طرق جمع الحليب لالفئران وريفز 'Muntjac الغزلان

الهدف العام من هذا الإجراء هو توضيح كيفية جمع الحليب من فأر أو غزال ريفز موت جاك لاستخدامه في مجموعة متنوعة من التجارب العلمية. يتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق إعطاء الأوكسيتوسين للحيوان لتحفيز إدرار الحليب، ثم يتم تخدير الحيوان. بعد ذلك، يقوم باحث بعصر الحليب يدويًا بينما يقوم باحث ثانٍ بجمعه.

تتمثل الخطوة النهائية في ضمان سلامة الحيوان أثناء تعافيه من التخدير. وفي النهاية، يمكن جمع ما يقرب من 5 إلى 30 milliliters من حليب سمكة الموت جاك (mutt jack) في الجلسة الواحدة، أو ما يصل إلى 450 microliters من حليب الفأر في الجلسة الواحدة. وتكمن الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية، مثل تلك التي تتطلب معدات متخصصة، في أنها غير مكلفة نسبيًا وسهلة التعلم.

يمكن لهذه الطريقة أن تساعد في الإجابة على عدة تساؤلات علمية، مثل ما إذا كان من الممكن انتقال مسبب المرض من الأم إلى النسل عبر الحليب. وعادةً ما يشعر الأشخاص المبتدئون في هذه الطريقة بالإحباط لأن استخراج الحليب بشكل صحيح يتطلب تدريباً. ستساعدني في هذا الإجراء ستيفاني فول أوي، وهي فنية من مختبرنا، لتحفيز إفراز الحليب في فأرة مرضعة.

قم بإعطاء وحدتين دوليتين لكل كيلوغرام من الأوكسيتوسين عن طريق الحقن داخل الصفاق مباشرة قبل جمع الحليب، ثم قم بتخدير الفأر ووضع كمية صغيرة من مرطب العين في كل عين لمنع جفاف عيني الفأر أثناء انتظار بدء مفعول التخدير. قم بتجهيز بعض منصات التحضير الكحولية المعقمة، وماصة P 200، ورؤوس ماصات معقمة، ووعاء لحفظ الحليب مثل أنبوب إبندورف سعة 1.5 milliliter، أو أنبوب حفظ بالتجميد سعة 1.2 milliliter. تتطلب عملية حلب الحليب وجود باحثين اثنين.

يقوم الشخص الأول بتثبيت الحيوان واستخراج الحليب، بينما يتولى جامع الحليب عملية جمع الحليب مع الحرص على تجنب تلوث وعاء الجمع. وباستخدام وسادة تنظيف كحولية معقمة، يقوم مستخرج الحليب بتنظيف منطقة الضرع بلطف قبل البدء في عملية الحلب.

خلال دقيقة أو دقيقتين من حقن الأوكسيتوسين، يصبح تدفق الحليب مرئيًا في المنطقة الثديية للفأرة. قم بعصر الحليب يدويًا من الحلمة باستخدام الإبهام والسبابة لتدليك وضغط أنسجة الثدي بلطف بحركة صاعدة حتى تبدأ قطرة مرئية من الحليب في التكون عند قاعدة الحلمة. يقوم جامع الحليب الآن بالضغط على مكبس ماصة P 200 إلى التوقف الأول لإخراج الهواء من طرف الماصة والتحضير لجمع الحليب.

بعد ذلك، يضع جامع الحليب طرف الماصة عند الجزء العلوي من قطرة الحليب. ومع الحرص على عدم تقريب الطرف بشكل مفرط من الحلمة أو الجلد، يحرر جامع الحليب الضغط عن المكبس ببطء لسحب الحليب إلى طرف الماصة، مع ضغط طرف الماصة مقابل جدار أنبوب الجمع لضمان عدم فقدان أي سائل. ثم يستخدم جامع الحليب إبهامه لضغط المكبس متجاوزاً نقطة التوقف الأولى لطرد الحليب داخل الحاوية.

استمر في حلب الحليب يدويًا من كل حلمة، مع التحرك إما في اتجاه عقارب الساعة أو عكس اتجاه عقارب الساعة. ومن المقبول العودة إلى حلمة سابقة لحلب المزيد من الحليب، خاصة إذا كانت تنتج كمية أكبر من الحليب مقارنة بالحلمات الأخرى. وعند الانتهاء من جمع الحليب، اترك الفأر ليستفيق من التخدير.

بمجرد أن تبدأ الأنثى في التحرك بسهولة داخل القفص، أعِدها إلى قفصها الأصلي مع صغارها لتحفيز إدرار الحليب. وفي حالة غزال ريفز الهجين (reeve's mut jack deer) المرضع، يتم إعطاء 10 وحدات دولية لكل كيلوغرام من الأوكسيتوسين عن طريق الحقن العضلي، ثم يتم تخدير الحيوان الهجين على الفور. ويُعتبر مستوى التخدير كافياً إذا كانت هناك ردود فعل طفيفة فقط عند لمس الأذنين، وإذا كان بإمكان الشخص القائم بعملية استخراج الحليب إمساك الحيوان الهجين دون مقاومة.

بعد ذلك، ضع كمية صغيرة من المادة المزلقة في كل عين لمنع جفاف عيني أنثى الكلب. قم بتجهيز كل من جهاز استخلاص الحليب وجهاز جمع الحليب بشاش مبلل بالإيثانول وعدة أنابيب بولي بروبيلين مخروطية سعة 15 milliliter لحفظ الحليب. ومع بدء مفعول الأوكسيتوسين، يبدأ ظهور تدفق الحليب في منطقة الثدي لدى أنثى الكلب.

يجب على كل من الشخص المسؤول عن استخراج الحليب ومجمّع الحليب ارتداء القفازات وتعقيمها باستخدام شاش مبلل بالإيثانول. كما يجب استخدام شاش مبلل بالإيثانول لتعقيم الضرع بالكامل وكل حلمة على حدة، مع تثبيت رأس الحيوان في وضعية مريحة للسماح بسهولة التنفس ومنع ارتجاع الكرش. يضع مجمّع الحليب أنبوب الجمع بالقرب من الحلمة التي يتم حلبها دون ملامستها للجلد.

يستخدم الشخص القائم بعملية استخراج الحليب الإبهام والسبابة للضغط برفق على النسيج الثديي بحركة صاعدة حتى تمتلئ الحلمة بالحليب، ثم يقوم بدفع الحليب برفق من الحلمة إلى الأنبوب الذي يمسكه جامع الحليب. يتدفق الحليب في شكل تيار، لذا من المهم وضع أنبوب الجمع بحيث يتم تقليل كمية الحليب المهدورة. ينقسم ضرع Mt Jack إلى أربعة أرباع.

يستمر جهاز استخلاص الحليب في استخلاص الحليب من كل ربع حتى يتوقف تدفق الحليب بسهولة. إذا تعذر استخلاص الحليب من حلمة واحدة، يتم الاستخلاص من جميع الحلمات الأخرى قبل العودة إلى الحلمة الأولى، وعند الانتهاء من جمع الحليب، يتم إعطاء aamaz تحت الجلد لعكس مفعول تخدير bam بسرعة، وأخيراً يتم مراقبة الأنثى حتى تصبح قادرة على المشي والأكل والشرب بمفردها. يشير هذا الشكل إلى أنه يمكن الحصول على 100 إلى 450 µL من الحليب من فأرة مرضعة.

تم جمع أقصى أحجام الحليب من ثمانية إلى 12 يوماً بعد الولادة باستخدام وحدتين دوليتين لكل كيلوجرام من الأوكسيتوسين. يظهر هنا متوسط إنتاج الحليب التقريبي من فأرة مرضعة مرسوماً وفقاً لحجم البطن في سلالة reeve's mut jack deer. تراوح حجم الحليب الذي تم جمعه في الجلسة الواحدة من 5 إلى 30 ملليلتر اعتماداً على نوع التخدير المستخدم ووقت بدء وانتهاء عمليات جمع الحليب بعد الولادة؛ وتوضح هذه الجدولة تواريخ جمع الحليب لأمهات mut, Jack.

جُمع الحليب على مدار متوسط 80 يوماً، وبنطاق يتراوح من 18 إلى 150 يوماً. وبمجرد إتقان هذه التقنية، يمكن تنفيذها في غضون ساعة واحدة تقريباً، وذلك اعتماداً على عدد الحيوانات التي ترغب في الجمع منها في الجلسة الواحدة. وأثناء محاولة إجراء هذه العملية، من المهم دائماً تذكر أن سلامة الحيوانات تأتي في المقام الأول. وبناءً على هذا الإجراء، قد تكون معالجة الحليب ضرورية، تليها اختبارات في المختبر (in vitro) أو مقايسات حيوية، والتي قد تساعد في الإجابة على أسئلة إضافية حول المكونات الموجودة في الحليب.