تقييم الشريان المقاومة الفئران وظيفة عن طريق الضغط تخطيط العضل

الهدف العام من التجربة التالية هو تحديد تفاعل الأوعية الدموية في الوقت الفعلي للشريان المقاوم للفأر في المختبر في الظروف الفسيولوجية القريبة. يتم تحقيق ذلك عن طريق تركيب جزء صغير من الوعاء على قنيتين صغيرتين والحفاظ عليه عند الضغط الإلمائي الفسيولوجي. ثم يتم تقييد الوعاء الدموي بمؤثر مستقبلات ألفا واحد فينيليفرين لدراسة قدرة أي دواء على توسيع الوعاء الدموية.

إن تحدي الوعاء الضيق باستخدام الأسيتيل كولين يقيم قدرته على التمدد في الوقت الفعلي عبر آلية تعتمد على البطانة. تظهر النتائج النسبة المئوية للتغير في قطر التجويف استجابة للأستيل كولين والتحقق من أن نقص SGC ألفا واحد يؤدي إلى ضعف توسع الأوعية المعتمدة على البطانة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية مثل التصوير الشعاعي للثدي السلكي ، هي أن التصوير الشعاعي للثدي بالضغط يسمح بتوصيف الأوعية الدقيقة الصغيرة ، والتي تكون أكثر صلة بالحفاظ على توازن ضغط الدم من أوعية التوصيل الأكبر.

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال القلب والأوعية الدموية ، مثل ارتفاع ضغط الدم ، حيث تلعب الأوعية المقاومة للماكرو دورا حاسما. ابدأ بالقتل الرحيم للفأر باستخدام البنتوباربيتال. الآن افتح تجويف البطن وابدأ في تشريح الأنسجة المساريقية.

حدد الآن شريانا مساريقيا من الدرجة الثالثة وعزله عن النسيج الضام والدهني. يعد التفريق بين الشرايين والأوردة على مستوى الأوعية الدقيقة مشكلة عندما لا يكون هناك دم في الأوعية. لذا فإن القيام بذلك في السليم هو الأفضل.

بعد ذلك ، قم بقص جزء بطول ملليمترين إلى ثلاثة ملليمترات من الشريان المساريقي من الدرجة الثالثة وضعه في طبق يحتوي على أكوام. المخزن المؤقت PSS. يجب ألا يحتوي الجزء الشرياني على أي تفرع.

قم بإعداد غرفة myo عن طريق ملء القنيات برفق من خلال صمامات المدخل والمخرج بمحلول PSS أكوام من حقنة سعة 10 مليلتر ، اعلم أن الضغط المفرط يمكن أن يتلف محول الطاقة الهش المتصل بالقنيات. بعد ملء القنيات بإحكام ، أغلق كلا الصمامين. الآن انقل الجزء الشرياني المعزول إلى الغرفة وقم بتركيب أحد طرفي الوعاء على القنية اليمنى.

اربطه بعناية بخيط رفيع من خياطة النايلون باستخدام تدفق حقنة واملأ الوعاء بمحلول كومة عبر صمام المدخل. الآن قم بتركيب الطرف الآخر من الوعاء على القنية اليسرى وقم بتأمين القنية في الوعاء باستخدام خياطة النايلون. املأ الغرفة بما يصل إلى 10 مل من محلول الكومة.

تحقق من وجود تسرب عن طريق دفع محلول الكومة برفق عبر صمام المدخل بمساعدة حقنة. الآن ضع الغرفة تحت كاميرا الفيديو. ابدأ الأكسجين وقم بتسخين الغرفة إلى 37 درجة مئوية أثناء إغلاق صمام المدخل ، متصلا بأنبوب P واحد من خزان محلول الكومة الأول.

دع أي فقاعة ومحلول يمر عبر الأنبوب حتى تختفي الفقاعات في الأنبوب. ثم افتح الصمام. قم بتوصيله بالصمام الأيسر للغرفة باستخدام الأنبوب P اثنين.

قادما من منظم الضغط ، تأكد من عدم وجود فقاعات أو تسرب في النظام بأكمله. انتقل إلى قائمة الضغط على لوحة واجهة myo أو في البرنامج وقم بتشغيل المضخة أثناء إيقاف تشغيل التدفق. افتح البرنامج وانقر فوق "تجميع".

أصبح من الممكن الآن مراقبة وتحليل قطر وعاء تجويف السفينة وسماكة الجدار. لرفع الضغط بين اللمعة تدريجيا ، حدد ضغط P واحد وأدخل سلسلة من الضغط التصاعدي. القيم من خمسة إلى 60 ملم من أوعية الزئبق ، أحيانا تلتف أو تلتف أثناء زيادة الضغط ، لذا اضبط التوتر أو الإجهاد وفقا لذلك بمساعدة محدد موضع جزئي رأسي أو طولي.

بمجرد أن يصل الضغط إلى 60 ملم ويكون الحمام عند 37 درجة مئوية ، قم بموازنة الوعاء لمدة 45 دقيقة على الأقل وحتى ساعة واحدة خلال فترة التوازن. قم بتغيير محلول الاستحمام مرة واحدة باستخدام أكوام دافئة. الآن بعد أن أصبح الجزء الشرياني متوازنا ، ضع 10 ملليلتر من محلول إزالة الاستقطاب بكلوريد البوتاسيوم عند 37 درجة مئوية.

سوف تزيل العضلات الملساء استقطاب تماما وتحقق أقصى قدر من الانقباض. بعد الحصول على انقباض مستقر ، اشطف الحمام بمحلول كومة ثلاث مرات كل 10 دقائق. تحقق الآن من صلاحية الوعاء وسلامة البطانة.

أولا ، قم بتضييق الوعاء مسبقا عن طريق إضافة فينيليفرين للميل إلى سالب خمسة مولات لكل لتر. عندما يتم الحصول على انقباض مستقر, أداء تركيز تراكمي تركيز توسع الأوعية منحنى الاستجابة عن طريق إضافة متسلسلة من جرعات متزايدة من أستيل من 10 إلى سلبية, تسعة إلى 10 إلى سالب خمسة مول لكل لتر بعد آخر جرعة أستيل كولين. شطف المستحضر مع أكوام ثلاث مرات على فترات 10 دقائق.

الآن ، حدد قطر التجويف السلبي عن طريق تطبيق PSS الخالي من الكالسيوم الذي يحتوي على ملليمول من EGTA لكل لتر من التتبع المسجل. قم بقياس قطر التجويف لكل استجابة جرعة ، والتي سيتم استخدامها لحساب جميع المعلمات. التعبير عن استجابة استرخاء الأسيتيل كولين كمقارنة بين العلاج مع ناهض ومخزن مؤقت خال من الكالسيوم من حيث مقدار تغيير قطر التجويف من الانقباض الناجم عن الفينيل إيفرين.

تم استخدام تصوير عضل ضغط الحالة لدراسة استرخاء الأوعية الدموية استجابة للأستيل كولين في شرايين مقاومة المساريقية المعزولة من النوع البري والفئران بالضربة القاضية SGC alpha one على خلفيات S ستة والسوداء الستة ومقيدة مسبقا بالفينيليفرين. ارتبط نقص SGC alpha One بانخفاض قدرة الأستيل كولين على إحداث استرخاء الأوعية الدموية بغض النظر عن الخلفية الجينية للفئران المدروسة. ومع ذلك ، كان الاسترخاء المعتمد على البطانة لفئران فارغة واحدة SGC Alpha أكثر ضعفا بشكل ملحوظ في خلفية S ستة من الخلفية الستة السوداء.

تشير هذه النتائج معا إلى أن انخفاض حساسية الأوعية الدموية للاسترخاء المعتمد على البطانة قد يساهم في ارتفاع ضغط الدم الخاص بالإجهاد في الفئران بالضربة القاضية SGC Alpha بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء هذه التقنية في ساعة أو ساعتين إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. بالإضافة إلى هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل الفحص المجهري متحد البؤر بشكل متزامن على الأوعية الدموية للحياة. سيسمح هذا ، على سبيل المثال ، بقياس تركيزات الحديد داخل الخلايا التي يمكن أن تساعد في تحديد آليات الإشارات الأساسية.