RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ar
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/50574-v
Tristan M. Nicholson1,2, Kristen S. Uchtmann1, Conrad D. Valdez1, Ashleigh B. Theberge1,3, Tihomir Miralem1, William A. Ricke1
1Department of Urology,University of Wisconsin-Madison, 2Medical Scientist (MD/PhD) Training Program,University of Rochester School of Medicine & Dentistry, 3Molecular and Environmental Toxicology Center,University of Wisconsin-Madison
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
وصفنا تصنيع الكريات هرمون مضغوط، فضلا عن زرع جراحية تحت الجلد في الفئران. هذه الاستراتيجية يمكن دمجها مع نمو الخلية والأنسجة xenografts تحت كبسولة الكلى من الفئران عارية athymic لتقييم التسرطن الهرمونية وتنظيم نمو البروستاتا الحميد.
التقنيات الموضحة في هذا الفيديو مفيدة في التجارب ، وتقييم التنظيم الهرموني للتسرطن والنمو الحميد للبروستاتا. تستخدم مكابس الاستئناف الأولى لصنع كريات الهرمونات التي ستسمح بالإدارة المستمرة. بعد ذلك ، يتم تحضير الماصات الزجاجية ذات الأطراف المستديرة بعد إخراج الكلى من الخارج.
يستخدم طرف الماصة للمساعدة في إدخال الكسب غير المشروع. ثم يتم زرع كريات الهرمونات المضغوطة تحت الجلد. في النهاية ، يتم الحصول على نتائج توضح آثار العلاج الهرموني على نمو الطعوم الغريبة للأنسجة الحميدة.
التقنيات المعروضة في هذا الفيديو سهلة الأداء وقابلة للتكرار. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في هذا المجال ، مثل كيفية تورط الهرمونات في تحويل الخلايا الحميدة إلى ورم خبيث ، وكذلك كيف يتم تنظيم النمو الحميد للبروستاتا بواسطة الهرمونات. تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى العلاجات الجديدة المحتملة واستراتيجيات الوقاية لتضخم الأطراف الاصطناعية الحميدة وسرطان البروستاتا.
بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه التقنية مع الجانب التقني للكبسولة الكلوية. يتم تحضير كريات Xenograft في غطاء أمان كيميائي أثناء ارتداء معدات الحماية المناسبة لبدء تنظيف معدات صنع الحبيبات جيدا باستخدام 70٪ من الإيثانول لمنع التلوث المتبادل. بعد ذلك ، قم بوزن الكمية المطلوبة من مسحوق الهرمون ، مما يسمح بحوالي 5٪ من المواد الإضافية لاستيعاب الخسارة أثناء الضغط.
تتطلب بعض الهرمونات عامل ربط أو حشو, الذي يتم خلطه قبل الشركة المصنعة للبيليه. هنا يتم دمج الاستراديول مع حشو الكوليسترول مما ينتج عنه حبيبات 25 ملليغرام. بمجرد وزن كل شيء ودمجه ، انقل المسحوق إلى dset.
ضع الصبغة تحت المكبس وادفع الرافعة لأسفل بقوة لضغط الحبيبات. استخدم ضغطا ثابتا للحفاظ على مساحة سطح ثابتة إلى نسبة الحجم. بعد ذلك ، اعكس حامل الصبغة وادفع الرافعة لأسفل مرة أخرى لتحرير الحبيبات.
افحص الحبيبات للتأكد من سلامتها وحدد ما إذا كانت الكتلة النهائية ضمن النطاق المطلوب. يمكن صنع الكريات قبل الجراحة وتخزينها وفقا لاستقرار الهرمون أو الدواء المستخدم أثناء ارتداء الحماية المناسبة. مرر طرف ماصة زجاجية من خلال اللهب ، وهي موقد بنسن لإنشاء طرف مستدير مصقول بالنار.
حافظ على حركة ثابتة وطفيفة للماصة لتجنب النقاط الساخنة. بعد ذلك، ضع الماصة في اللهب بزاوية 60 درجة تقريبا لإنشاء طرف دائري منحني. سيتم استخدام هذا الطرف لإنشاء جيب للكسب غير المشروع تحت الكبسولة الكلوية.
قبل البدء في العملية الجراحية ، قم بتعقيم جميع الأدوات اللازمة وإعداد منطقة العمل. بمجرد تخدير بشكل صحيح ، قم بتطهير موقع الجراحة بالتطبيقات المتكررة للبيتادين والكحول. بعد وضع ستائر معقمة على المنطقة ، يتم إجراء شق خط الوسط الظهري من سنتيمترين إلى ثلاثة سنتيمترات.
بعد ذلك ، افصل الأدمة الأساسية عن جدار الجسم. افصل جانبي الشق للتطعيم الثنائي ، أو جانبا واحدا فقط للتطعيم من جانب واحد. بمجرد فصله ، ضع الفأر في وضع جانبي وحدد موقع الكلية من خلال عرض المظهر الكلوي من خلال جدار العضلات.
قد يساعد الضغط اللطيف بإصبع الإبهام والسبابة في تصور الأعضاء الداخلية باستخدام مقص القزحية الناعم والحرص على تجنب الأوعية الرئيسية والأعصاب الشوكية. قم بعمل شق بطول سنتيمتر واحد في جدار الجسم بالتوازي مع العمود الفقري. قم بتوسيع هذا الشق إلى سنتيمتر ونصف إلى سنتيمترين عن طريق فتح المقص برفق على نطاق أوسع.
بعد وضعها في الشق الأولي ، قم بإخراج الكلى من الخارج عن طريق الضغط برفق خارج جدار العضلات على جانبي الكلى. بعد ذلك ، ثني حواف الجلد أسفل الكلية الخارجية ، والتي ستستقر على جدار الجسم. إذا كانت هناك هياكل أخرى أيضا ، فيمكن وضعها برفق أثناء وضع الكلية للخارج.
الحفاظ على ترطيب الكبسولة الكلوية عن طريق وضع محلول ملحي معقم. ارفع كبسولة الكلى برفق وقم بعمل شق من ملليمترين إلى أربعة ملليمترات. يتم تحديد حجم الشق حسب حجم الكسب غير المشروع ، ولكن يجب تقليله من أجل الحفاظ على سلامة الكبسولة.
أدخل الطرف المغلق المستدير للماصة المحضرة مسبقا تحت الكبسولة العرضية على سطح الكلى. بمجرد إدخاله ، افتح جيبا صغيرا برفق للطعوم مع عناية فائقة حتى لا تتلف الكلى. يتم تحضير ترقيع أنسجة الحمة من أنسجة البروستاتا الطازجة التي تم الحصول عليها أثناء الاستئصال الجراحي.
ارفع الحافة المقطوعة لكبسولة الكلى وأدخل الطعم في الجيب. باستخدام طرف الماصة ، يمكن وضع العديد من الطعوم تحت كبسولة الكلى وتباعدها بالتساوي على سطح الكلى. عند اكتمال التطعيم ، ارفع جوانب شق جدار العضلات برفق لاستبدال الكلية مرة أخرى في تجويف الجسم.
تأكد من أن الكسب غير المشروع لا ينزلق من تحت الكبسولة. يتم استخدام خياطة واحدة لإغلاق جدار العضلات قبل الشروع في زرع الحبيبات تحت الجلد. عند اكتمال التطعيم ، افصل الأدمة الأساسية عن جدار الجسم في اتجاه الجمجمة.
ارفع الجانب الجمجمي من شق الجلد برفق لإنشاء جيب أثناء إمساك الحبيبات الهرمونية برفق باستخدام ملقط مسنن مستقيم ، أدخل الحبيبات عند قفص الرقبة. باستخدام ملقط مسنن ، قم بمحاذاة حواف الجلد وقم بتطبيق مشابك إلى ثلاثة مشابك جراحية لإغلاق الشق. في هذا المثال ، تم استكمال ترقيم الأنسجة الأولية من المرضى الذين يعانون من تضخم البروستاتا الحميد بهرمون التستوستيرون الخارجي.
لمدة شهر واحد ، تشير رؤوس الأسهم إلى مواقع الطعم الغريب. يمكن أيضا استخدام تطعيم الكبسولة الكلوية لتقييم التسرطن الهرموني. هنا ، تشكل المؤتلفات الخلوية التي تحتوي على ظهارة البروستاتا الحميدة والخلايا البولية التناسلية القرضية نموا حميدا في الفئران غير المعالجة.
في هذا المثال ، يزرع نفس الكسب غير المشروع في مضيف تلقى كريات هرمون التستوستيرون تحت الجلد واستراديول لمدة أربعة أشهر واختار سرطان البروستاتا الذي يغزو الكبسولة الكلوية. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تصنيع وزرع كريات الهرمونات المضغوطة ، وكذلك كيفية إنشاء ماصة زجاجية مصقولة بالنار للجراحة وإجراء كبسولة كبسولة كلى xenograft. عند محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر التعامل برفق مع الكبسولة الكلوية ، والحفاظ على الرطوبة ، وتجنب إتلاف الحمة الكلوية بعد هذا الإجراء.
يمكن إجراء طرق أخرى مثل علم الأنسجة والكيمياء المناعية والتقنيات الجزيئية للكشف عن R-N-A-D-N-A أو البروتينات ذات الأهمية. سيسمح ذلك بتقييم أفضل لطبيعة النمو الحميد أو الخبيث الذي لوحظ. لا تنس أن الهرمونات المستخدمة في هذه التجارب من المحتمل أن تكون مسخة ومسرطنة.
يجب دائما إجراء الشركة المصنعة لحبيبات الهرمونات المضغوطة في غطاء أمان كيميائي. يجب دائما ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة لكل خطوة من خطوات الإجراء الموضحة في هذا الفيديو.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
05:07
Related Videos
5.6K Views
04:12
Related Videos
3.1K Views
08:44
Related Videos
14.3K Views
06:54
Related Videos
11.7K Views
06:48
Related Videos
35.8K Views
08:15
Related Videos
16.4K Views
08:03
Related Videos
14.5K Views
07:01
Related Videos
14.9K Views
07:25
Related Videos
13.7K Views
07:50
Related Videos
8.8K Views