تقييم التغيرات في المتطايرة العام التخدير حساسية من الفئران بعد التدخل الدوائي المحلي أو الجهازية

الهدف العام من هذا الإجراء هو تقييم التغيرات في حساسية التخدير بعد التدخل الدوائي. يتم تحقيق ذلك عن طريق فحص غرف التعرض بعناية أولا لضمان تدفق الغاز ودرجة الحرارة بشكل موحد. الخطوة الثانية هي تعويد على الغرف.

بعد ذلك ، يتم تنفيذ التدخل الدوائي ذي الأهمية. الخطوة الأخيرة هي تقييم التغيرات في حساسية التخدير من خلال تقييم منعكس الكتابة للحيوان استجابة للتعرض للتخدير. في النهاية ، تستخدم فحوصات الكتابة الانعكاسية لإظهار الاختلافات في حساسية التخدير الناتجة عن التدخلات الدوائية طويلة المفعول أو قصيرة المفعول.

على الرغم من أن هذا النظام يمكن أن يوفر نظرة ثاقبة للتغيرات في حساسية التخدير لدى الفئران ، إلا أنه يمكن استخدامه أيضا في مجموعة متنوعة من الأنواع لدراسة آثار أي علاج يتم استنشاقه. يتكون جهاز الاختبار من 24 غرفة أسطوانية أكريليك شفافة ، طولها 10 سم ، وقطرها خمسة سنتيمترات. هذا الحجم مناسب للفأر البالغ النموذجي الذي يبلغ وزنه 25 جراما.

تحتوي كل غرفة على منفذ في كل طرف لمدخل ومخرج الغاز. نهاية المخرج محكمة الغلق بجوانات مطاطية لتسهيل إزالتها. لإدخال ، قم بتركيب كل غرفة على رف يجلس داخل حمام مائي.

ضع الرف بحيث يتم غمر الجزء السفلي فقط من الغرف. يوفر الدعم الموجود في الطرف الخلفي للغرفة الثبات ويحافظ على الغرف أفقية ، مما يضمن ملامسة متساوية لكل غرفة مع الحمام. بعد توصيل خزان الأكسجين بالمرذاذ ومقياس التدفق بأنابيب البولي إيثيلين ، قم بتقسيم الأنبوب إلى 25 مقاوما صغيرا بقطر متساو في الطول.

هذا يضمن توصيل تدفق متساو لكل غرفة عند التوصيل. بعد ذلك ، قم بتوصيل خطوط التفريغ التي تخرج من كل غرفة في الطرف المقابل لمدخل الغاز. تتحد خطوط التفريغ في مشعب للاتصال بخط شفط داخلي.

الصمام المنبثق على طول خط التفريغ الرئيسي ظروف الضغط الجوي داخل كل غرفة. بمجرد توصيل كل شيء ، املأ الحمام بما يكفي من الماء للاتصال الكامل بقاع كل حجرة. قم بتشغيل المضخة لتدوير الماء والحفاظ على درجة حرارة ثابتة تبلغ 37 درجة مئوية.

قبل الشروع في الاختبار ، يتم فحص الغرف بحثا عن التسريبات وتدفق الهواء المناسب. أولا ، اضبط الأكسجين على معدل خمسة لترات في الدقيقة. اغمر كل غرفة تحت الماء وابحث عن الفقاعات أو دخول المياه ، وكلاهما مؤشر على التسريبات.

استبدل أي غرف مسربة قبل بدء التجربة. لكل غرفة ، قم بتوصيل مقياس تدفق 500 مليلتر في الدقيقة في الخط قبل الغرفة للتأكد من أن التدفقات متوازنة عبر كل خط. يجب فحص أي غرفة لا تتلقى التدفق المتوقع أنبوبها بحثا عن العوائق.

أخيرا ، قم بمعايرة محلل العامل لضمان قراءة 0.0٪ من الفلور عندما يتدفق الأكسجين بنسبة 100٪ قبل أسبوع واحد من التعود على الطبيعة. يتم زرع أجهزة الإرسال والاستقبال لتتبع درجة حرارة الجسم أثناء الاختبار. بعد تحقيق عمق التخدير المناسب ، قم بتعقيم منطقة الرقبة الظهرية باستخدام البيتادين.

بعد ذلك ، استخدم إبرة معقمة لحقن أجهزة الإرسال والاستقبال في درجة الحرارة تحت الجلد بين لوحي الكتف. مراقبة موقع الحقن يوميا للعدوى وهجرة جهاز الإرسال والاستقبال. قبل أربعة أيام من التقييم الأول ، يتم تعويد جميع الاختبار على الغرف لتقليل آثار الإجهاد بسبب البيئة الجديدة.

للقيام بذلك ، ضع في كل غرفة مع تدفق الأكسجين بنسبة 100٪ لمدة ساعتين. كرر هذا التعرض يوميا حتى الاختبار. بعد أربعة أيام من السكن ، يبدأ يوم الاختبار بالتعرض للتدخل الدوائي ذي الأهمية.

قد يكون هذا التدخل عبارة عن حقنة تجسيمية في منطقة معينة من الدماغ ، أو حقنة في الوريد ، أو حقنة داخل الصفاق للتدخلات الدوائية. مع مدة طويلة من العمل ، يتم إجراء تحديد تدريجي لحساسية التخدير. ابدأ الاختبار بوضع كل في غرف فردية مع تدفق الأكسجين بنسبة 100٪ بمجرد وضع جميع في مكانها.

اضبط تركيز الفلور على 0.4٪ لمدة 15 دقيقة. خلال الدقيقتين الأخيرتين من هذه الفترة ، قم بتقييم رد الفعل الكتابي لكل عن طريق لف الغرفة برفق حتى يتم وضع الفأر على ظهره. يعتبر رد الفعل الكتابي سليما إذا كان الماوس قادرا على استعادة جميع كفوفه إلى أرضية الغرفة.

في غضون دقيقتين ، سجل حالة رد الفعل الكتابي لكل ماوس وامسح كل ماوس بحثا عن بيانات درجة الحرارة. بعد ذلك ، قم بزيادة تركيز الفلور بنسبة 0.05٪ تقريبا لمدة 15 دقيقة ، وقم بتقييم رد الفعل الكتابي كما هو موضح سابقا. استمر في زيادة تركيز التخدير حتى تفقد جميع منعكس الكتابة.

اختياريا ، يمكن قياس ظهور التخدير عن طريق تكرار تقييم منعكس الكتابة التدريجي حيث يتم معايرة تركيز التخدير لأسفل. لإنهاء التجربة ، قم بإيقاف تشغيل الفلور وغسل النظام بأكمله بأكسجين بنسبة 100٪ لمدة 15 دقيقة للتدخلات ذات المدة الأقصر. يتم إجراء اختبار وقت الظهور.

بعد وضع كل في غرف فردية مع تدفق الأكسجين بنسبة 100٪ ، اضبط تركيز الفلور على 1.2٪ بعد عدة دقائق من التعرض للتخدير ، قم بلف كل غرفة برفق حتى يبقى كل فأر على ظهره. لتأكيد فقدان منعكس الكتابة ، حافظ على تركيز الفلور عند 1.2٪ لمدة 30 دقيقة إلى ساعة واحدة اعتمادا على المدة المتوقعة للعمل للتدخل الحاد. بعد إيقاف تشغيل تدفق الفلور بنسبة 100٪ من الأكسجين وقياس الوقت حتى يضع كل الكفوف الأربعة على الأرض.

يعتبر رد الفعل الكتابي سليما عندما يمكن للحيوان وضع الكفوف الأربعة على الأرض ثلاث مرات متتالية. هنا ، تم اختبار منعكس الكتابة بعد أسبوع واحد من حقن حمض البوتانيك في نواة ما قبل العملية الجانبية البطنية. كان من المتوقع أن تقلل آفة في هذه المنطقة من الدماغ من حساسية التخدير.

ومع ذلك ، لم يتم العثور على فروق ذات دلالة إحصائية في حساسية التخدير التدريجي إما للتحريض أو الظهور. في هذا المثال ، تم إجراء اختبار وقت الظهور مباشرة بعد الحقن المجهري للحمض النباتي الثنائي. عند حقنها في VLPO ، كان هناك تنويم مغناطيسي طويل بشكل ملحوظ مقارنة بالحقن منذ أن حقن الحاجز الإنسي القريب والسيارة اللذين حقنتا الضوابط.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تقييم حساسية التخدير باستخدام اختبار الحث التدريجي أو اختبار وقت الظهور مع التأكد من تعرض كل لتدفقات ودرجات حرارة غازية متطابقة.