الظنبوب عانى من قطع العصب - نموذج موحد لإزالة التعصيب الناجم عن ضمور العضلات الهيكلية في الفئران

الهدف العام من هذا الفيديو هو إظهار نموذج قطع العصب الظنبوبي لضمور عضلات الهيكل العظمي في الفئران. يتم تحقيق ذلك عن طريق عزل العصب الوركي وفروعه الثلاثة ، أعصاب الظنبوبك ، والسيل ، والأعصاب الشظوية. بمجرد عزله ، يتم تمرير العصب الظنبوبي.

بعد إزالة التعصيب ، يتم إغلاق الجرح ومراقبة حالة عن كثب. في النهاية ، يتم الحصول على عينات تظهر انخفاضا تدريجيا في كتلة العضلات بعد إزالة التعصيب. نموذج قطع العصب الظنبوبي لضمور العضلات الهيكلية الناجم عن إزالة التعصيب هو شائع الاستخدام في نموذج تم التحقق من صحته جيدا في الفئران ، وهذا له مراضة أقل بكثير من تلك المرتبطة بقطع العصب الوركي.

لقد قمنا بتكييف هذا النموذج للاستخدام في الفئران ، والذي سنعرضه هنا. يسمح ذلك للمحقق بالاستفادة من وجود الفئران المعدلة وراثيا ودراسة عملية ضمور العضلات في غياب البروتينات التي تعتبر ضرورية لتنظيم كتلة العضلات الهيكلية مع إحداث الحد الأدنى من المراضة في. أولا ، قم بتسجيل وزن الفأر بعد التأكد من التخدير الكافي عن طريق قرصة إصبع القدم ، وتحديد الشق الوركي عن طريق الجس وحلق الفخذ الجانبي والأرداف من هناك إلى الركبة.

بعد ذلك ، قم بتنظيف المنطقة بالتطبيقات المتكررة للكحول واليود. ضع الماوس على جانبه تحت مجهر تشغيلي أو تشريح أثناء ارتداء قفازات معقمة. التعرف على الشق الوركي عن طريق الجس.

شق جلد الفخذ الجانبي من الشق الوركي إلى الركبة. انشر الجلد بلطف. التعرف على العضلة ذات الرأسين الفخذية ، وهي العضلة السطحية المسطحة للفخذ الجانبي أسفل الجلد مباشرة باستخدام مقص ناعم.

قم بتقسيم العضلة ذات الرأسين الفخذية على طول ألياف العضلات وأدخل ضام زنبركي. لفضح العصب الوركي وفروعه ، حدد العصب الوركي أسفل العضلة ذات الرأسين الفخذية مباشرة. يمكن التعرف عليه من خلال لونه الأبيض اللامع المميز ويبلغ قطره حوالي 0.8 ملم.

يمتد من الشق الوركي إلى الركبة ، ويتفرع إلى الأعصاب الشظوية الظنبوبية والأعصاب على مستوى الحفرة المأبضية. افصل الظنبوب برفق عن الفروع العصبية الشظوية والعصبية باستخدام ملقط فائق الدقة ومقص تشريح دقيق زنبركي. العصب الظنبوبي هو أكبر فرع وعادة ما يكون مركزيا.

يعد التعامل اللطيف مع العصب الوركي وفروعه أمرا ضروريا لنجاح هذا الإجراء. احرص على عدم تلف أو تمدد فروع العجان والعجان. في حالة تلف هذه الفروع أو تمددها ، سيؤدي ذلك إلى تكثيف أهدافها أيضا.

إن تثبيت العصب على الطبقة العرضية الخارجية فقط باستخدام ملقط فائق الدقة والحفاظ على ركود العصب سيتجنب سحق الأعصاب وإصابة الجر لإزالة التعصيب المؤقتة مع الإعادة الكاملة المتوقعة في غضون أسبوعين إلى أربعة أسابيع ، قم بسحق العصب الظنبوبي باستخدام ملقط فائق الدقة لمدة 15 ثانية لإزالة التعصيب الكامل والدائم. قطع العصب الظنبوبي باستخدام مقص تشريح الميكروس بأكبر قدر ممكن من البعد. تجنب الأوعية المأبضية بعناية إذا كانت هناك حاجة إلى إزالة التعصيب الكاملة.

خياطة نهاية العصب الظنبوبي عبر إلى السطح الأمامي للعضلة ذات الرأسين الفخذ مع 10 T النايلون وإعادة تقريب العضلة ذات الرأسين الفخذ مع خمسة T Vicryl لمنع إعادة الشاذ من عضلات المعدة والوحي. بمجرد اكتمال إزالة التعصيب ، أغلق الجلد بخيطة فيكريل بخمسة أشخاص. عندما تصبح جاهزا ، قم بإيقاف تشغيل المخدر المستنشق ، ولكن حافظ على تدفق الأكسجين.

بعد إعطاء مسكن منفرد، ضع الفأر في قفص نظيف دافئ بدون فراش. احتفظ بالماوس تحت المراقبة المباشرة حتى يتجول. عندما يتعافى تماما ، انقل الماوس إلى قفص سفلي نظيف وصلب مع فراش ناعم وافر.

فحص الطرف المنطوي والقدم يوميا بحثا عن تطور تقرحات الكعب المستلقية أو يمكن إدارة دليل على مشاكل بسيطة في المضغ باستخدام المضادات الحيوية الموضعية أو المطهرات ، مثل المادين. مؤشرات نقطة النهاية التي تتطلب القتل الرحيم للحيوان هي فقدان الوزن ، والدليل على ضعف الرعاية الذاتية والموقف المنحني. بالإضافة إلى ذلك ، يجب أيضا التضحية بالحيوانات المصابة باضطراب الجروح أو القرحة التي لا تلتئم مع أسبوع إلى أسبوعين من العناية بالجروح.

بالإضافة إلى ذلك ، أي تعاني من ألم لا داعي له في المرحلة الزمنية بعد الجراحة ، يتم جمع الأنسجة المرغوبة لتحليلها. بعد القتل الرحيم ، قم بحلق الجانب الإنسي لكل من أرجل التحكم الجراحية والمقابلة وتنظيفها بالكحول تحت مجهر تشريح ، وشق جلد ربلة الساق الإنسي بمشرط من الكاحل إلى الركبة ومحيطيا حول الكاحل على الطرف الجراحي. بعد ذلك ، اسحب الجلد برفق من العضلات وبالقرب من الفخذ.

لكشف جميع عضلات الساق ، حدد العضلة الهضمية ، وهي عضلة الساق التي تمتد من الركبة إلى الكاحل على الجانب الخلفي من الساق. بعد ذلك ، حدد موقع الإدخال البعيد للعضلة ذات الرأسين الفخذية القريبة من العضلة المعدية على الجانب الإنسي من الركبة. عند إدخالها البعيد ، تبدو العضلة ذات الرأسين الفخذية رقيقة وغشائية وتغطى الجزء الأكثر قربا من الجهاز الهضمي باستخدام المقص والتشريح النهائي الحاد.

افصل برفق الإدخال البعيد للعضلة ذات الرأسين الفخذية عن عضلة المعدة. أضف إدخاله البعيد في العقبي ، تتناقص عضلة المعدة إلى وتر العرقوب. تحديد وتر العرقوب الذي يظهر أبيض وجيبي.

امسك وتر العرقوب بالملقط. الحرص على عدم الإمساك أو سحق عضلة المعدة وتقسيم وتر العرقوب عن إدخال العقبي. باستخدام المقص الذي لا يزال يمسك الوتر ، ارفع العضلة المعدية الحمراء الباهتة برفق من النعل الأحمر العميق من الإدخال البعيد باتجاه أصله عند الركبة ، باستخدام جر لطيف للغاية.

لتسهيل العملية ، قم بتشريح المعدة من الساق عن طريق تقسيم أصل المعدة عن لقمة عظم الفخذ الإنسي والجانبي. باستخدام المقص. احرص على عدم سحق العضلات.

سيكون النعل مرئيا الآن بوضوح على الفور تحت مرأى من المعدة. ارفع السوس من إدخاله على وتر العرقوب إلى أصله على ربلة الساق الخلفية. بمجرد إزالتها ، قم بوزن العضلات بشكل منفصل على مقياس دقيق.

بعد ذلك ، قم بتقسيم العضلات عموديا نصفها للتجميد المفاجئ والنيتروجين السائل والنصف الآخر للأنسجة. أخيرا ، كرر هذه الإجراءات على الجانب غير المصنف للتحكم في عضلات الجهاز الهضمي والنعل. تم حصاد عضلات الجهاز الهضمي من الأطراف الخلفية منزوعة التعصيب والتحكم المقابل في أسبوع أو أسبوعين أو أربعة أسابيع وتم التعبير عنها كنسبة.

إزالة التعصيب في فقدان تدريجي لكتلة العضلات بمرور الوقت. تم قياس مساحة المقطع العرضي للألياف العضلية بعد تلطيخ المناعة كما هو موضح هنا. نشل سريع من النوع الثاني من الألياف بنية اللون ونشل بطيء من النوع الأول ألياف ، وصمة عار بيضاء من النوع الثاني بسرعة.

أظهرت ألياف Twitch انخفاضا تدريجيا في مساحة المقطع العرضي في العضلات منزوعة العصب. أكثر من أربعة أسابيع بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن تكون قادرا على إجراء قطع عصب الظنوب في الفئران. يوفر هذا نموذجا قابلا للتكرار وقويا ومعتمدا جيدا لضمور عضلات الهيكل العظمي الناجم عن إزالة التعصيب.