طرق لإجراء الصلبان في الهلبانة البلدي، نظام نموذج جديد للأعشاب

الهدف العام من هذا الإجراء هو توضيح كيفية أداء الصلبان ل cter verus نظام نموذجي جديد للأعشاب. يتم تحقيق ذلك عن طريق تحديد القمة وتشذيبها ووضع العلامات عليها أولا. الخطوة الثانية هي إضعاف العناقيد المشذبة عن طريق غمسها في حمام مائي 48 درجة مئوية.

بعد ذلك ، يتم استخدام القمة المشذبة كأنثى للتلقيح بواسطة قمة تتخلص من حبوب اللقاح. الخطوة الأخيرة هي حصاد البذور بعد أسبوعين من التلقيح المتبادل. في النهاية ، يتم استخدام تلطيخ جوس للبذور الهجينة المفترضة لإظهار فعالية هذه التقنية.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل الإخصاء الجسدي ، هي أنها أقل توغلا ويسهل إنشاؤها نسبيا في المختبر. ستساعد هذه الطريقة في تسريع اعتماد cter verus كنموذج جيني من خلال تسهيل إجراء التهجين. للبدء ، قم بإزالة خلية واحدة للري ثم املأ صينية بأربع خلايا في تسع خلايا باستخدام مترو ميكس 360.

بعد ذلك ، قم برش الخلايا برفق وزرع البذور على سطح التربة ، بذرة واحدة لكل خلية. ثم قم بتغطية البذور بطبقة من التربة ، ضباب بسمك 0.5 سم على سطح التربة لترطيبها ، ثم سقي المسطحات من القاع. استمر في سقي الخلايا من القاع مرة إلى مرتين يوميا بعد بذر البذور ، مع الحرص على عدم الإفراط في الماء.

اضبط ظروف غرفة النمو على 31 درجة مئوية أثناء النهار و 22 درجة مئوية ليلا مع معالجة بريدا بمقدار 15 درجة مئوية من الساعة 8:30 صباحا حتى 9:00 صباحا. حافظ أيضا على جدول زمني لمدة 12 ساعة من الظلام الفاتح واضبط الرطوبة النسبية على 50٪ في ظل هذه الظروف. Satter verus a 10.1 سوف يزهر من 21 إلى 22 يوما من بذر البذور. من الناحية المثالية ، يتم إجراء الإخصاء في فترة ما بعد الظهر أو في المساء.

حدد الخماسي الأساسي على كل نبات يحتوي على زهرة إلى خمس أزهار في الإزهار. ثم اقطع طرف الخماسي وقم بإزالة جميع الأزهار في الجزء السفلي من الأقسام الوسطى والقاعدة القريبة باستخدام ملقط ناعم. إذا كان يحتوي على واحد فقط من 10 إلى خمس الأزهار في الإزهار.

من أجل الاحتفاظ بالجزء السفلي من الجزء البعيد والمتوسط والعلوي من الوسط القريب لمزيد من التشذيب ، قم بقطع الطرف وتقليم الأزهار من قاعدة الذعر. إذا كانت العناقيد تحتوي على ربع إلى نصف أزهار تتفتح ، احتفظ بالجزء الأوسط القريب لمزيد من التشذيب وقطع الجزء الأوسط البعيد. بمجرد قطع الخماسي ، استخدم مقصا جراحيا لتقليم الشعيرات برفق.

احرص على الاحتفاظ بالشعيرات في المنطقة التي سيتم تلقيحها من أجل حماية الزهيرات من التلف الحراري المحتمل. لكل سنيبلات ، احتفظ بالزهرة الناضجة العلوية. سيكون للزهور العلوية احتمال أكبر للانضح في وقت التلقيح.

ثم قم بإزالة جميع الزهور التي ازدهرت وجميع الأزهار غير الناضجة ، تاركا ما يقرب من 20 إلى 30 زهرة لكل قمة موزعة بالتساوي. بعد ذلك ، ضع علامة على جانب واحد من كل زهرة بعلامة حمراء دائمة. وسجل عدد الزهيرات على قمة القمة بالمعلومات التالية ، وتاريخ الإخصاء ، والمدة ، ودرجة الحرارة التي يتم عندها إجراء الإخفاق.

بمجرد قطع العناقيد ، قم بإزالة جميع الحراثة في كل نبات لضمان إعادة تخصيص المزيد من الموارد لتطوير القمة الرئيسية. قبل ساعة واحدة من الإقلاء ، اضبط حماما مائيا على 48 درجة مئوية للمعالجة الحرارية. بمجرد تسخينها مسبقا ، قم بثني الخماسيات المشذبة برفق واغمس ثلاثة إلى أربعة في المرة الواحدة في ماء دافئ لمدة ثلاث إلى ست دقائق.

توخي الحذر حتى لا تكسر جذع الخماسي. يجب ألا تتلامس ورقة العلم ، التي تتجاوز عشرات الخماسي مع الماء الدافئ. هذا لمنع التلف الحراري لأنسجة الأوراق.

بمجرد إجراء الإخصاء للمدة المطلوبة ، قم بإزالة العناقيد من الحمام المائي وتخلص من الماء برفق من الذعر. ثم قم بتغطية العناقيد المعزولة بالكامل بكيس خبز مثقوب دقيق مخصص وقم بتثبيته بربطة عنق ملتوية. يمكن تخصيص أكياس الخبز المثقبة الصغيرة وفقا لحجم الذعر.

أخيرا ، ضع النباتات مرة أخرى في غرفة النمو حتى اليوم التالي. في الساعة 9:00 صباحا في اليوم الثاني واليوم الثالث ، انقل الآباء الإناث الضعيفين وغير الذكور من غرفة النمو إلى المختبر لأداء التهجين ومراقبة وإضافة أحمر آخر. للزهور التي أزهرت أو تتفتح.

باستخدام علامة حمراء دائمة ، سجل العدد الإجمالي للزهور المزهرة لكل عناقيد. ثم سجل تاريخ التلقيح واسم الوالد الذكر على العلامة لتتبع التهجين الذي تم إجراؤه. راقب وقت ذروة النقيض لدى الآباء الذكور في ظل ظروف المختبر لدينا ، تبدأ الأزهار الموجودة على خماسيات الوالد الذكر في الفتح المتزامن حوالي الساعة 10:10 صباحا بمجرد الفتح ، سيحدث الجهد الكامل للعضو الآخر وإطلاق حبوب اللقاح بعد 20 دقيقة.

ابدأ التلقيح على الفور عندما يتحول إلى اللون الأصفر. تظهر الأنثرات البيضاء على أزهار الوالد الذكر. يتم إجراء التلقيحات في اليوم الثاني واليوم الثالث باستخدام عناقيد للتلقيح أو التلقيح الآخر.

باستخدام عناقيد واحدة منفصلة حيث يقوم الذكر بفرك العناقيد برفق مع العناقيد المعزولة لتسهيل التلقيح والتخلص من عناقيد الذكور لتجنب التلوث ، كرر عملية التلقيح حتى يتم تلقيح كل قمة معزولة بواسطة اثنين إلى ثلاثة خماسي. الطريقة الأكثر فعالية هي التلقيح اللاحق باستخدام الملقط. اختر زهرة تتفتح بأنثرات بيضاء صفراء أو اختر أنثرات ولمس وصمة الزهرة جسديا على الوالد.

استخدم زهرة واحدة من الوالد الذكر لتلقيح زهرة واحدة على العناقيد المعزنة بين تلقيح الآباء الذكور المختلفين. اغمس الملقط في 95٪ من الإيثانول ، متبوعا بالمسح بمناديل كيم المبللة لتجنب التلوث بسبب ترحيل حبوب اللقاح بين الصلبان المختلفة. بمجرد إجراء التلقيح ، قم بتغطية عناقيد الوالدة الأنثوية بكيس خبز مثقوب دقيق مخصص وثبته في القاعدة باستخدام ربطة عنق ملتوية.

بعد التلقيح حتى حصاد البذور ، قم بحصاد البذور بعد 14 إلى 16 يوما من يوم التلقيح وضع العلامة في نفس مظروف البذور. تمثل البذور ذات العلامات الحمراء على كلا الجانبين البذور التي نتجت عن الصليب الجيني الخاضع للرسائر. تخلص من أي بذور بدون علامات حمراء لأنها تمثل البذور الناتجة عن الزهور المطورة حديثا.

بعد إضعاف البذور ذات العلامات الحمراء ، من المحتمل أن يمثل جانب واحد فقط البذور الناتجة عن التلقيح الذاتي. أخيرا ، جفف البذور على حرارة 30 درجة مئوية لمدة يومين. قم بتخزين البذور المجففة في المختبر ، أو من الناحية المثالية في غرفة البذور.

عندما تكون جاهزا لمزيد من التحليل ، قم بإزالة الفيزياء إذا لزم الأمر. كانت الطرق الموصوفة في هذا الفيديو نتائج العديد من التجارب باستخدام درجات حرارة وأوقات معالجة مختلفة لتحسين عملية الإضعاف. تم قياس نجاح هذه العملية بعدد البذور المهجنة التي تم الحصول عليها.

ست بذور من أحد معابر الاختبار حيث حمل الوالد الذكر مراسلا. يتم عرض ترميز الجينات لبيتا جلوكورونيداز هنا. يتسبب جين المراسل في تحول البذرة إلى اللون الأزرق عند تلطيخها ، مما يجعل من السهل حساب عدد البذور الهجينة بمجرد إتقانها ، يمكن عبور ما يصل إلى 15 خماسيا يوميا إذا تم تنفيذ الإجراء بشكل صحيح.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية أداء الصلبان في Aria verus.