تقييم الاختلافات في القدرة التنافسية في الحيوانات المنوية ذبابة الفاكهة

الهدف العام من التجربة التالية هو اختبار الاختلافات في القدرة التنافسية للحيوانات المنوية بين ذبابة الفاكهة ، ذكور ميلانوجاستر مع أنماط وراثية متميزة. يتم تحقيق ذلك من خلال تتبع العلامات الجينية المرئية التي تحدد أبوة النسل من أنثى تتزاوج مع ذكرين مختلفين ، والأنماط الجينية في الفحص ، يسمح للإناث أولا بالتزاوج مع ذكر مرجعي ثم يسمح لها بالتزاوج مع ذكر تجريبي. يتم الاستدلال على جزء النسل الذي يحققه الذكر التجريبي من خلال فحص لون عين النسل.

تقارن النتائج بشكل غير مباشر القدرة التنافسية للحيوانات المنوية الذكرية التجريبية من خلال أدائها النسبي بالحيوانات المنوية الذكرية المرجعية. يمكن أن تساعد هذه الأساليب في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في علم الوراثة والتطور في مجالات علم الأحياء ، مثل تقييم تأثير العامل الوراثي على القدرة التنافسية ل SPR مما يدل على أن هذا الإجراء سيكون S والطلاب الجامعيين من مختبرنا. يوضح البروتوكول التالي تحليل عامل وراثي يسمى كذا ، والذي يفترض أنه يشفر بروتينا مشاركا في حركة المنوية.

ابدأ بإعداد 15 إلى 20 قارورة لكل قارورة. رش الوسائط برفق بقليل من حبيبات الخميرة النشطة المجففة. لتسهيل موقف ove.

استخدم دائما وسائط مغذية طازجة مثل وسط خميرة دقيق الذرة. ثم أضف إلى كل قارورة ثماني إلى 10 إناث ، ولكن ليس أكثر ، وأضف خمسة ذكور. يمكن تحقيق تحديد الجنس عن طريق الفحص البصري لبعض الاختلافات المورفولوجية.

قم بتخزين القوارير على حرارة 25 درجة مئوية وانقل البالغين إلى قوارير جديدة كل ثلاثة إلى خمسة أيام على الأقل. انقل البالغين كل يومين للحصول على أفضل نتيجة. احتفظ بالبويضة التي تحتوي على قوارير لحصاد النسل.

عدد القوارير المطلوبة على عدد أنواع الذكور التجريبية في الدراسة والعدد المقدر للأفراد اللازمين للحصول على القوة الإحصائية. بعد أربعة أو خمسة أيام من نقل الوالدين من القارورة ، قم بزيادة السطح المتاح للتشرنق في القارورة عن طريق إدخال ورق مطوي متعدد في الوسط. افحص القوارير بحثا عن خادرة داكنة عندما تكون مرئية.

ستظهر هذه الذباب في غضون 24 ساعة ، بعد 11 إلى 12 يوما من إعداد الصليب لأول مرة. ابدأ في حصاد الإناث البكر والذكور الساذجين من هذه القوارير. أول شيء في الصباح ، تخلص من الذباب الذي ظهر بين عشية وضحاها.

ثم مرة أو مرتين خلال النهار على فترات من أربع إلى ست ساعات ، اجمع الذباب من القوارير ، وتخدير الذباب عن طريق إدخال ثاني أكسيد الكربون في القارورة. ثم اضغط على الذباب لأسفل وقم بممارسة الجنس معهم تحت المجهر الاستريو. ضع الذباب المطلوب في قوارير مختلفة حسب الجنس والنمط الظاهري وقم بتسمية القوارير بشكل مناسب.

لا تقم بتحميل القوارير بأكثر من 10 محتملة. تضع الإناث البكر دورة داكنة فاتحة من 12 إلى 12 على الذباب لتنظيم وقت الانسداد لصالحك. تحدث أوقات الذروة للانسداد بعد ساعة إلى ساعتين من الفجر الذاتي ، وقبل ساعتين من إطفاء الأنوار.

هناك نسختان من هذه التجربة. يشار إليهم باسم مقايسة الهجوم ومقايسة الدفاع. يصف هذا القسم كيفية إجراء فحص الجريمة في صباح اليوم الأول ، وإعداد التزاوج الأول باستخدام شفاطة.

يتكون الشفاط من قطعة من الأنابيب متصلة بطرف ماصة مع حاجز يحافظ على الذباب المستنشق في الحافة. تم توسيع تجويف الحافة. بالنسبة للذباب ، قم بإعداد قوارير تحتوي على عشر إناث عذراء عمرهن أربعة أو خمسة أيام.

مع 10 من الذكور المرجعيين الساذجين ، قم بإعداد قوارير إلى ثلاث قوارير يوميا لمدة خمسة أيام متتالية. لكل قارورة ، اسمح للذباب بالتزاوج لمدة ساعتين ، ثم تخلص من الذكور المرجعية وانقل كل أنثى إلى قارورة جديدة باستخدام ملصق شفاط كل قارورة V واحد واترك الأنثى في القارورة لمدة يومين. في اليوم الثالث ، قم بإعداد التزاوج الثاني للذكور الساذجين من النمط الجيني الآخر لكل أنثى.

قبل ساعتين من حلول الظلام الذاتية ، استخدم شفاطة لنقل الأنثى إلى قارورة جديدة مع ذكور تجريبيين بعمر ثلاثة أو خمسة أو ستة أيام من نفس النمط الجيني. قم بتسمية القوارير بالنمط الجيني الذكري وقم بتسمية القارورة الجديدة V اثنين. صباح اليوم التالي هو اليوم الرابع.

قبل ساعتين من الذباب الذاتي ، يتخلص الفجر من الذكور باستخدام الشفاطة. في اليوم السادس ، انقل كل أنثى إلى قارورة جديدة أخرى تحمل علامة V ثلاثة. في اليوم العاشر ، تخلص من الإناث في اليوم السابع عشر.

افحص قوارير V one من النسل. حدد ما إذا كانت الأنثى عذراء أم لا عند التزاوج مع البريد المرجعي وما إذا كانت تتزاوج مع البريد المرجعي. في نفس اليوم ، افحص ذرية القارورتين V عن طريق إسقاط الذباب بالكربون.

فرزها حسب لون العين والجنس. ثم سجل عدد النسل الذي ولده الذكور الأول والثاني. في هذه التجربة ، يمكن تعيين ذرية الإناث فقط بشكل لا لبس فيه كما هو موضح من قبل المرجع أو الذكور التجريبيين.

في تجارب أخرى ، يمكن استخدام علامات وراثية مختلفة لتحديد أبوة النسل الذكور أيضا. تخلص من النسل الذي تم فحصه ، لكن احتفظ بقرنيرتين V لثانية. التفتيش في اليوم 20 ، سجل أبوة النسل من القارورتين V للمرة الثانية وقم بإجراء الفحص الأول للذرية الناشئة من القوارير الثلاثة V.

ثم بعد ثلاثة أيام في اليوم 23 ، افحص النسل الظاهر في V 3. مرة أخرى ، يجب تنظيم تعداد النسل المسجل بشكل مناسب لسهولة الفحص البصري والتحليل الفعال مع حزمة إحصائية لكل أنثى والتعداد من V اثنين و V ثلاثة. لحساب العدد الإجمالي للذرية التي تم استشهاد بها من قبل الذكر المرجعي والذكر التجريبي ، احسب درجة P اثنين لكل أنثى كنسبة من النسل الذي استشهد به الذكر التجريبي على النسل من كل من الذكور التجريبيين والمرجعيين.

يجب استبعاد بعض الإناث من التحليل. أولا ، أولئك الذين ليس لديهم ذرية أو ذرية محدودة للغاية ، والثانية الإناث اللواتي ماتن أثناء العملية والإناث الثالثة التي تم تلقيحها بنجاح فقط من قبل أحد الذكورين. ابحث عن الاختلافات الإحصائية في القيمتين P.

من بين أنواع الذكور التجريبية ، استخدم الاختبارات البارامترية أو غير المعلمية بناء على انحراف توزيع القيمتين P والتبعية بين التباين ومتوسط النسبة. لا يتم توزيع البيانات عادة بشكل طبيعي. يمكن تطبيق تحويل علامة القوس ، المعروف أيضا باسم التحول الزاوي ، على قيمتين أصليين P قبل اختبار T للطالب أو اختبار NOVA ، أو ببساطة استخدام الاختبارات غير المعلمية مثل WIL Coxin تجربتين جريمتين مع ذبابة الفاكهة السوداء.

تم إجراء الذكور التجريبيين واحدا مع الآخر بدون مجموعة ESIC وظيفية. إجمالا ، كان 58٪ إلى 83٪ من الإناث مفيدين. أظهر الذكور الذين ليس لديهم مجموعة ESIC وظيفية درجة أقل بكثير من الذكور الذين لديهم مجموعة esic سليمة.

يشير هذا إلى أن مجموعة SIC تعزز القدرة التنافسية للحيوانات المنوية. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء تجارب التزاوج المزدوج ، حتى تتمكن من اكتشاف الاختلافات في القدرة التنافسية للحيوانات المنوية بين الذكور الطافرة والسيطرة.