واسعة المجال المجهري نيون نيون قياس التدفق الخلوي والتصوير على الهاتف الخلوي

الهدف العام من هذا الإجراء هو تحويل كاميرا الهاتف الخلوي إلى منصة مجهر فلوري أو مقياس خلوي للتصوير الفلوري. أولا ، يتم جمع انبعاث الفلورسنت من خلال عدسة متصلة تم وضعها بين الهاتف الخلوي ووحدة الكاميرا والعينة ذات الاهتمام. بعد ذلك ، يرفض مرشح بلاستيكي بسيط داخل المرفق ضوء الإثارة المتناثر ، مما يخلق خلفية مجال داكن للتصوير الفلوري ، ويحول هاتف الكاميرا إلى مجهر فلوري أو مقياس خلوي للتصوير.

في الخطوة الأخيرة ، يتم التقاط صورة أو مقطع فيديو لجزيئات الفلورسنت ذات الأهمية باستخدام الكاميرا في الوضع الليلي. في النهاية ، يمكن تصوير حبات أو خلايا الفلورسنت وتمييزها بواسطة كاميرا الهاتف الخلوي. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الكتل الموجودة ، مثل استخدام المجهر الفلوري التقليدي ، هي أن المجهر القائم على الهاتف الخلوي مضغوط وخفيف الوزن وفعال من حيث التكلفة ، ولديه إمكانية استخدامه في تشخيص نقاط الرعاية.

في الإعدادات المحدودة للموارد حيث لا تتوفر خدمات الرعاية الصحية التقليدية لتجميع المجهر الفلوري واسع المجال لتجميع الميكروسكوب الفلوري واسع المجال بوضع عدسة بلانو المحدبة في المرفق البصري داخل موضع حامل العدسة المحدد. ثم ضع الفلتر البلاستيكي على صينية الفلتر وحركه في المرفق. بعد ذلك ، أدخل درج LED في المرفق.

ضع شرائح زجاج العينة في درج العينة، ثم حرك درج العينات في المرفق. بعد مواجهة مصابيح LED باتجاه مقطع العينة ، يتم تجميع الفحص المجهري الفلوري واسع المجال على الهاتف الخلوي ، بحيث تكون العدسة الإضافية على اتصال مباشر بعدسة كاميرا الهاتف الخلوي. استخدم الآن المفتاح الموجود على المرفق لتشغيل مصابيح LED وتصوير العينة محل الاهتمام بكاميرا الهاتف الخلوي.

في الوضع الليلي. عندما تكون هناك حاجة لفحص كميات كبيرة من العينات السائلة للكشف عن الأحداث النادرة ، يمكن تجميع جهاز قياس التدفق الخلوي للسوائل. ابدأ بوضع العدسة الكروية A في المرفق.

ثم قم بلصق مرشح امتصاص البلاستيك أمام عدسة الكاميرا وحرك حجرة الموائع الدقيقة في المرفق. الآن قم بقص مرفق السائل البصري المجمع لقياس الخلايا للتصوير الفلوري على الهاتف الخلوي ، بحيث تكون العدسة الإضافية على اتصال مباشر بعدسة كاميرا الهاتف الخلوي ، واستخدم المفتاح الموجود على المرفق لتشغيل مصابيح LED. بعد ذلك ، قم بتوصيل قناة الموائع الدقيقة بمضخة الحقنة وتسليم العينة السائلة إلى جهاز الموائع الدقيقة بمعدل تدفق ثابت.

ثم باستخدام وضع الفيديو لكاميرا الهاتف الخلوي ، التقط فيلما للخلايا الفلورية المتدفقة عبر قناة الموائع الدقيقة لإعداد عينات من الجسيمات الدقيقة الفلورية. امزج أولا 10 ميكرولترات من حبات الفلورسنت الخضراء و 10 ميكرولترات من حبات الفلورسنت الحمراء مع 40 ميكرولتر من الماء منزوع الأيونات. باستخدام ماصة صغيرة ، ضع 10 ميكرولترات من خليط الخرز على شريحة زجاجية.

ثم استخدم شريحة زجاجية أخرى لعمل هيكل شطيرة. أخيرا ، أدخل هيكل الساندويتش في درج العينة لمرفق الفحص المجهري الفلوري واسع المجال وحركه في مرفق الهاتف الخلوي. لتحضير عينة من خلايا الدم البيضاء المسمى بالفلورسنت ، قم أولا بنقل 200 ميكرولتر من عينة دم كاملة من أنبوب جمع الدم EDTA إلى أنبوب البوليسترين سعة 1.5 مل.

ثم أضف ملليلترا واحدا من محلول تحلل خلايا الدم الحمراء إلى عينة الدم الكاملة سعة 200 ميكرولتر واخلطها جيدا بعد خمس دقائق ، وقم بالطرد المركزي لعينة الدم المحللة. ثم قم بإزالة التعليق الطافي ، وحبيبات خلايا الدم البيضاء في 200 ميكرولتر من PBS ، واخلط الخلايا برفق بعد الطرد المركزي. مرة أخرى ، قم بإزالة المادة الطافية وإعادة تعليقها في PBS.

بعد ذلك ، أضف خمسة ميكرولترات من محلول واحد مليمولار سيتو 16 إلى خلايا الدم البيضاء واحتضان العينة في ورق الألمنيوم لمدة 30 دقيقة. ثم بعد تدوير العينة ، مرة أخرى ، قم بتعليق حبيبات خلايا الدم البيضاء المسمى في المزيد من PBS ونقل خمسة إلى 10 ميكرولترات من عينة الخلية إلى زلة غطاء. ضع زلة غطاء ثانية في الجزء العلوي من العينة ثم أدخل زلات الغطاء المحصورة في درج العينة.

قم بتصوير العينة باستخدام ملحق المجهر الفلوري للهاتف الخلوي. بدلا من ذلك ، يمكن توصيل الخلايا المسماة باستمرار من خلال قناة الموائع الدقيقة باستخدام مضخة حقنة آلية محمولة تعمل بالبطارية. ثم باستخدام كاميرا الهاتف الخليوي في وضع الفيديو ، التقط فيلما مجهريا فلوريا للخلايا المتدفقة.

يمكن تصوير الخلايا أو الجسيمات الفلورية في الوضع الثابت بحيث يمكن ملاحظة مجال رؤية عينة كبير جدا بدقة مكانية تبلغ حوالي 10 ميكرومترات بدون أي تدفق سائل. على سبيل المثال ، في هذا الشكل ، تم تصوير حبات الفلورسنت الخضراء والحمراء. يتم تحقيق جودة صورة لائقة على مجال رؤية يبلغ حوالي 81 ملم مربع باتجاه حواف مجال الرؤية المركزي.

ومع ذلك ، هناك مناطق منحرفة هنا ، يتم عرض صور الهاتف الخلوي لخلايا الدم البيضاء المصنفة بالفلورسنت. يظهر هذا الجزء الداخلي صورة هاتف خلوي مكبرة رقميا لخلايا الدم البيضاء المصنفة بالفلورسنت والتي تم اقتصاصها من الصورة الرئيسية. في هذا الجزء الداخلي ، تظهر نتائج فك التشفير الانضغاطي للجزء الداخلي الأول ، وتظهر الصورة التي تم فك تشفيرها مستوى مماثلا من الوضوح لنفس عينة الخلية التي تم عرضها على هدف 10 × باستخدام مجهر فلوري تقليدي من نفس مجال الرؤية.

عند مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تحويل هاتفك الخلوي إلى مجهر جنائي أو مقياس خلوي للتصوير ، مما يسمح بتوصيف التصوير ومحتوى حبة أو خلايا الطب الشرعي.