إجراء لدراسة تأثير الغذاء المطول تقييد على الهيروين المفضل في الجرذان متقشف

ووصف الإجراء الذي يسمح مظاهرة من زيادة قوية من المخدرات تسعى في الفئران المقيدة الغذاء. التالية الهيروين التدريب الإدارة الذاتية، الفئران تذهب من خلال فترة الامتناع عن ممارسة الجنس، في بيئة خالية من المخدرات، أثناء التي هي أقل ما يقال الغذائية المقيدة. ثم يتم اختبار التماس المخدرات في البيئة المرتبطة بالمخدرات.

الهدف العام من هذا الإجراء هو دراسة آثار التلاعب البيئي ، مثل تقييد الطعام المزمن على الانتكاس إلى البحث عن الهيروين في لفائف المختبر في ظل ظروف الانسحاب. يتم تحقيق ذلك عن طريق إدخال قسطرة وريدية جراحيا أولا في الوريد الوداجي للفأر للسماح بالإدارة الذاتية للهيروين بعد فترة التعافي. يتم تدريب الفئران على إعطاء الهيروين ذاتيا في غرف التكييف الفعالة لمدة 10 أيام.

الخطوة التالية من الإجراء هي مرحلة الامتناع عن ممارسة الجنس حيث يتم نقل الفئران إلى مرفق وتخضع لفترة من الوصول المقيد أو غير المقيد إلى الغذاء. أخيرا ، يتم إرجاع الفئران إلى غرف التكييف الفعالة للخضوع لاختبار البحث عن الهيروين حيث تؤدي الاستجابات على ذراع الهيروين الضعيف إلى تنشيط إشارة وضوء ونبرة في حالة عدم توصيل الهيروين. في النهاية ، الفئران المقيدة بالطعام المزمن مع تاريخ من الهيروين ، ستظهر الإدارة الذاتية زيادة قوية في البحث عن الهيروين في ظل ظروف الانسحاب ، الناتجة عن إعادة التعرض لبيئة تعاطي المخدرات والإشارات المرتبطة بالمخدرات.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية ، مثل إجراء الإعادة ، هي عدم وجود انقراض فعال صريح ، والذي لا يتم ملاحظته في حالة الإنسان. علاوة على ذلك ، فإن استخدام التلاعب المزمن مقابل التلاعب الحاد يسمح بصلاحية أكبر للبناء فيما يتعلق بالحالة البشرية. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال إدمان المخدرات ، مثل الآليات العصبية الشائعة الكامنة وراء سلوكيات البحث عن المخدرات والغذاء.

يتم تحضير القسطرة بكميات كبيرة وتعقيم الأوتوكلاف للاستخدام على مدى فترة طويلة من الزمن. لبناء قسطرة ، قم أولا بتقطيع الأنابيب المرنة إلى قطع بطول 12 سم. استخدم عود أسنان أو إبرة قياس 18 لوضع قطرة صغيرة من السيليكون حول القسطرة على بعد ثلاثة سنتيمترات من الحافة.

دع السيليكون يجف لمدة 24 ساعة قبل التعقيم ، قم بثني الأنبوب الطويل للقنية الخمسة ، والتي ستكون بمثابة موصل في الزاوية اليمنى للقاعدة البلاستيكية قبل التعقيم. لتجميع القسطرة في يوم الجراحة ، ادفع الجانب الطويل من الأنبوب المدرسي فوق الأنبوب المعدني المنحني للقنية الخمسة لأعلى في منتصف الطريق تقريبا إلى قاعدة التمثال البلاستيكية. قم بتوصيل الأنبوب الخمسة عبر أنبوب tigon وإبرة قياس 22 المخلوطة بحقنة سعة ملليلتر واحد مملوءة بمحلول ملحي معقم.

اغسل المحلول الملحي من خلال القسطرة لضمان التدفق دون عائق. للبدء تخدير قبل الحلاقة وتنظيف المنطقة الموجودة على الكتف الأيمن والرأس بالكحول وفرك الجراحة. بعد وضع الجل على العينين لمنع الجفاف ، يتم حقن البنسلين والمحلول الملحي للحماية من العدوى والجفاف.

استخدم التقنيات القياسية لفضح الوريد الوداجي الخارجي بمجرد عزله عن الأنسجة المحيطة. أدخل ملقطا منحنيا أسفل الوريد لإبقائه مرفوعا وممتدا قليلا. قم بعمل قطع صغير على شكل حرف V على الوريد واترك القطع مفتوحا.

باستخدام موسع الأوعية الدموية، ادفع الطرف القصير للقسطرة الذي يبلغ طوله ثلاثة سنتيمترات إلى الوريد باتجاه القلب حتى يصل قطرة السيليكون إلى نقطة الشق. اربط القسطرة بالوريد بثلاث خيوط ، واحدة تدليل قدر الإمكان. واحد فقط منقاري إلى قطرة السيليكون ، والثالث إلى أقصى حد ممكن.

مرر المحلول الملحي عبر القسطرة للتأكد من بقائها مسدودة وأن الغرز ليست ضيقة جدا. بعد ذلك ، ضع الجانب البطني للفئران لأسفل. شق الرأس وإدخال الإرقاق لفصل الجلد عن الأنسجة الأساسية وإنشاء جيب تحت الجلد.

قم بتوجيه الإرقاء تحت الجلد نحو فتحة الكتفين حيث تم إدخال القسطرة. اخترق النسيج الضام وقم بتثبيت القسطرة بإحكام عند النقطة المنقارية أسفل قاعدة الخمسة لأعلى. افصل الخمسة لأعلى وقم بربط الطرف الطويل من القسطرة تحت الجلد وخارج الشق الموجود في الجزء العلوي من الرأس.

استخدم المقص لقطع القسطرة أدناه حيث تم تثبيت hemostat وإعادة توصيل الطرف الطويل من الخمسة لأعلى. اسحب القسطرة على طول العمود المعدني للخمسة لأعلى وصولا إلى القاعدة البلاستيكية التي تمر بالمحلول الملحي لضمان التدفق الحر. بعد إغلاق الجروح بالخيوط ، ضع الجرذ في جهاز تجسيم.

بمجرد أن تصبح الجمجمة المكشوفة نظيفة وجافة ، استخدم مثقابا يدويا لحفر أربعة إلى خمسة ثقوب في السطح. بعد ذلك ، أدخل مسامير الماكينة في الفتحات لتكون بمثابة سقالات لغطاء الرأس. ضع الموصل الخمسة لأعلى بين البراغي ودس الطول الزائد للقسطرة في الجيب تحت الجلد الذي تم تصنيعه مسبقا.

أخيرا ، استخدم أسمنت الأسنان لتثبيت الخمسة حتى أعلى الجمجمة. قم بإزالة الجرذ من الجهاز التجسيمي بعد تجفيف الأسمنت بالكامل وراقبه حتى يتعافى تماما. يتم وضع الفئران بشكل فردي في غرف تكييف فعالة.

محاطة بمقصورات مخففة للصوت مزودة بمروحة. يتم تثبيت رافعتين قابلتين للسحب على ارتفاع تسعة سنتيمترات فوق أرضية الجدار الجانبي الأيمن مع ضوء جديلة فوق كل رافعة. يتم وضع وحدة نغمة فوق الرافعة النشطة ويتم وضع ضوء المنزل الأحمر في أعلى مركز الجدار الجانبي الأيسر.

الغذاء والماء متوفر في libitum. يتم توصيل مضخة الدواء بالقسطرة عبر أنبوب دوار سائل وأنبوب تيجون محمي بنابض معدني. ويبدأ التعافي الذاتي من الهيروين بعد التعافي من الجراحة وفترة التعود على مدار 24 ساعة.

للبدء ، اغسل القسطرة بمحلول الهيبارين جنتاميسين. بعد ذلك ، قم بتوصيل الموصل الخمسة لأعلى بأنبوب Tigon وقم بتوصيل الزنبرك المعدني. ابدأ كل جلسة في بداية المرحلة المظلمة بتمديد الرافعات النشطة وغير النشطة ، بالإضافة إلى إضاءة ضوء المنزل وتنشيط مركب نغمة Q الخفيفة.

لمدة 30 ثانية ، يسمح للفئران بإعطاء الهيروين ذاتيا لمدة 10 أيام خلال ثلاث جلسات مدتها ثلاث ساعات مفصولة بثلاث ساعات. تؤدي الاستجابات على الرافعة النشطة إلى تنشيط مضخة المخدرات وبدء فترة المهلة 22 التي يتم خلالها إطفاء ضوء المنزل ، ويتم تنشيط مركب نغمة الضوء Q فوق الرافعة النشطة. يتم تسجيل استجابات الرافعة غير النشطة ، ولكن ليس لها عواقب قابلة للبرمجة.

بعد التدريب على الإدارة الذاتية ، قم بإزالة الفئران من غرف التكييف الفعالة ووضعها بشكل فردي في منشأة مع وصول غير مقيد إلى الطعام والماء. في يوم واحد من غسل المخدرات في اليوم التالي ، قلل من كمية الطعام للمجموعة المحظورة على الطعام لبدء فترة الامتناع عن ممارسة الجنس مع الحفاظ على الوصول غير المقيد إلى الطعام في المجموعة المشبعة. إجراء اختبار البحث عن المخدرات في صباح يوم الامتناع عن ممارسة الجنس.

في اليوم 14 ، أعد الفئران إلى غرف التكييف الفعالة وقم بتثبيتها على الزنبرك المعدني. السماح بجلسة لمدة ساعة أو ثلاث ساعات يكون خلالها لاستجابات الرافعة النشطة وغير النشطة نفس العواقب كما هو الحال في التدريب على الإدارة الذاتية ، باستثناء توافر الدواء. توضح هذه النتائج أن أوزان الجسم تظل مستقرة في جميع أنحاء الهيروين.

التدريب على الإدارة الذاتية أثناء الامتناع عن ممارسة الجنس ، تزيد الفئران ذات الوصول غير المقيد إلى الطعام من وزن أجسامها بينما تقلل الفئران المقيدة بالطعام من وزن أجسامها بنسبة 10 إلى 15٪ تقريبا كما هو موضح هنا ، زادت الحقن واستجابات الرافعة النشطة خلال أيام التدريب ، في حين أن استجابات الرافعة غير النشطة لم تفعل ذلك. بعد فترة الامتناع عن ممارسة الجنس ، زادت الرافعة النشطة للفئران المقيدة بالطعام بشكل كبير مقارنة بالجرذان المشبعة. في حين أن استجابة الرافعة غير النشطة ضئيلة وقابلة للمقارنة بين المجموعات باتباع هذا الإجراء.

يمكن استخدام طرق أخرى مثل الحقن داخل الجمجمة وغسيل الكلى المجهري والنشاف الغربي والتقنيات الكيميائية المناعية لاستهداف أنظمة كيميائية عصبية ودوائية محددة. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم واضح لكيفية زرع قسطرة وريدية جراحيا في الوريد الوداجي للفأر ، وكذلك كيفية إجراء إجراء الإدارة الذاتية للهيروين في غرف التكييف القياسية.