3.5: ذبابة الفاكهة صيانة

يتوقف البحث الناجح ذبابة الفاكهة السوداء على الصيانة الصحيحة وتربية هذا الكائن الحي النموذجي القيم. سيناقش الفيديو التالي الخطوات اللازمة لتوفير التغذية السليمة والسكن والتعامل مع الذبابة.

على الرغم من أن ذبابة الفاكهة السوداء تعيش في الواقع على الكائنات الحية الدقيقة ، مثل الخميرة ، التي تنمو على تخمير الفاكهة. في المختبر ، يتم تعديل النظام الغذائي للذبابة لأغراض عملية. تتوفر العديد من الوصفات ، وتحتوي جميعها على المكونات الأساسية: السكر والخميرة. الوصفة التالية مأخوذة من جامعة إنديانا في بلومنجتون ، المشهورة بتنوعها الكبير في مخزون الذباب. يتكون من: ماء معقم ، خميرة ، دقيق الصويا ، دقيق الذرة الأصفر ، أجار للقوام ، شراب الذرة ، وحمض البروبيونيك لمنع نمو العفن والبكتيريا. يتم دمج هذه المكونات وتسخينها وتقليبها ثم توزيعها في قوارير بلاستيكية باستخدام مضخة. بعد ملئها ، يتم توصيل القوارير بسطح قطني ولفها وتبريدها عند 4 درجات مئوية. بمجرد تصميدها ، يتم تعقيم الطعام عن طريق التعقيم.

الآن بعد أن تعلمنا القليل عما يأكله الذباب ، دعنا نلقي نظرة على المكان الذي يعيشون فيه وكيف يتم التعامل معهم.

تستخدم مجموعة متنوعة من الحاويات لإيواء الذباب. تستخدم القوارير لصيانة الذباب وتحتوي على النحو الأمثل 50-100 بالغ. تستخدم الزجاجات للثقافات الكبيرة وتضم 300-600 ذبابة بالغة. تتحكم الحاضنات في البيئة وهي قادرة على حمل مئات القوارير والزجاجات. ظروف التخزين العادية للذباب هي 25 درجة مئوية ورطوبة نسبية 60-65٪.

عند العمل مع الذباب ، من المهم ممارسة وضع العلامات والتوثيق المناسبين ، والحفاظ على بيئة نظيفة للحفاظ على سلامة خطوط الطيران والتجارب. يجب تغيير الحاوية عندما يكون حوالي نصف الشرانق مغلقا أو يترك غلاف العذراء. ستظهر الأغلفة واضحة.

لمعلوماتك ، تحدث مرحلة العذراء بين مرحلتي اليرقات والبالغين ، وهي الوقت الذي تحتضن فيه اليرقات وتتطور إلى شخص بالغ. لتحديد أغلفة العذراء على أنها واضحة ، امسك الحاوية إلى مصدر الضوء وافحص خادرة.

يتم نقل الذباب إلى قوارير ذات وسائط جديدة - وهو اسم خيالي لطعام الذباب - عبر عملية تعرف باسم "تقليب الذباب". قبل تقليب الذباب ، افحص الوسائط للتأكد من سلامتها. لا يمكن للذباب البقاء على قيد الحياة على الطعام المتشقق بالجفاف أو الملوث بالعفن أو البكتيريا.

لقلب الذباب ، أولا ، اضغط على قارورة الذبابة برفق على المنضدة لطرد الذباب من جوانب القارورة. ثم قم بإزالة السدادة بسرعة ، وقم بقلب الذباب من الحاوية القديمة بسرعة إلى حاوية جديدة. تتم هذه العملية بسرعة ، لمنع الذباب من الهروب أو سحقه بواسطة السدادة ، ولمنع الذباب السائب من دخول القارورة أثناء التقليب.

في حين أن تقليب الذباب هو الطريقة المفضلة للنقل السائب لذبابة الفاكهة ، فإن التخدير مطلوب لفرز الذباب. ستتم مناقشة طريقتين للتخدير هنا: التبريد واستخدام ثاني أكسيد الكربون. لتبريد الذباب ، ضع المزرعة في فريزر -20 درجة مئوية لمدة 8-12 دقيقة. ثم ضع الذباب في مساحة عمل مبردة ومسطحة للاختيار. يمكن أيضا تخدير الذباب باستخدام البرد عن طريق تبريده مباشرة على سطح متجمد.

ثاني أكسيد الكربون هو طريقة مفضلة للتخدير لأنه لا يسبب وفيات حادة في الذباب أو خطرا على الباحث. يتكون نظام توصيل ثاني أكسيد الكربون : خزان ثاني أكسيد الكربون ؛ أنبوب متصل بإبرة لتخدير الذباب في قوارير وزجاجات ؛ وأنبوب متصل بلوحة CO2 لتحليلها تحت المجهر.

لتخدير الذباب ، أدخل إبرة CO2 من خلال السدادة. بدلا من ذلك ، اضغط على الحاوية على سطح ، وقم بإزالة التوقف ، وقم بقلب الذباب بسرعة على لوحة CO2 ، مع الاحتفاظ بختم مغلق حتى يصبح الذباب غير متحرك. باستخدام فرشاة أو ملقط ، انقل الذباب برفق إلى الحاوية الجديدة.

للتخلص من الذباب غير المرغوب فيه ، قم بإلقائها في مشرحة الذباب ، والتي تتكون من زجاجة كبيرة مملوءة بالأيزوبروبانول أو الإيثانول والزيت المعدني تعلوها قمع.

الآن بعد أن رأينا كيف يتم الحفاظ على الذباب والتعامل معه في المختبر ، دعنا نلقي نظرة على كيفية تعديل ظروف السكن والتغذية لتجارب مختلفة.

تتطلب بعض التجارب سكنا بديلا لاحتواء كمية أكبر من الذباب.

في هذه التجربة ، يستخدم الباحث قفصا للذباب لجمع كمية كبيرة من الأجنة. قفص سكان الذباب واضح ، صندوق بلاستيكي قادر على حمل آلاف الذباب. يطلق الباحث الذباب المطلوب من عدة زجاجات في قفص الذباب ، ثم يضع ألواح أجار في القفص لجمع الأجنة.

تتطلب بعض التجارب التلاعب بالنظام الغذائي للذبابة.

في هذه التجربة ، يريد الباحث مراقبة استجابة الهروب للذباب المعدل وراثيا الذي يعبر عن قناة أيونية يتم تنشيطها بالضوء في الخلايا العصبية التي تنظم استجابة هروب الذباب. يتم استكمال حمية ذبابة الفاكهة ب "جميع الشبكية العابرة" ، وهو عامل مساعد لهذه القناة ويسمح لها بالعمل. يتم ذلك عن طريق إذابة الطعام وإضافة الكاشف. ثم تتعرض الذبابة للضوء الأزرق الذي ينشط القناة ويحفز استجابة الهروب ، ويتم قياس الوقت المستغرق للطيران.

يمكن التلاعب بمجموعة متنوعة من ظروف السكن والمناولة للتجريب.

في هذه التجربة ، تم إنشاء "برج طاقة" متقن لدراسة آثار التمرين على ذبابة الفاكهة. برج الطاقة عبارة عن آلة ترتفع وتنخفض باستمرار ، مستفيدة من الاستجابة الطبيعية للذبابة للتحرك لأعلى ، ضد الجاذبية ، والتي تعرف باسم "التاكسي الجيولوجي السلبي".

يتم قياس أداء الذباب الذي يتم ممارسته في برج الطاقة باستخدام مقايسة Geotaxis السلبية التكرارية السريعة ، أو اختبار RING باختصار. يتم وضع الذباب في قوارير فارغة أمام الكاميرا. يتم النقر على القوارير وتسجيل المسافات التي تم تسلقها. تظهر هذه التجربة أنه بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ، كان للتمرين تأثير إيجابي على النشاط بمرور الوقت.

غطى فيديو JoVE هذا صيانة وتربية ذبابة الفاكهة السوداء. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن تكون قادرا على إعداد وسائط طعام الذباب ، وتحديد السكن المناسب بشكل صحيح ، وقلب الذباب ، وإجراء تجارب بسيطة. شكرا للمشاهدة!