الديدان الطفيلية جمع وتحديد الهوية من الحياة البرية

الهدف العام من هذا الإجراء هو جمع الخوذات من الحياة البرية والحفاظ عليها والتعرف عليها. يتم تحقيق ذلك عن طريق التشريح الأول ، وهو بري. بعد ذلك ، يتم جمع الخوذات من أعضاء مختلفة ، ثم يتم الحفاظ على الخوذات باستخدام مجموعة متنوعة من التقنيات لتحديد الهوية لاحقا.

أخيرا ، يتم إزالة الخوذات وتلطيخها وتركيبها ، ويتم تحديد الأنواع. في النهاية ، يمكن الحصول على نتائج تظهر هياكل خوذة محددة من خلال تقنيات المقاصة و / أو التلوين التي يمكن أن تساعد بشكل كبير في تحديد الأنواع. على الرغم من أنه يمكن تطبيق هذه الطريقة لتحديد الخوذات من الثدييات والطيور والزواحف والبرمائيات.

يمكن تطبيقه أيضا على الكائنات الحية الأخرى مثل الأسماك. للبدء ، ضع على سطح مستو واستخدم عدسة مكبرة لفحص جميع الفتحات الخارجية ، بما في ذلك الأذنين وتجويف الفم والعينين بحثا عن وجود الديدان الخيطية ، و CSEs ، وأصابع القدم ، والمثقوبات. باستخدام شفرة حادة أو سكين وزوج من ملقط التشريح.

قم بعمل شق في تجويف البطن مع الحرص على عدم تمزق أي أعضاء. ثم باستخدام قواطع العظام أو منشار صغير محمول إذا لزم الأمر ، افتح التجويف الصدري. افحص كلا التجاويف بحثا عن الديدان المستديرة والمثقوبات الكبيرة.

ثم اربط خيطا قريبا من بداية المريء وخيطا آخر في نهاية الأمعاء الغليظة للفحص. تحت مجهر ستيريو ، افصل القلب والأوعية الدموية الرئيسية والقصبة الهوائية والرئتين في أطباق بتري فردية. قم بإزالة الكبد والمرارة والبنكرياس والقناة والطحال والكلى والمثانة البولية وفحصها تحت المجهر الاستريو.

ثم قم بإزالة الجهاز الهضمي بالكامل وضع كل قسم في طبق زجاجي. بعد إزالة الأعضاء ، استخدم خرطوما أو زجاجة بخاخ مملوءة بمحلول ملحي بنسبة 0.9٪ لغسل تجويف الجسم ، مما يسمح له بالترشيح من خلال منخل شبكي 106 ميكرومتر. اغسل محتويات المنخل في طبق بتري وافحص المحتويات تحت مجهر ستيريو بالنسبة لديدان فال أو المثقوبات الدموية باستخدام المقص ، افتح كل قسم من أقسام الجهاز الهضمي.

اكشط الغشاء المخاطي وفحصه بعناية بحثا عن وجود طفيليات كبيرة. غالبا ما تكون psci من encanto cephas مغروسة بعمق في جدار الأمعاء. لذلك ، إذا لزم الأمر ، استخدم ملقطا و / أو مقصا صغيرا لمضايقتها بعناية من الأنسجة.

ضع كل قسم مفتوح تحت الماء الجاري واغسل المحتويات في منخل 106 ميكرومتر. ثم افتح القلب والأوعية الدموية الرئيسية والقصبة الهوائية والبول والمرارة ، وافحص المحتويات بنفس الطريقة ، استخدم شفرة حادة وملقط لتقطيع وفصل الأعضاء الصلبة مثل الكبد والرئتين والكلى والطحال والبنكرياس ، وغسل وفحص المحتويات. سجل أنواع الطفيليات.

تم العثور على عدد كل نوع والأعضاء التي توجد فيها. قم بتسمية القوارير أو البرطمانات عن طريق وضعها داخل قطعة صغيرة من بطاقة فهرسة عادية مكتوبة بالقلم الرصاص للحفاظ على الخوذات للدراسات الجينية اللاحقة. أولا ضعهم مباشرة في الإيثانول.

بعد تثبيت العينة لمدة يوم إلى عدة أيام ، انقلها إلى قارورة زجاجية سعة خمسة ملليلتر مملوءة بنسبة 70٪ من الإيثانول للتخزين طويل الأجل. للحفاظ على الديدان المثقوبة ، ضع العينات الحية على مجهر زجاجي ، وانزلق في قطرة من المحلول الملحي ، وقم بتطبيق زلة غطاء زجاجي ، وقم بتمرير الشريحة فوق اللهب دون غليان المحلول الملحي. ثم قم بإسقاط الشريحة في طبق بتري يحتوي على الكحول أو حمض الأسيتيك الفورمين أو FA واترك الغطاء ينزلق يطفو.

قم بإصلاح الديدان المثقوبة الميتة في فورمين FA أو 10٪ مخزن لمدة 48 ساعة قبل نقلها إلى وعاء مملوء بالإيثانول بنسبة 70٪ للتخزين طويل الأجل. لإصلاح estos ، استرخ الحية في طبق بتري عن طريق سكب الماء المغلي بالقرب منها ، ثم انقلها إلى برطمان مملوء بنسبة 70٪ من الإيثانول للتخزين طويل الأجل. استرخ encanto cephas الحية عن طريق وضعها في طبق بتري من ماء الصنبور في الثلاجة لمدة ساعة إلى عدة ساعات حتى يتم تجنب خرطوم تماما.

انقلها إلى برطمان مملوء بنسبة 70٪ من الإيثانول أو FA للتخزين طويل الأجل. اقتل الديدان الخيطية الصغيرة أو الهشة والإيثانول الساخن بنسبة 70٪ واحتفظ بها في وعاء مملوء بنسبة 70٪ من الإيثانول مع 5٪ من الجلسرين للقتل. الديدان الخيطية المتوسطة إلى الكبيرة.

ضعها في حمض الخليك الجليدي البارد ، وبعد 15 دقيقة ، انقلها إلى وعاء مملوء بنسبة 70٪ إيثانول و 5٪ جلسرين. تحضير هاريس هيماتين عن طريق إذابة الهيماتين والكحول وإذابة كبريتات الألومنيوم الأمونيوم في ارتفاع درجة حرارة الماء. اخلطي كلا المحاللين واتركيها حتى الغليان.

ثم يضاف يودات الصوديوم ويغلى لمدة دقيقتين إلى ثلاث دقائق. عندما يتم تبريد المحلول ، استخدم 5 41 ورق ترشيح لتصفية المحلول لتلطيخ الديدان المثقوبة بشكل علني وصب Cephas Place في Harris Hematin أو semicon Carmine طوال الليل لاحتجاز العينات. ضع في 70٪ من الإيثانول الحمضي حتى تظهر الأعضاء.

لوقف التلوين ، انقل العينات إلى 70٪ من الإيثانول الأساسي لمدة 30 دقيقة على الأقل. قم بتجفيف العينات في سلسلة الإيثانول واستخدم الزيلين أو الميثيل ساليسيلات لتنظيفها لتركيب العينات على شريحة مجهرية ، وإضافة قطرة من كندا بوسوم وقلة غطاء. اتركيه يجف طوال الليل ، ونظف الديدان الخيطية الصغيرة والمتوسطة و encanto cephas عن طريق وضعها في حوامل من الفينول اللاكت على شريحة مجهرية وتغطيتها بقلة غطاء لمدة 15 إلى 30 دقيقة للديدان الخيطية الكبيرة و encanto Cephas.

ضعها في 80٪ فينول لمدة تصل إلى 60 دقيقة. افحص تحت المجهر الضوئي للتحقق من تطهير الهياكل الأصغر لفحص culex atos. اقطعها وضعها على كمية الفينول اللاكتو.

على شريحة مجهرية. استخدم زلة غطاء لسحق القشرة لتمكين قياس وعد الخطافات النجمية الوردية. اقطع الطرف الأمامي وقم بتثبيته على الحفرة على المجهر.

انزلق تحت بضع قطرات من الفينول اللاكتي أو في هلام الجلسرين للتركيب الدائم. راقب أجزاء الفم تحت المجهر الضوئي. بعد قطع ذيول الديدان الخيطية الكبيرة والتركيب في الفينول اللاكتو ، لاحظ مورفولوجيا الباولي البطنية والمورفولوجيا الشوكية للذكور تحت مجهر ضوئي باستخدام الطرق الموضحة في هذا الفيديو.

تم إجراء مسح لخوذات سيناريوهات القناع الزبابة Sox في مقاطعة ميسولا ، مونتانا. بين عامي 2007 و 2011. تم جمع ما مجموعه 56 زبابة من مصائد المزالق وفحصها في غضون ساعتين بعد الوفاة.

كان الانتشار الإجمالي للعدوى 96٪ ، وكان اثنان فقط من الزبابة خاليين من الطفيليات. تم تحديد 15 نوعا من الخوذات بما في ذلك تسعة أنواع من الاستوس وستة أنواع من الديدان الخيطية. نوع واحد من سلطات الجنس Esto staphylo لم يتم وصفه من قبل.

وشملت الأعضاء المصابة الأمعاء الدقيقة والمعدة والرئتين والمثانة البولية. تراوحت الشدة الإجمالية للعدوى من سبعة إلى 234 دودة لكل نوع مضيف مصاب أو تراوح عدد أنواع الخوذة لكل مضيف مصاب من واحد إلى ثمانية بمتوسط 4.1 بمجرد إتقانها. يمكن إجراء هذه التقنية في واحد إلى اثنين من Rs على ثديي صغير مثل السنجاب ، وأربعة إلى خمسة روبية على ثديي أكبر مثل الراكون.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد جدا لكيفية جمع الخوذات من الحياة البرية والحفاظ عليها والتعرف عليها.