بناء فانتوم تعدد الوسائط ما قبل السريرية باستخدام مواد الأنسجة، محاكاة لضمان الجودة في قياس حجم الورم

الهدف العام من هذا الإجراء هو بناء شبح ضمان الجودة متعدد الوسائط لقياس حجم الورم بدقة. أولا ، اجعل أنسجة كائن الاختبار تحاكي المواد وصب كائنات الاختبار باستخدام قوالب السيليكون. قم بتركيب كائنات الاختبار في حاوية نصف أسطوانية وقم بلصق الألومنيوم الرقيق غير الموصل.

بعد ذلك ، اصنع أنسجة الخلفية التي تحاكي المواد واسكبها في الحاوية. الآن أغلق الشبح بإحكام وقم بتدويره في مدور. هذه النتيجة هي شبح متعدد الوسائط مع إمكانية محاكاة الأورام بدقة معلومات فنية حول بناء ضمان الجودة متعدد الوسائط.

فانتوم محدود. يصعب تعلم البناء بسبب الدقة العالية المطلوبة في حجم كائنات الاختبار المحفزة للورم. يوضح هذا الفيديو الخطوات المهمة في بناء الشبح.

أولا ، أضف 20 مل من الحليب كامل الدسم التجاري إلى الدرق. ثم مرر الحليب عبر مرشح 20 ميكرومتر ، ثم من خلال مرشح شبكي 10 ميكرومتر. بعد ذلك ، قم بإذابة 0.02 جرام من الماريسول في 10 مل من الحليب وحركها ببطء.

الآن باستخدام فراغ منزلي ، قم بإزالة محلول الحليب لمدة 30 ثانية في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، قم بإذابة 0.6 جرام من الشعر الجاف في 10 مل من الماء منزوع الأيونات في درجة حرارة الغرفة ، وحرك ببطء. ثم أضف 0.79 مل من بروبانول واحد.

بعد تحضير محلول ARO ، قم بتسخينه في حمام مائي 95 درجة مئوية حتى يصبح المحلول الزراعي صافيا. في هذه الأثناء ، سخني الحليب المكثف في حمام مائي 55 درجة مئوية. عندما يبدو محلول ARO واضحا ، انقل محلول ARO المنصهر إلى حمام مائي 55 درجة مئوية.

بمجرد موازنة 55 درجة مئوية ، امزج خمسة ملليلتر من محلول أجارو مع خمسة ملليلتر من الحليب المكثف وحرك الخليط ببطء. ثم أضف 1.7 ملليغرام من EDTA ومليغرام واحد من كلوريد النحاس إلى خليط حليب agros وحرك تجانسا على قالب السيليكون بدون ثقوب ملليمتر واحد. قم بتوصيل خيط نايلون على طول وسط الكرات وألصقه على طرفي القالب.

باستخدام فرشاة ناعمة ، ضع شحم السيليكون على سطح قالبين وقم بتجميع قالبين باستخدام قضبان المحاذاة والأربطة المطاطية. الآن ، قم بحقن أنسجة كائن الاختبار ببطء التي تحاكي المواد من خلال ثقوب ملليمتر واحد من قالب السيليكون ، باستخدام إبرة قياس 22 من حقنة لتجنب فقاعات الهواء. ثم قم بتخزين القوالب في الثلاجة لمدة 30 دقيقة حتى يتم ضبط كائن الاختبار.

بعد ذلك ، قم بتفريغ كائنات الاختبار من القالب وقم بتمرير خيط النايلون عبر فتحات ملليمتر واحد في جانب واحد من الحاوية الأسطوانية. كرر هذا للجانب الآخر. ثم قم بتركيب كائنات الاختبار في الحاوية باستخدام لحام سكوتش DP 100 وشريط لاصق يلتصق بالألمنيوم الرقيق غير الموصل على حاوية الأكريليك.

قم بسد الثقوب التي يبلغ طولها 1 ملليمتر في حاوية الأكريليك باستخدام نفس الغراء لتحضير مواد محاكاة الأنسجة الخلفية. قم بتصفية الحليب التجاري كما كان من قبل ثم قم بإذابة 0.2 جرام من الماريسول في 100 مل من الحليب المصفى وحرك بعد ذلك ديغا محلول الحليب لمدة 30 ثانية في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، قم بإذابة جرامين من الأروس الجافة في 100 مل من الماء منزوع الأيونات عند 7.9 مل من بروبانول واحد وجرام واحد من كبريتات الباريوم.

ثم يقلب ببطء بعد تفريغ محلول ARO. قم بتسخينه في حمام مائي 95 درجة مئوية حتى يصبح محلول ARO صافيا. في هذه الأثناء ، سخني الحليب المكثف في حمام مائي 55 درجة مئوية.

انقل المحلول الزراعي المنصهر إلى حمام مائي 55 درجة مئوية. بمجرد موازنة 55 درجة مئوية ، امزج 50 مل من محلول ARO مع 50 مل من الحليب المكثف. حرك الخليط ببطء.

ثم أضف 103 ملليغرام من EDTA و 60 ملليغرام من كلوريد النحاس إلى خليط aros ، متبوعا بالتحريك الكافي. أضف 0.1 جرام من الخرز الزجاجي وحرك. ثم صب الخليط ببطء من خلال فتحة الحاوية التي يبلغ طولها ستة ملليمترات.

بعد إزالة أي فقاعات هواء ، قم بلصق الفتحة الستة ملليمترات باستخدام اللحام الاسكتلندي DP 100. بمجرد تجميعها ، قم بتدوير الشبح عند دورتين في الدقيقة في الدوار لمدة أربع إلى خمس ساعات. في درجة حرارة الغرفة ، قم بإزالة خيط النايلون بعد أن تصلب الأنسجة التي تحاكي المواد الموجودة في الشبح تماما.

يتم الآن فحص الشبح في الموجات فوق الصوتية قبل السريرية والتصوير المقطعي المحوسب والتصوير بالرنين المغناطيسي ويتم الحصول على الصور في ثلاث طرق. تظهر هنا كائنات اختبار ذات أقطار متفاوتة تم صبها باستخدام قوالب السيليكون. لا توجد فقاعات هواء في أي كائنات اختبار.

يحتوي هذا الشبح متعدد الوسائط قبل السريري على خمسة كائنات اختبار تحاكي الورم. حجمه صغير بما يكفي ليتناسب مع أي طرق تصوير قبل السريرية. فيما يلي صور الموجات فوق الصوتية والتصوير المقطعي المحوسب والتصوير بالرنين المغناطيسي.

التباين بين كائنات الاختبار والخلفية كاف لتمييز كائنات الاختبار وقياس حجمها في جميع الطرائق الثلاث. لم يتم ملاحظة أي قطع أثرية خطيرة في أي صور باستثناء الصدى الصغير في صور الموجات فوق الصوتية. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إنشاء qa متعدد الوسائط ، وهمية بالنسبة للموجات فوق الصوتية التصوير المقطعي المحوسب والتصوير بالرنين المغناطيسي ، أعتقد أن هناك عدة طرق لبناء شبح بدقة.

لقد أظهرت نهجا واحدا يمكن تكييفه لبناء شبح لأغراض بحثية أخرى.