Name: Gavaging اسماك الزرد الكبار (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-08-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 9 s
Description: تعلم تقنية التجريع الفموي لأسماك الزرد الكبيرة لدراسة انتقال المسببات المرضية عبر الطريق الفموي البرازي. تتيح هذه الطريقة تسليم محاليل دقيقة بأمان وفعالية لدعم البحوث المختبرية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

قدمت جامعة المقارن مركز روكفلر العلوم البيولوجية الدعم لهذا المشروع. نشكر Monnas جانيل للحصول على المساعدة الفنية.

1. إعداد الحل مخدر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يعد حل من 150 ملغ / لتر من MS-222 في المياه النظام إما من محلول المخزون أو من شكل مسحوق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التحقق من الرقم الهيدروجيني باستخدام مقياس درجة الحموضة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العازلة مع بيكربونات الصوديوم في حاجة، وحتى درجة الحموضة ما بين 7-7.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد خزان المياه نظام حر من MS-222 للأسماك لاسترداد فيها والانتعاش مرة هو عادة أقل من 1 دقيقة. </li></ol> 2. إعداد جهاز بالتزقيم <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خفض واضح 22-G أنابيب غرس إلى ما يزيد قليلا على طول تقريبي من الفم إلى الأمعاء لمبة من الأسماك. في البداية، نقترح التخدير السمك واحد لكل مجموعة جديدة تستخدم للحصول على أفضل تقديرا للمدة اللازمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دفع واضحة المعالم أنابيب زرع على بوصة ½ 22-G الإبرة حتى أنها آمنة وليس هناك خطر من فصل. إذا كان ½ 22-C إبرة غير متوفرة، وقطع إبرة أطول لالتطبيقroximately أن طول. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما كاملة، وينبغي أن الأنبوب زرع القسطرة تمتد حوالي 1 سم من رأس الإبرة، أو أقصر إذا كانت الأسماك هي أصغر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعلق المحور إبرة 22-G إلى 1-CC luerlok حقنة. </li></ol> 3. التحضير لبالتزقيم <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خفض أخدود إلى اسفنجة بشفرة المشرط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقع الاسفنجة في الماء نظام حر من MS-222. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع قطعة إسفنج مبللة على سطح مستو. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع ال 5 ميكرولتر حل مناسب لأنبوب تغذية في أنابيب القسطرة 22-G وحقنة 1-CC. </li></ol> 4. التخدير وبالتزقيم <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سريع السمك لا يقل عن 24 ساعة قبل الإجراء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع السمك في حل MS-222 حتى أنه يفقد المنعكس المقوم لها، ولا يستجيب لقرصة زعنفة الذيل، ولكن يحافظ على حركة صادي. وهذا يستغرق عادة حوالي 2-3 دقائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الأسماك من حل مخدر ووضعه فيالأخدود في الاسفنجة مع رئيس جاحظ قليلا من الاسفنج، ولكن الخياشيم تغطيها الاسفنجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحرك الاسفنجة في وضع رأسي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح فم الزرد باستخدام أنابيب القسطرة 22-G. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج بلطف الأنبوب حتى غيض الماضي الخياشيم (حوالي 1 سم أو طول الأنبوب). يجب أن لا تحتاج إلى غرس أنابيب يضطر. يوحي مقاومة الأنبوب قد يكون ضرب قوس الخيشومية أو القلب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا هناك مقاومة، سحب بلطف، وإعادة المحاولة مرة أخرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن المواد ببطء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بينما بالحقن، وتأكد من أن الحل لا خروج عن طريق الخياشيم أو الفم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الأسماك من الاسفنج ومكان في خزان الانتعاش. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انتعاش يحدث عادة في أقل من 1 دقيقة ويتبين من الأسماك السباحة تستقيم والحفاظ على التوازن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد الأسماك لقلس كما هو مبين من خلال وضع تصور الأسماك طرد بنشاط مaterial من فمه، أو أي حركة صادي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يمكن إرجاع السمك إلى دبابتهم العادية بعد أن يكونوا قد تعافى. </li></ol>

<ol><li>Royes, J. -A. B., Chapman, F. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRoyes%2C+J-AB+%22Preparing+Your+Own+Fish+Feeds%22">Preparing Your Own Fish Feeds</a>. , Department of Fisheries and Aquatic Sciences, Florida Cooperative Extension Service, Insitute of Food and Agricultural Sciences, University of Florida. (2009).</li>
<li>Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+of+the+bioencapsulation+of+enrofloxacin+and+oxytetracycline+in+Artemia+fransciscana+Kellogg%5BTitle%5D)+AND+%22Aquaculture%22%5BJournal%5D)">Standardization of the bioencapsulation of enrofloxacin and oxytetracycline in Artemia fransciscana Kellogg.</a> Aquaculture. 196, 1-12 (1906).</li>
<li>Langdon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microparticle+types+for+delivering+nutrients+to+marine+fish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Aquaculture%22%5BJournal%5D)">Microparticle types for delivering nutrients to marine fish larvae.</a> Aquaculture. 227, 259-275 (2003).</li>
<li>Langdon, C., Nordgreen, A., Hawkyard, M., Hamre, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+wax+spray+beads+for+delivery+of+low-molecular+weight%2C+water+soluble+nutrients+and+antibiotics+to+Artemia%5BTitle%5D)+AND+%22Aquaculture%22%5BJournal%5D)">Evaluation of wax spray beads for delivery of low-molecular weight, water soluble nutrients and antibiotics to Artemia.</a> Aquaculture. 284, 151-158 (2008).</li>
<li>Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Protocol+for+the+Oral+Administration+of+Test+Chemicals+to+Adult+Zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Zebrafish%22%5BJournal%5D)">A Novel Protocol for the Oral Administration of Test Chemicals to Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 8, 203-210 (2011).</li>
<li>Goldsmith, J. R., Jobin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Think+Small%3A+Zebrafish+as+a+Model+System+of+Human+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedicine+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Think Small: Zebrafish as a Model System of Human pathology.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. , (2012).</li>
<li>Tysnes, K. R., Jorgensen, A., Poppe, T., Midtlyng, P. J., Robertson, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preliminary+expermients+on+use+of+zebrafish+as+a+laboratory+model+for+Giardia+duodenalis+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Parasitologica%22%5BJournal%5D)">Preliminary expermients on use of zebrafish as a laboratory model for Giardia duodenalis infection.</a> Acta Parasitologica. 57, 1-6 (2012).</li>
<li>Marie, B., Huet, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+a+toxic+cyanobacterial+bloom+%28Planktothris+agardhii%29+on+fish%3A+Insights+from+histopathological+and+quantitative+proteomic+assessments+following+the+oral+exposure+of+medaka+fish+%28Oryzias+latipes%29%5BTitle%5D)+AND+%22Aquatic+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Effects of a toxic cyanobacterial bloom (Planktothris agardhii) on fish: Insights from histopathological and quantitative proteomic assessments following the oral exposure of medaka fish (Oryzias latipes).</a> Aquatic Toxicology. 114-115, 39-48 (2012).</li>
<li>Canadian Council on Animal Care. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22CCAC+guidelines+on%3A+the+care+and+use+of+fish+in+research%2C+teaching+and+testing%22">CCAC guidelines on: the care and use of fish in research, teaching and testing</a>. , CCAC. Ottawa, Ontario, Canada. (2005).</li>
<li>Harper, C., Lawrence, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHarper%2C+C+%22The+Laboratory+Zebrafish%22">The Laboratory Zebrafish</a>. , CRC Press. Boca Raton, Florida, USA. (2011).</li>
<li>De Tolla, L. J., Srinivas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+the+Care+and+Use+of+Fish+in+Research%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Guidelines for the Care and Use of Fish in Research.</a> ILAR Journal. 37 (4), (1995).</li>
<li>Topic Popovic, N., Strunjak-Perovic, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tricaine+methane-sulfonate+%28MS-222%29+application+in+fish+anaesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Ichthyology%22%5BJournal%5D)">Tricaine methane-sulfonate (MS-222) application in fish anaesthesia.</a> Journal of Applied Ichthyology. 28, 553-564 (2012).</li>
<li>Field, H. A., Kelley, K. A., Martell, L., Goldstein, A. M., Serluca, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+gastrointestinal+physiology+using+a+novel+intestinal+transit+assay+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterology+%26+Motility%22%5BJournal%5D)">Analysis of gastrointestinal physiology using a novel intestinal transit assay in zebrafish.</a> Neurogastroenterology & Motility. 21, 304-312 (2009).</li>
</ol>

يعلن الكتاب أنه ليس لديهم مصالح مالية المتنافسة.

أهمية هذه التقنية هو تحسين ويوفر مزايا عديدة أكثر من الأساليب المذكورة سابقا لgavaging الزرد الكبار. أولا، استخدام اسفنجة لكبح الأسماك يسمح شخص واحد لتنفيذ الإجراء، بدلا من تقنية هو موضح سابقا تتطلب شخصين. 7 الثانية، القسطرة أنابيب الزرع هو أكثر مرونة من القسطرة الرابع، والتي يمكن أن تساعد في تقليل الصدمات الثانوية بسبب لانثقاب بالمثل لاستخدام الحقن غير حادة ذات الرؤوس. 7،8 الثالث، باستخدام أنا...

الأساليب الحالية لإدارة المركبات عن طريق الفم لالزرد تشمل المركبات بالإدارة أعلى المغلفة على الأعلاف، ومختلطة في الوجبات الغذائية الجيلاتين 1، bioencapsulated في محلول ملحي الروبيان 2، ويخلط مع دهن حمية مغلفة 3، 4 حبات رذاذ الشمع وعبر النظم الغذائية القائمة على الغلوتين. 5 من القيود وتشمل هذه الأساليب من تناوله عن طريق الفم معدلات الرشح عالية وغير مكتملة أو لا يمكن التنبؤ بها استهلاك مركب من قبل الأسماك الفردية. هذه المتغيرات هي إشكالية لأنه في دراسات الأمراض المعدية، ومعرفة الجرعة المعدية تدار على الأسماك قد تكون حاسمة لنجاح الدراسة. أيضا، وقد أظهرت الأعمال السابقة أن بعض المركبات تدار في حمامات المياه تسبب آفة سامة للاسماك الزرد الخياشيم قبل الآثار المعوية التي قد تكون قيد الدراسة تحدث 6. التغذية الأنبوبية هو أسلوب القياسية المستخدمة في أنواع الحيوانات المختبرية الأخرى لإدارة كميات الدقيق للمنتج مع حزب العدالة والتنميةتركيز nown للدراسة في البحوث الطبية الحيوية والمستحضرات الصيدلانية. في الآونة الأخيرة فقط طرق gavaging الزرد وصفت في الأدب. أسلوب واحد هو موضح هو أسلوب من شخصين باستخدام غمد القسطرة 24 G تعلق على ماصة ميكرولتر 2-20 لتقديم 5 ميكرولتر من الحل. 7 وصف الأسلوب كان معدل الوفيات من 8.7٪ و 39٪ على الأولى والثانية ويعزى معظم الوفيات للإناث حامل؛ المحاكمة، على التوالي. وصف تقنية التغذية الأنبوبية الثانية تستخدم المحاقن أنبوب تغذية حادة ذات الرؤوس لإدارة 5 ميكرولتر من الحل لmedakas (latipes Oryzias). لم يتم توفير 8 معلومات عن وفيات وهذه العملية الدقيقة للأداء بالتزقيم لم يكن وصفها. ويمكن وفقا للالمجلس الكندي للرعاية الحيوان واسماك الزرد مختبر، وتصل إلى 1٪ من وزن جسم السمكة أن تدار من خلال أنبوب تغذية. 9،10 هدفنا هو تطوير طريقة للتكرار، آمنة وفعالة لإيصال كميات دقيقة من COMجنيه شفويا إلى الزرد الكبار من كلا الجنسين وفي جميع مراحل الاستنساخ. سيكون هذا الإجراء تكون قابلة للتطبيق لأية دراسة التي تتطلب جرعات عن طريق الفم دقيقة من مركب.

<tbody><table><tr><td colspan = "4" ><قوي>المعدات< / قوي></td></tr> <tr><td>إسفنج</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1 سم مكعب قفل لوير حقنة</td><td>بيكتون ديكنسون Co</td><td></td><td></td></tr><tr><td>22-G أنابيب زرع الريناثان الدقيقة (قطع)</td> <td>Braintree Scientific، Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1 إبرة 22-G (قطع ، إذا لزم الأمر)</td> <td>Becton Dickinson Co</td><td></td><td></td></tr><tr><td>مقياس الأس الهيدروجيني</td><td>مسبار</td><td></td><td></td>Hanna</tr><tr><td>1 شفرة</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr> مشرط < td colspan = "4" > [header]</td></tr><tr> < td colspan = "4" > كاشف / مادة </td></tr><tr><td>MS-222 (Finquel)</td> <td>مختبرات</td><td></td><td></td> Argent</tr></tbody></table>

gavaging اسماك الزرد الكبار

Gavaging Adult Zebrafish

أصبح الزرد هاما في نموذج الجسم الحي في البحوث الطبية الحيوية. يجب تطوير أساليب فعالة واستخدامها لتسليم المركبات أو وكلاء في حلول للأبحاث العلمية. الأساليب الحالية لإدارة المركبات عن طريق الفم لالزرد الكبار غير دقيقة بسبب التباين في استهلاك التبرعات التي يديرها الأسماك. وقد وضعت إجراء التغذية الأنبوبية لتسليم كميات الدقيق للعوامل المعدية إلى الزرد للدراسة في البحوث الطبية الحيوية. كانت الزرد الكبار أكثر من 6 أشهر من العمر تخدير مع 150 ملغ / لتر من مخزنة MS-222 وgavaged مع 5 ميكرولتر من الحل باستخدام القسطرة أنابيب مرنة غرس تعلق على خفض 22-G طرف الإبرة. تم تخفيض أنابيب مرنة في تجويف الفم من الزرد حتى غيض من أنابيب تمديد الماضية الخياشيم (1 سم تقريبا). ثم تم حقن المحلول ببطء في الأمعاء. وكانت هذه طريقة فعالة 88٪ من الوقت، مع الأسماك تتعافى بشكل هادئ. هذاالإجراء هو أيضا فعالة مثل شخص واحد يمكن تسمين الأسماك 20-30 في ساعة واحدة. هذه الطريقة يمكن استخدامها لإدارة بدقة وكلاء لدراسات الأمراض المعدية، أو دراسات من المركبات الأخرى في الزرد الكبار.

تم gavaged كلا الجنسين من الأسماك، بما في ذلك الإناث حامل بنجاح (الشكل 1). إجراء ناجحة يستغرق أقل من دقيقة واحدة مع عدم وجود السائل ينظر تخرج من الخياشيم أو الفم. الأنبوب يدخل بسهولة، دون استخدام القوة، مع عدم وجود الدم ينظر على إزالة القسطرة. هذا الإجراء هو السريع، والتي تتطلب حوالي 10 دقيقة للتسمين 3-4 الأسماك، بمتوسط ​​30-45 ثانية لكل الأسماك. الزرد لا ينبغي أن gavaged مع أكثر من 5 ميكرولتر من...

تزايد استخدام الزرد كنموذج للحيوانات يتطلب تطوير أساليب فعالة لإيصال كميات من المركبات المعروفة والحلول. الإجراء التغذية الأنبوبية هو موضح أدناه يسمح للتسليم عن طريق الفم كميات دقيقة من حل موثوق، بأمان وكفاءة إلى الزرد الكبار.

Gavaging اسماك الزرد الكبار

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

الهدف العام من هذا الفيديو هو توضيح تقنية لسبر أسماك الزيبرا البالغة. لقد طورنا هذه التقنية من أجل دراسة الكائنات الممرضة التي تنتقل عبر المسار الفموي الشرجي. ويمكن استخدامها لإعطاء كمية دقيقة من المحلول.لدراسة أسماك الزيبرا البالغة. تتكون العملية بأكملها من أربع خطوات. الخطوة الأولى هي تحضير جهاز التغذية القسرية.تتمثل الخطوة الثانية في تخدير الأسماك باستخدام 150 milligrams per liter من MS 2 22 المنظم. والخطوة الثالثة هي إعطاء الأسماك المحلول عبر التغذية القسرية (gavage). أما الخطوة الأخيرة فهي استشفاء الأسماك ومراقبتها لرصد أي آثار عكسية.لتحضير جهاز التغذية القسرية، قم بقص أنبوب الزرع عيار 22 إلى الطول المناسب للسمكة، ثم ثبته بالإبرة عيار 22 وأحكم تثبيته في سرنجة لوك لور (lure lock) سعة 1 مل. وعندما يصبح المحلول جاهزاً، يمكن سحبه إلى داخل الجهاز. ولإعطائه لسمكة الزيبرا، يجب عمل شق في الإسفنجة باستخدام شفرة مشرط أو مقص، بحيث يتم تثبيت السمكة بإحكام عند وضعها داخل الإسفنجة.يجب نقع الإسفنجة مسبقاً في مياه النظام للحفاظ على رطوبتها. كما يجب تحضير خزان استرداد يحتوي على مياه نظام خالية من المخدر لوضع الأسماك فيه بمجرد اكتمال الإجراء. تُصام الأسماك لمدة 24 ساعة على الأقل قبل البدء في الإجراء.باستخدام شبكة، انقل الأسماك إلى خزان التخدير MS 2 22. وبمجرد تخدير السمكة، وهو ما يستدل عليه بعدم الاستجابة عند قرص الزعنفة الذيلية، أخرج السمكة من محلول التخدير وضعها في الإسفنجة بحيث يبرز الرأس قليلاً من الإسفنجة مع تغطية الخياشيم. انقل الإسفنجة إلى وضع عمودي، وباستخدام أنبوب الزرع مقاس 22 gauge، افتح فم سمكة الزيبرا.أدخل الأنبوب برفق حتى يتجاوز الطرف مستوى القلب. يختلف الطول حسب حجم السمكة، وفي حالة وجود مقاومة، اسحب الأنبوب برفق، ثم أعد ضبط موضعه وحاول مرة أخرى. لا ينبغي أن يكون هناك حاجة لإقحام الأنبوب بالقوة داخل القناة المعوية لسمكة الزيبرا.بمجرد الوصول إلى الموقع الصحيح، احقن المحلول ثم قم بإزالة الأنبوب. ضع السمكة في خزان التعافي عن طريق تحريرها من الإسفنجة. إذا تم الإجراء بشكل صحيح، ينبغي أن ينزلق الأنبوب بسهولة داخل القناة المعوية لسمكة الزيبرا.لن يُلاحظ خروج أي محلول من الخياشيم أو الفم. كما لن يُرى أي دم على طرف الأنبوب أو خارجاً من خياشيم السمكة. المشكلة الأكثر شيوعاً هي خروج السائل عبر الفم أو الخياشيم، وهذا يشير إلى أن الأنبوب لم يتم إدخاله بعمق كافٍ داخل السمكة.تبلغ نسبة النجاح الإجمالية لهذا الإجراء 88%. عند تنفيذه بشكل صحيح، يجب ألا يتم إعطاء أكثر من 5 µL من السائل لأن ذلك يقلل بشكل كبير من معدل نجاح الإجراء. عندما حاولنا إعطاء 10 µL من المحلول، انخفض معدل النجاح الإجمالي إلى 50%. في هذا الفيديو، شرحنا كيفية إجراء التغذية الأنبوبية (gavage) لأسماك الزيبرا البالغة. يمكن استخدام هذا الإجراء لإيصال كميات محددة ومعروفة من المحاليل إلى أسماك الزيبرا بدقة.تتمثل مزايا هذه التقنية مقارنةً بالتقنيات الموصوفة سابقاً في استخدامها لمواد أكثر مرونة، مما يسمح بإجراء عملية التغذية القسرية (gavage) للإناث الحوامل بشكل أكثر فعالية. شكراً لكم على المشاهدة، وبالتوفيق في أعمالكم.

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

نقدم طريقة مبتكرة للتغذية القسرية الدقيقة (microgavage) ليرقات سمك الزيبرا باستخدام معدات الحقن المجهري للأجنة والمجاهر الستيريوسكوبية القياسية. ونبين أن التغذية القسرية الدقيقة هي تقنية آمنة وفعالة ومفيدة لإيصال كميات محددة من مواد متنوعة بشكل خاص إلى التجويف المعوي ليرقات سمك الزيبرا.

Microgavage من يرقات اسماك الزرد

الجنين الزرد هو نموذج ممتاز للبحوث البيولوجيا التطورية. خلال مرحلة التطور الجنيني، الزرد تطوير مع كتلة البيض، الذي يعرض التحديات ثلاثي الأبعاد للمراقبة العينة والتحليل. يصف هذا البروتوكول كيفية إنشاء ثنائي الأبعاد جبل الاستعدادات شقة من جبل بأكمله في الموقع (WISH) ملطخة العينات الجنين الزرد.

إعداد جبل مسطح لمراقبة وتحليل الأجنة الزرد عينات الملون بواسطة جبل الجامعة<em&gt; في الوضع الطبيعي</em&gt; التهجين

يتوسع استخدام أسماك الزرد لأبحاث القلب والأوعية الدموية نحو البحث عن قلوب البالغين. بالنسبة لهذه التطبيقات ، يعد العزل السريع والبسيط لأنسجة القلب أمرا أساسيا لتجنب تغييرات ما بعد الوفاة والحصول على عدد كاف من العينات. هنا ، نصف طريقة سريعة وقابلة للتكرار لتشريح قلوب أسماك الزرد البالغة.

التعافي من اسماك الزرد الكبار قلوب للتطبيقات عالية الإنتاجية

هنا، نقدم بروتوكول لعزل الأنسجة الغدد التناسلية من الزرد اليرقات، التي من شأنها تسهيل التحقيقات في التفرقة بين جنس الزرد والصيانة.

تشريح اليرقات الزرد الغدد التناسلية الأنسجة

والهدف من هذا البروتوكول قياس وقت العبور المسماة فلوريسسينتلي الغذائي من خلال القناة الهضمية الزرد اليرقات في طريقة إنتاجية عالية.

قياس وقت عبور الأمعاء استخدام اليرقات الزرد الفائق

يحرك تجديد العضلات الهيكلية الخلايا الجذعية العضلية المقيمة في الأنسجة، والتي تضعف في العديد من أمراض العضلات مثل ضمور العضلات، وهذا يؤدي إلى عدم قدرة العضلات على التجدد. هنا، ونحن نصف بروتوكول يسمح بفحص تجديد العضلات في نماذج حمار وحشي من أمراض العضلات.

فحص تجديد العضلات في نماذج حمار وحشي من أمراض العضلات

يصف هذا البروتوكول إجراء إزالة الفص البطني للكبد في سمك الحمار الوحشي البالغ لتمكين دراسة تجديد الكبد.

استئصال الهيباتيك الجزئي في سمك الحمار الوحشي البالغ

يحدد هذا البروتوكول الخطوات الأساسية للحصول على أجنة الأسماك الخالية من الجراثيم (GF) والحفاظ عليها من اليرقات حتى مرحلة الأحداث ، بما في ذلك أخذ العينات والكشف عن حالتها العقيمة. يعد استخدام نماذج GF المصابة بالعدوى أمرا مهما لفهم دور الميكروبات في صحة المضيف.

توليد وصيانة وتحديد نماذج الزرد الخالية من الجراثيم من اليرقات إلى مراحل الأحداث

زرع نخاع الكلى في الجامعة اسماك الزرد الكبار

هنا نبين كيفية القيام الرجعية المدارية الحقن في الزرد الكبار.

الرجعية المدارية في حقن اسماك الزرد الكبار

تعلم تقنية التجريع الفموي لأسماك الزرد الكبيرة لدراسة انتقال المسببات المرضية عبر الطريق الفموي البرازي. تتيح هذه الطريقة تسليم محاليل دقيقة بأمان وفعالية لدعم البحوث المختبرية.

Gavaging اسماك الزرد الكبار

استكشف المزيد من الفيديوهات