مقدمة عن الماصة الدقيقة

تعد الماصة الدقيقة (micropipettor) أداة مهمة تُستخدم لقياس أحجام صغيرة من السوائل بدقة. وتتوفر هذه الأداة البحثية، التي يمكن العثور عليها في العديد من المختبرات البحثية حول العالم، بأشكال وأحجام متنوعة. ومع ذلك، وعلى الرغم من التباين بين الماصات الدقيقة، فإن جميعها تعمل بطريقة مماثلة لقياس كميات من السوائل بوحدة الميكرولتر بدقة. وتُستخدم الماصات الدقيقة مع رؤوس (tips) قابلة للتخلص منها، والتي تتوفر هي الأخرى، مثل الماصات الدقيقة، بمجموعة متنوعة من الأحجام.

تشترك جميع الماصات الدقيقة في المكونات الأساسية ذاتها لسحب السوائل وتفريغها. يوجد المكبس في الجزء العلوي من الماصة، ويُستخدم لسحب السائل أو طرده بناءً على الموضع الذي يُضغط عليه أو يُحرر منه.

يُستخدم قرص ضبط الحجم لتغيير كمية السائل المراد نقلها.

تُقرأ شاشة عرض الحجم من الأعلى إلى الأسفل. وبناءً على الماصة الدقيقة المستخدمة، تعكس الأرقام رتباً مقداره مختلفة في قياس الحجم. وهنا يمكنكم رؤية قياس قدره 370 µL.

يتم تركيب الرؤوس ذات الاستخدام الواحد في الجزء السفلي من الماصة الدقيقة.

يعمل زر طرد الرأس وعمود طرد الرأس معاً لطرد رؤوس الماصات عند الحاجة إلى التخلص منها.

تضم عائلة الماصات الدقيقة (micropipettors) عدة أنواع بأحجام مختلفة لنقل نطاقات دقيقة من الأحجام.

يمكنكم رؤية هذه العائلة مصطفة هنا وفقاً لنطاقات الحجم التي يمكن لكل منها نقلها. على سبيل المثال، تقوم الماصة P-1000 بنقل حجم يتراوح بين 200-1000 µl، بينما تقوم الماصة P-2، وهي الأصغر في المجموعة، بنقل حجم يتراوح بين 0.2-2 µl.

يمكن تمييز كل فرد من أفراد العائلة من خلال رقم موجود في أعلى المكبس، ومن خلال اللون، مما يوضح هويتها وحجم السائل الذي يمكنها نقله بسهولة.

في بعض الأحيان، تظهر أنواع أخرى من الماصات الدقيقة في التجارب، مثل P5000 وP100 وP10. ومعاً، يمكن لهذه المجموعة الموسعة المساعدة في نقل سوائل بأحجام تتراوح من 0.2-5000 µl.

ولضمان نقل السوائل بدقة وإحكام أكبر، تتوفر رؤوس ماصات بأحجام مختلفة، وغالباً ما تكون مرمزة بالألوان لتسهيل التعرف عليها، وتُستخدم مع أحجام مختلفة من الماصات. وفيما يتعلق بالحجم المنقول، عادةً ما تنقل رؤوس الماصات الدقيقة البيضاء ما بين 0.5-2.5 μl، والرؤوس الصفراء لنقل 1-200 µl، والرؤوس الزرقاء لنقل من 200 إلى 1000 μl.

عند استخدام الماصة الدقيقة، اختر أولاً الأداة ذات النطاق المناسب للحجم الذي ترغب في نقله. إن الاختيار الصحيح للماصة قد يشكل الفرق بين نجاح التجربة أو فشلها.

للبدء، اضبط القرص على الحجم المطلوب. لزيادة حجم السحب، أدر القرص في اتجاه عكس عقارب الساعة، متجاوزاً الحجم المطلوب بمقدار ثلث دورة، ثم قلل الحجم ببطء حتى العلامة النهائية. ولتقليل الحجم، أدر القرص في اتجاه عقارب الساعة.

ضع في اعتبارك أن هذه الأرقام في قراءة الحجم لها رتب مقدارية مختلفة اعتماداً على نوع الماصة الدقيقة. على سبيل المثال، نرى على اليسار الماصة P1000، وهي تقرأ 370 µl؛ حيث يوجد صفر في خانة الآلاف، و3 في خانة المئات، و7 في خانة العشرات. وعلى اليمين توجد الماصة P200، وهي تعرض 159 µl بوجود 1 في خانة المئات، و5 في خانة العشرات، و9 في خانة الآحاد.

بمجرد ضبط الحجم، اختر الطرف المناسب.

الآن، أمسك الماصة الدقيقة في وضع عمودي بحيث يكون الجزء الضيق من الجسم في راحة يدك والجزء البارز فوق إصبع السبابة،

باستخدام ضغط خفيف لخفض المكبس إلى منتصف المسافة تقريباً نحو التوقف الأول، أو عندما تبدأ في الشعور بمزيد من المقاومة.

هذا الإجراء يزيح الهواء من طرف الماصة.

مع إبقاء المكبس مضغوطاً، اغمر الطرف بعمق يتراوح بين 1-3 mm في العينة. حرر المكبس بسلاسة ليعود إلى وضع الراحة، وانتظر ثانية واحدة لينتقل السائل إلى الطرف، ثم أخرج الماصة من العينة.

عند تحرير المكبس ليعود إلى وضع الراحة، يتم سحب السائل بفعل الفراغ الناتج عن إزاحة الهواء.

افحص الطرف للتأكد من سحب كمية السائل المطلوبة وخلو الطرف من فقاعات الهواء.

عند نقل العينة إلى الوعاء المطلوب، أمسك الماصة الدقيقة بزاوية تتراوح بين 10-45° مقابل الجدار الداخلي للوعاء المستقبل. سيمنع ذلك تكون الفقاعات عند الطرف. لطرد السائل، اضغط المكبس بخفة وسلاسة حتى التوقف الأول لبدء توزيع السائل، ثم، مع تطبيق مقاومة أقوى، اضغط المكبس تماماً حتى التوقف الثاني لـ "نفخ" آخر جزء من السائل من الطرف.

أخرج الطرف تماماً من الوعاء، ثم حرر المكبس ليعود إلى وضع الراحة.

الآن استخدم زر الإخراج للتخلص من طرف الماصة بعناية في الوعاء المناسب. انتبه لما تفعله، لأن الأطراف المقذوفة يمكن أن تعمل كقذائف وقد تسبب إصابة لزملائك في المختبر.

للحفاظ على كفاءة عمل الماصات الدقيقة وحماية آلية ضبط الحجم الداخلية، لا تقم أبداً بتدوير قرص ضبط الحجم إلى قيمة أعلى أو أقل من النطاق المحدد للماصة الدقيقة، حيث قد يؤدي ذلك إلى كسر الجهاز.

ولتجنب التلوث الخلطي بين العينات، قم بتغيير الرأس البلاستيكي بعد كل عملية نقل للحجم.

تعد اتساق أداء المشغل أمراً هاماً عند العمل بالماصات الدقيقة؛ حيث أن الضغط السلس على المكبس سيؤدي إلى الحصول على نتائج تجريبية مثالية. وأخيراً، تذكر أنه للحفاظ على الماصات الدقيقة في حالة أداء قصوى، يجب دائماً تخزين الأجهزة في وضع عمودي عندما لا تكون قيد الاستخدام.

بعد أن تناولنا التشغيل الأساسي ومبادئ استخدام الماصات الدقيقة، دعونا نناقش بعض التطبيقات المختبرية الشائعة لنقل الأحجام الدقيقة بالإضافة إلى أنواع مختلفة من هذه الأداة.

تُستخدم الماصات الدقيقة بشكل متكرر لنقل معلقات الخلايا إلى أطباق الزرع لإجراء مجموعة متنوعة من التجارب.

وباستخدام رؤوس متخصصة، يمكن استخدام الماصات الدقيقة لتحميل العينات بعناية في التقنيات التحليلية، مثل الرحلان الكهربائي لهلام DNA.

كما يمكن استخدام الماصات الدقيقة لتفتيت الأنسجة ميكانيكيًا، وذلك للحصول على معلقات من الخلايا المفردة.

ويمكن العثور في المختبر أيضًا على أنواع مختلفة من الماصات الدقيقة التي تعمل بنظام إزاحة الهواء.

تسمح الماصات التكرارية (Repeater pipettes) بسحب أحجام صغيرة بشكل متسلسل بعد سحب أولي لحجم أكبر من المحلول. وتعد هذه الماصات مفيدة جدًا لنقل نفس الحجم من العينة إلى عدد كبير من الأوعية.

تُستخدم الماصات متعددة القنوات عادةً لنقل أحجام في نطاق 20-200 μl، وهي مفيدة لتحميل صفوف كاملة من أطباق الـ 96 بئرًا.

لقد شاهدت للتو مقدمة JoVE عن الماصات الدقيقة (micropipettors).

لقد استعرضنا في هذا الفيديو: ماهية الماصة الدقيقة وآلية عملها، وكيفية سحب وتوزيع عينة من حجم سائل، وبعض الاحتياطات الوقائية، والتطبيقات المختلفة للماصات الدقيقة. شكراً للمشاهدة، وتذكر دائماً اختيار الماصة المناسبة لتجاربك.