة 1. يتم توفير متوسط ​​10 حزب القانون والعدالة، مع أشرطة الخطأ تمثل الخطأ المعياري للمتوسط ​​(SEM). هذه النتائج تثبت أن الذباب غبي تظهر انخفاضا في التعلم مقارنة wildtype. <img alt="الشكل 1" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50107/50107fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50107/50107fig1.jpg" /> الشكل 1. الكبار التجريبية مجموعة المتابعة. يتم تدريب الذباب واختبار T في المتاهة. التدريب يشمل يقدمون رائحة ومع صدمة كهربائية تليها رائحة B الثاني من دون صدمة كهربائية. بعد فترة راحة في غرفة الوسطى وتعرض الذباب مع كل من الروائح في وقت واحد. محاصرون الذبابفي أنابيب اثنين وجمعها وعدها للحصول على عشرات التعلم / الذاكرة. <img alt="الشكل 2" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50107/50107fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50107/50107fig2.jpg" /> الرقم 2. البروتوكول تدريب الكبار. الذباب يتدربون في خطوتين. الخطوة الأولى حيث تتلقى الذباب رائحة (CS +) يقترن صدمة كهربائية (US) لمدة 60 ثانية. في الخطوة التالية تحصل الذباب رائحة الثانية (CS-) دون صدمة كهربائية. ثم يسمح للذباب للراحة لمدة 90 ثانية وبعد ذلك يتم اختبارها للاختيار ما بين CS + وCS-. <img alt="الرقم 3" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/50107/50107fig3highres.jpg" width="400" /> الشكل 3. الرسم البياني التمثيلي تظهر غبي والتعلم wildtype في ذبابة الفاكهة الكبار. </strongتظهر&gt; WT وتم اختبار الذباب غبي التالية دورة واحدة من التدريب. الذباب غبي انخفاض في التعلم مقارنة WT (ن = 10).

يوصف طريقة لقياس الكبار ذبابة الفاكهة الذاكرة الجمعوية. ويستند الفحص على قدرة الذبابة لربط رائحة قدم مع معزز سلبي (الصدمة الكهربائية) ثم أذكر هذه المعلومات في وقت لاحق، مما يسمح الذاكرة المراد قياسها.

Drosophila have been used in classical conditioning experiments for over 40 years, thus greatly facilitating our understanding of memory, including the ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو قياس الذاكرة الترابطية باستخدام مقايسة الصدمة الشمية لذبابة الفاكهة البالغة. يتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق جمع الذباب تحت التخدير بغاز ثاني أكسيد الكربون. والخطوة الثانية هي تعريض الذباب في آن واحد لصدمة كهربائية ورائحة أولى A في المجموعة A. بعد ذلك، يتم تعريض الذباب لرائحة ثانية B دون صدمة.وأخيرًا، تُنقل الذباب إلى نقطة الاختيار في فريق a، حيث يتم تعريضها لكل من الرائحة A وB في آن واحد. وبعد دقيقتين من وقت التوزيع، يتم جمع الذباب الذي اختار الرائحة A والذباب الذي اختار الرائحة B بشكل منفصل، ثم تُعد تحت تأثير ثاني أكسيد الكربون. يتيح ذلك حساب مؤشر الأداء لكل رائحة. ويتم الحصول على مؤشر الأداء النهائي عن طريق حساب متوسط مؤشر الأداء لتجربتين منفصلتين، إحداهما يتم فيها اقتران الرائحة A بالصدمة، والثانية يتم فيها اقتران الرائحة B بالصدمة.يمكن لهذه الطريقة أن توفر رؤية متعمقة حول تأثير الحالة الداخلية للحيوان والذاكرة. فعلى سبيل المثال، من خلال تغيير عمر الحيوان ونظامه الغذائي وفترات نومه، يمكن تطبيق هذه الطريقة على أنظمة أخرى. كما أنها تماثل اختبارات الإشراط الخوفي بوساطة القوارض أو المصانع، حيث إن جينات وآليات التعلم محفوظة للغاية بين الحشرات والثدييات.يُعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمراً بالغ الأهمية، حيث أن تحضير الذباب من أجل المقايسة ثم نقل الذباب إلى داخل وخارج المجموعات يصعب تعلمه، وليس من السهل استيعاب كيفية تنفيذه من مجرد بروتوكول مكتوب. للبدء، يتم تربية الذباب على نظام غذائي قياسي تحت دورة ضوئية مظلمة مدتها 12 ساعة عند 25 درجة مئوية، وقبل التجربة بيوم أو يومين، يتم تخدير الذباب باستخدام ثاني أكسيد الكربون وتوزيعه إلى أربع مجموعات تضم كل منها 25 ذبابة. تُحفظ الذباب طوال الليل في قارورات غذائية خالية من الخميرة عند 25 درجة مئوية ورطوبة 70% في غرفة يتم التحكم في بيئتها تحت دورة ضوئية مظلمة مدتها 12 ساعة.بعد ذلك، قم بتجهيز مجموعة من أنابيب Perspex المخصصة، وافحص وصلات الأنابيب بانتظام لضمان إحكام الغلق ومنع تسرب الهواء أثناء التجربة، ثم ضع شبكات نحاسية مصنعة خصيصاً داخل أنابيب التدريب. قم بتنظيف الشبكات بانتظام واستبدلها في حال تأكسدها. استخدم مشابك التمساح لتوصيل الشبكات النحاسية بالأسلاك الممتدة إلى صندوق مفاتيح متصل بمحفز كهربائي.بعد ذلك، استخدم مقياس الجهد (فولتميتر) للتأكد من أن الجهاز يرسل الصدمة المطلوبة. بعد ذلك، ثبت المتاهة بإحكام باستخدام مشابك G. ولتجنب أي تسرب للهواء، قم بتوصيل المتاهة على شكل حرف T بأنابيب متصلة بمضخة هواء، مما يسمح بسحب الروائح عبر الذباب وإزالتها من النظام.حافظ على تدفق هواء خفيف بمعدل 2 L/min، ثم قم بتخفيف 4-methylcyclohexanol أو MCH بنسبة 1:67، و 3-octanol أو OCT بنسبة 1:100 في زيت معدني. بعد ذلك، اسحب باستخدام الماصة 30 µL من الرائحة المخففة وضعها في كوب الرائحة. جهّز كوب رائحة مصنعاً خصيصاً وقم بتغطية كتلة الرائحة بأنبوب بلاستيكي ذو غطاء مثقب.ضع كوب الرائحة المصمم خصيصاً داخل كتلة الرائحة. تسمح هذه الآلية بسحب الهواء فوق الرائحة الموجودة في الكوب، مما يعرض الذباب لتيار من الرائحة. قم بإجراء جميع تجارب تكييف الصدمة الشمية للبالغين تحت ضوء أحمر خافت، مما يسمح للباحث بالرؤية، ولكنه يمنع الذباب من الرؤية ويضمن تركيز الذباب على الروائح بدلاً من المدخلات البصرية.بعد ذلك، يتم إدخال الذباب في أنبوب التدريب المتصل بأجهزة TMAs، ويُترك للتكيف مع الأنبوب وتدفق الهواء لمدة 90 ثانية. يتم بعد ذلك تقديم الرائحة الأولى MCH مع صدمة كهربائية بجهد 60 فولت تتكون من 12 نبضة مدة كل منها 1.25 ثانية، مع فواصل زمنية بين النبضات قدرها 3.75 ثانية، ولمدة إجمالية تصل إلى 60 ثانية.اتبع الصدمة بفترة راحة مدتها 32 ثانية. قدم رائحة OCT الثانية لمدة 60 ثانية دون صدمة. اتبع الصدمة بفترة راحة مدتها 32 ثانية.بعد ذلك، أدر جهاز teammates على جانبه وانقر برفق على الجزء السفلي فوق بساط الماوس لنقل الذباب من غرفة التدريب إلى الغرفة المركزية. وبعد إبقاء الذباب في الغرفة المركزية لمدة 90 ثانية، قم بتركيب أنابيب الاختيار في الجزء السفلي من الجهاز لتشكيل team A لقياس التعلم. انقل الذباب إلى نقطة الاختيار في جهاز teammates وعرضهم لكلا الرائحتين في وقت واحد لمدة 120 ثانية.يتم حبس الذباب في أنابيب الاختيار عن طريق سحب الغرفة المركزية للأعلى. بعد ذلك، تُجمع الذباب من المقصورة المركزية ومن كل ذراع من أذرع الاختبار في قوارير غذاء منفصلة. يتم وضع ملصقات واضحة على القوارير توضح نوع الذباب وخياره الشمي، ومن ثم يتم عدّها لقياس الذاكرة.اجمع الذباب بعد التدريب وانقله من أجهزة الزملاء إلى أنابيب غذاء خالية من الخميرة. احفظ الذباب في الظلام عند درجة حرارة 25 °C ورطوبة 70% كما هو موضح في البروتوكول النصي المصاحب. ثم أعد إدخال الذباب إلى أجهزة الزملاء.من أجل الذاكرة طويلة المدى، استخدم متاهة مصممة خصيصاً تسمح بتدريب عدة مجموعات من الذباب في وقت واحد. قم بإجراء خمس دورات من التدريب.يتم الحفاظ على الذباب عند درجة حرارة 18 درجة مئوية ورطوبة 70% في الظلام حتى وقت الاختبار. وقبل البدء بالاختبار، تُنقل الذباب إلى درجة حرارة 25 درجة مئوية وتُترك للتأقلم لمدة ساعة واحدة على الأقل.تقييم الذاكرة طويلة المدى. بعد 24 ساعة من التدريب. بعد التجارب السلوكية، تُنظف أكواب الروائح بالماء الساخن ومنظف عديم الرائحة.بعد التجفيف، ضع 10 µL من مادة sigma coat على أكواب الرائحة. ثم قم بتسخين أكواب الرائحة في فرن ميكروويف لترسيب مادة sigma coat وتصلبها. قم بإجراء اختبار حدة الشم عن طريق إدخال 100 ذبابة في الفريق aze، وبعد 90 ثانية، انقل الذباب إلى نقطة الاختيار واترك لهم دقيقتين للاختيار بين الروائح النقية والهواء.بعد ذلك، يتم جمع الذباب وعدّها. ولأجل قياس الاستجابة للصدمة، يتم إدخال الذباب في غرفة الصدمة.بعد فترة راحة مدتها 90 ثانية، قم بتطبيق صدمة كهربائية بتيار مستمر بجهد 60 فولت. سيهرب بعض الذباب إلى أنبوب مماثل لا يتعرض لصدمة. امنح الذباب دقيقتين لاتخاذ القرار.بعد ذلك، يتم جمع وعدّ الذباب الذي تمكن من الهروب من أنبوب الصدمة لتوضيح آثار التعلم. وقد أُجريت سلسلة من التجارب على ذباب بالغ من النوع البري Canton s وذباب بالغ من طفرة DS. وتُظهر ذباب Duns انخفاضاً في القدرة على التعلم مقارنة بالذباب من النوع البري.أثناء محاولة تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تذكر تتبع أي الذباب يمثل أي مجموعة وبالضبط ما الذي تم إجراؤه عليها. يجب الحذر من أن الذباب يمكن أن يتعرض للإجهاد بسهولة أثناء التحضير والتدريب والاختبار؛ لذا تأكد من تقليل الإجهاد إلى أدنى حد والحفاظ على الاتساق في التعامل.لا تنسَ أن تعلم الجوسلين يمكن أن يظهر تباينات يومية. لذا، اتخذ الاحتياط اللازم بإجراء إجراءات التحكم والتجارب في الوقت نفسه تقريبًا من اليوم وتحت الظروف ذاتها. إذا توقفت مجموعات التحكم عن التعلم، فحاول تحليل ما الذي تم القيام به بشكل مختلف مقارنة بالأيام التي نجحت فيها التجربة.بمجرد عزل المتغير، حاول أن تكون أكثر اتساقاً في التعامل مع هذا المتغير عند إجراء مقايسة الذاكرة. نتمنى لك التوفيق في المستقبل.

drosophila-adult-olfactory-shock-learning

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

وصفنا تقنية أنشئت لقياس وتحليل رائحة استجابات الكالسيوم في الفص antennal...

التصوير الكالسيوم من الردود، رائحة أثار في ذبابة الفاكهة لوب Antennal

ذبابة الفاكهة اليرقات قادرة على ربط المحفزات الرائحة مع مكافأة الذوقية. نحن هنا وصف لنموذج بسيط السلوكية التي تسمح للتحليل التعلم مشهي حاسة الشم النقابي.

مشهي التعلم النقابي في الشم<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; اليرقات

يصف هذا الفيديو اختبار تكييف كلاسيكي يختبر التعلم والذاكرة في ذبابة الفاكهة ، ويسمى تكييف الخطوبة. يعتمد الاختبار على تقليل مغازلة الذكور بعد تعرضهم للرفض من قبل أنثى خديجة غير متقبلة. يوضح مثال البروتوكول إعدادا للإجراء يمكن استخدامه لتقييم الذاكرة قصيرة المدى وطويلة المدى.

ذبابة الفاكهة تكييف الخطوبة: طريقة لاختبار التعلم والذاكرة في الذباب

نقدم اختبار الاختيار للكشف عن تأثير عطر على سلوك ذبابة الفاكهة باستخدام مقايسة Y-المتاهة.

تجريب<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; الشم مع الفحص Y-المتاهة

نصف هنا طريقة الإعداد السلوكي وتحليل البيانات لفحص الاستجابات الشمية لما يصل إلى 100 ذبابة خل (ذبابة الفاكهة السوداء). يمكن استخدام هذا النظام مع محفزات شمية مفردة أو متعددة ، وقابل للتكيف مع التنشيط البصري الوراثي أو إسكات المجموعات الفرعية العصبية.

السلوكيات حاسة الشم يعاير التي تتبع الكمبيوتر<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; في Olfactometer أربعة رباعي

الذوق هو عملية حسية مهمة تسهل الانجذاب إلى المواد المفيدة وتجنب المواد السامة.  يصف هذا البروتوكول مقايسة ابتلاع بسيطة لتحديد ذبابة الفاكهة التفضيل الذوقي لمركب كيميائي معين.

طعم الفحص تفضيل الكبار<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

يصف هذا البروتوكول التعلم ذبابة الفاكهة والذاكرة فحص يسمى تكييف التوافه. ويستند هذا الفحص الكلاسيكي على الحد من سلوك المغازلة الذكور بعد الرفض الجنسي من قبل الإناث غير تقبل فرضية. هذا الشكل الطبيعي من اللدونة السلوكية يمكن استخدامها لاختبار التعلم، والذاكرة على المدى القصير، والذاكرة على المدى الطويل.

تكييف قنبلة ذبابة الفاكهة كتدبير للتعلم والذاكرة

نقدم هنا البروتوكول الذي يمكن تصوره قبل و/أو الكالسيوم بعد المتشابك في سياق التعلم والذاكرة دروفيفيا . في صور الكالسيوم المجرية باستخدام حساسات الكالسيوم المترجمة بالمشبك يتم الجمع بينها وبين النموذج الكلاسيكي لتكييف حاسة الشم بحيث يمكن تحديد اللدونة المتشابكة الكامنة وراء هذا النوع من التعلم النقابي.

في فيفو البصرية الكالسيوم التصوير من اللدونة متشابك الناجمة عن التعلم في دروفوميلا ميلغاستر

يصف هذا العمل نموذجا سلوكيا بسيطا يسمح بتحليل التعلم الترابطي المتردد في ذباب الفاكهة البالغ. تعتمد هذه الطريقة على قمع سلوك التاكسي الجغرافي السلبي الفطري بسبب الارتباط المتشكل بين سياق بيئي معين وصدمة كهربائية.

ذبابة الفاكهة سلوك التجنب السلبي كنموذج جديد لدراسة التعلم الترابطي المتردد

نصف هنا طرقا لتحفيز وتحليل إعادة تشكيل الخبرة الشمية المعتمدة على الكبيبات المشبكية لفص الهوائي في دماغ ذبابة الفاكهة اليافعة.

إعادة تشكيل تعتمد على الخبرة للاتصال العصبي الحسي الشمي للدماغ اليافع في فترة حرجة مبكرة من الحياة

من العوائق الكبيرة لدراسة النشاط الخلوي أثناء العمليات المعرفية مثل التعلم والذاكرة استخدام التخدير لإعداد التصوير في الجسم الحي . يضعف التخدير الذاكرة والإدراك على المدى القصير في نماذج متعددة ، بما في ذلك ذبابة الفاكهة. تقدم هذه الدراسة طريقة فريدة لتحضير ذبابة الفاكهة للبالغين للتصوير في الجسم الحي بدون تخدير.

في الجسم الحي تصوير النشاط العصبي في ذبابة الفاكهة البالغة غير المخدرة

تعلم قياس الذاكرة التواصلية في ذباب الفاكهة البالغة باستخدام اختبار الصدمة الشمية. تساعد هذه الطريقة الباحثين على دراسة آليات التعلم والذاكرة في النظم العصبية.

ذبابة الفاكهة الكبار الشم صدمة التعلم

استكشف المزيد من الفيديوهات